外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200 nm,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70—90個堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(雙鏈)但是和siRNA密切相關(guān)。microRNA通過和靶基因mRNA堿基配對引導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻譯,從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達。microRNA在物種進化中相當保守,在動物、植物等中發(fā)現(xiàn)的microRNA表達均有嚴格的組織特異性和時序性。microRNA在細胞生長和發(fā)育過程中起多種...
外泌體的提取方法:免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。PS法可提取相當高純度的外泌體。色譜法,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不寬泛。有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上。腦脊液外泌體lncRNA測序通過對28例前列腺ai癥患...
目前為止已鑒別了2500余種miRNAs分子。例如,血液外泌體miR-21的升高已被證實與胰腺ai、結(jié)直腸ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai及食管ai等多種中流相關(guān),可能與其參與中流xue管生成有關(guān),研究表明肺ai細胞釋放的外泌體miR-21會通過STAT3依賴機制誘導(dǎo)周圍支氣管細胞血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的產(chǎn)生,從而促進血管生成。在食管ai中,miR-21還可以反映中流的惡性程度,食管ai患者的miR-21水平與良性中流患者相比急劇上升,上升的miR-21水平也與中流的淋巴侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。在膀胱ai患者中,尿液中的miR-21...
細胞分泌外泌體的過程一般分為三個階段: (1) 質(zhì)膜內(nèi)陷, 形成早期內(nèi)吞小泡; (2) 內(nèi)吞小泡向內(nèi)萌發(fā)成熟, 形成多囊泡體; (3) 多囊泡體與質(zhì)膜融合, 并釋放出囊泡內(nèi)容物, 形成外泌體。外泌體具有獨特的理化性質(zhì), 其密度為1.13~1.19 g/mL, 由平均厚度小于5 nm的雙層脂膜所包裹, 具有典型杯狀形態(tài), 呈現(xiàn)為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈, 其質(zhì)膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經(jīng)酰胺和鞘磷脂構(gòu)成, 另有與細胞來源相關(guān)的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)等生物活性大分子, 其中主要為蛋白質(zhì), 且大部分蛋白為所有來源外泌體所共有, 只有小部分與其來源有關(guān), ...
外泌體是細胞在特定條件下分泌的小囊泡,是細胞間傳遞信號,相互溝通和影響的重要工具,它可以直接進入受體細胞影響細胞功能。外泌體PK細胞因子:磷脂雙層膜結(jié)構(gòu),可保護內(nèi)容物,包含多種細胞因子可直接進入受體細胞。外泌體PK干細胞:無免疫排斥,體積小穿透力強,可避免倫理道德爭議。年輕的脂肪組織中提取外泌體,在特定條件下擴大培養(yǎng)出具有調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細胞功能的外泌體,包含多種細胞因子的外泌體直接進入毛發(fā)根部的囊細胞,恢復(fù)毛發(fā)根部的囊干細胞的正常功能。有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上。湖南外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定, 將血清在4 °C短期保存期間即發(fā)生降解, 這可能是...
尺寸排除色譜法是使用聚合物凝膠或類似的固定相柱進行外泌體分離的技術(shù), 樣品以重力滴落的方式收集。流體力學(xué)半徑較小的樣品組分進入凝膠孔隙后, 需耗費相對較長的時間通過凝膠柱, 導(dǎo)致延遲洗脫, 實現(xiàn)不同粒徑大小顆粒分離。尺寸排除色譜法可以與差速離心法結(jié)合而不會明顯損失外泌體, 保證產(chǎn)量的同時可有效去除雜質(zhì)蛋白, 更適合目標蛋白質(zhì)組學(xué)和miRNA的分析。靜水過濾透析法主要利用靜水壓力迫使樣品中不同特定大小分子先后通過透析管, 其中溶劑和小溶質(zhì)很容易通過透析管, 而較大的顆粒, 如外泌體和其他囊泡, 仍留在透析管中而被收集。干細胞外泌體具有抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能。黑龍江外泌體tm...
外泌體可以由體內(nèi)或體外培養(yǎng)的幾乎所有類型的細胞分泌, 并廣fan存在于血漿、膽汁、尿液、母乳、唾液、胸腔積液、淋巴、胃酸、支氣管肺泡灌洗液、腦脊液、眼淚、滑膜液、羊水、腹水、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中。目前, 基于不同的分離原理, 研究者建立了五種主要的提取純化技術(shù), 分別為基于質(zhì)量密度的超速離心技術(shù)、基于粒徑大小的分離技術(shù)、基于溶解性質(zhì)的聚合物沉淀技術(shù)、基于免疫親和原理的分離技術(shù)和基于流體性質(zhì)的微流控技術(shù)。結(jié)果表明,PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。江蘇體液外泌體鑒定除了siRNA和miRNA,mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運輸。研究表明,在移植了人...
外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性,為其能成為瘤早期診斷的生物標志物提供了重要保障。但目前對于外泌體miRNA、LnkRNA等的檢測方法還不成熟,限制了外泌體用于疾病診斷中的應(yīng)用?;谕饷隗w的診斷產(chǎn)品獲得FDA批準上市,很大程度的增加了研發(fā)企業(yè)的信心。外泌體的異質(zhì)性又決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)不能提供一個普適的遞藥策略,必須根據(jù)所傳遞治理物質(zhì)的類型、目標組織的特點等進行針對性的進行策略調(diào)整。良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等使外泌體在藥物遞送方向大有潛力。前列腺ai患者的血漿和尿液中的外泌體含有更多的前列腺特異抗原(PSA)。海洋生物外泌體質(zhì)譜中流細胞分泌的外泌體可以通過體液進入特定...
除了siRNA和miRNA,mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運輸。研究表明,在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來的外泌體含有中流細胞特異性的mRNA,而被愛潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而,外泌體的這種運載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期,Saydam等率先報道了利用多泡體(含外泌體)負載mRNA/蛋白進行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對HEK-293細胞進行轉(zhuǎn)染,使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRT EGFP,其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;...
雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢,但在臨床應(yīng)用上仍有一些限制:外泌體的提取方法金標準仍然是差速離心法,但這種方法費時費力且提取效率較低,難以進行臨床推廣和應(yīng)用;而商業(yè)化的試劑盒質(zhì)量參差不齊,往往導(dǎo)致提取物雜質(zhì)過多,且其售價較高。外泌體的定量是采用顆粒濃度定量,蛋白濃度定量,亦或是核酸濃度定量,目前仍存有爭議。由于傳統(tǒng)的內(nèi)參并不適用于外泌體,在實時熒光定量PCR檢測靶分子含量時內(nèi)參的選擇尚沒有統(tǒng)一的標準。外泌體分子標志物的研究還處于初級階段。目前外泌體研究的整個流程中成本都很高。雙層囊膜結(jié)構(gòu)(茶托狀)是外泌體重要標志之一,但普通光學(xué)顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結(jié)構(gòu)。遼寧體液外泌體WB血清和血漿為...
在外泌體中引入藥物的方式包括體內(nèi)裝載和體外裝載兩種。體內(nèi)藥物裝載可以通過傳統(tǒng)方法(如病毒轉(zhuǎn)染、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染或電穿孔等)轉(zhuǎn)染來源細胞,編碼感興趣的RNA或蛋白質(zhì),也可以使藥物與來源細胞共混,使細胞分泌產(chǎn)生含有目標生物分子的外泌體。體外藥物裝載則首先需要得到純化的外泌體,然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內(nèi)可裝載的藥物包括小分子化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)和多肽、核酸藥物、天然產(chǎn)物等。外泌體的異質(zhì)性決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)要根據(jù)所傳遞治理物質(zhì)的類型、目標組織的特點等進行針對性的調(diào)整。胸水外泌體lncRNA芯片外泌體的提取方法:免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異...
外泌體(Exosome)開始被認為是毫無作用的“垃圾”,但隨著研究的不斷深入,人們發(fā)現(xiàn)事實并非如此,外泌體(Exosome)是具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞的微囊泡。外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤細胞的免疫耐受。瘤細胞來源的外泌體(Exosome)本身可作為瘤抗原,因此,瘤來源的外泌體(Exosome)既是一種抗原呈遞系統(tǒng),同時也是瘤排斥抗原的來源。瘤來源的外泌體(Exosome)能夠通過傳遞某些抑制信號,在機體免疫應(yīng)答過程中起負性調(diào)節(jié)作用,誘導(dǎo)瘤細胞形成免疫耐受,從而逃避免疫細胞的殺傷。干細胞外泌體具有抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能。湖南外泌體miRNA芯片Knepper等...
與干細胞不同的是:干細胞外泌體對受損的微環(huán)境不響應(yīng),但它可以通過改變細胞外基質(zhì),改變受體細胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組,來調(diào)節(jié)細胞凋亡,生長,增殖和分化途徑。因此,干細胞外泌體具有減少細胞凋亡、減輕炎癥反應(yīng)、促進血管生成、抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能,在調(diào)控組織再生方面存在良好的臨床應(yīng)用前景。干細胞外泌體的優(yōu)點,體積?。杭{米級粒子,大小約為細胞的1/200,因此能很好地被人體所利用。免疫反應(yīng)程度低:外泌體不是細胞,只作為載具,外膜的表層上呈現(xiàn)較少的抗原,免疫系統(tǒng)難識別,對人體影響小??纱┩秆X障壁:體積小加上脂質(zhì)外膜的特性,使其可以通過血腦障壁,抵達腦部組織。外泌體中含有豐富的蛋白質(zhì)和...
臨床上,干細胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍、再生健康皮膚。在護膚方面,主要是對外傷受損、衰老進行修復(fù),比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì),令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。干細胞外泌體可以再生皮膚和強化皮膚屏障,具有比較好的再生效果,且沒有其它副作用。干細胞外泌體或?qū)⒊蔀橹?、特異性皮炎等寬泛炎癥性皮膚疾病的一種有效且安全可靠的治理方法。如今,干細胞外泌體已在幾種不同類型的疾病中顯示出令人鼓舞的治理效果,包括腎損傷、心臟損傷、腦損傷和肝肺損傷等。主要機制可能是外泌體介導(dǎo)了MSC的旁分泌/自分泌機制。機體內(nèi)幾乎所有細胞均能分泌外泌體,而間充質(zhì)干細胞分泌外泌體的能力很強。黑龍江細胞上清外泌體微流控芯片是一種...
肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激種瘤血管的形成來促進種瘤的生長。據(jù)相關(guān)報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進種瘤血管的生成;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過開啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外,有研究發(fā)現(xiàn),外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖,遷移能力??茖W(xué)家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能。外泌體給后續(xù)實驗產(chǎn)生了許多障礙。山東植...
干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。因此,干細胞外泌體可用于中風的治理,改善神經(jīng)預(yù)后,增加血管與神經(jīng)生成。干細胞外泌體對多種類型的免疫細胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用,包括樹突狀細胞、T細胞、B細胞和巨噬細胞。靜脈輸注干細胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細胞的活化和浸潤,從而延長GVHD小鼠模型的存活時間,并減少多個組織的病理損傷。干細胞在人類健康領(lǐng)域所發(fā)揮出來的潛能,令人驚嘆。而干細胞外泌體,作為干細胞與其它組織細胞相互交流信息的載體,儼然會成為生物醫(yī)學(xué)研究的新風口之一。外泌體作為細胞間信號傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。北京動物組織外泌體分離外泌體開始被...
血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定, 將血清在4 °C短期保存期間即發(fā)生降解, 這可能是由外泌體的異質(zhì)性所導(dǎo)致的。–80 °C保存被公認是保存各種生物標本如尿、牛奶、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環(huán)境, 雖然這樣保存血漿可能產(chǎn)生含有大量“污染物”的外泌體。4 °C保存雖然容易導(dǎo)致外泌體中蛋白和核酸的損失, 但卻能夠避免凍融過程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80 °C環(huán)境下, 但在處理或運輸過程中有時很難維持這種低溫條件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體, 在冷凍過程中使用海藻糖作為保護劑, 海藻糖可以提供生物保護作用, 如穩(wěn)定蛋白質(zhì)、細胞膜和...
間充質(zhì)干細胞存在于骨髓、脂肪、臍血、牙髓、滑膜液等部位,是一種能夠自我更新的多功能干細胞。間充質(zhì)干細胞通過旁分泌的形式發(fā)揮其生理功能,而外泌體作為一種細胞間傳遞信息的介質(zhì),在間充質(zhì)干細胞的功能行使中發(fā)揮了重要作用。研究發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細胞來源的外泌體能夠修復(fù)組織損傷、抑制中流生長和調(diào)節(jié)免疫響應(yīng),具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿爾茲海默癥等疾病的潛力。另外,也有研究顯示間充質(zhì)干細胞來源的外泌體會促進某些中流生長。外泌體工程實驗表明外泌體中的DNA和miRNA參與調(diào)節(jié)適應(yīng)免疫和先天免疫反應(yīng)。吉林動物組織外泌體提取肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激種瘤血管的形成來促進種...
由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式,外泌體作為藥物運輸?shù)妮d體具有獨特的優(yōu)勢。例如外泌體的尺寸分布能夠增強滲透滯留效應(yīng),從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護內(nèi)容物不受各種生物酶的影響,維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中,其體積小,結(jié)構(gòu)、組成與細胞膜類似,導(dǎo)致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時深入組織內(nèi)部,有較好的生物相容性;當采用內(nèi)源外泌體時,能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外,某些細胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性,可以與特定的qi官或組織結(jié)合。外泌體可攜帶蛋白質(zhì)、脂類、核酸(miRNAs,ncRNAs)等多種生物功能大分子。北京植...
小鼠骨髓樹突狀細胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動特異性細胞毒性T淋巴細胞,根除或抑制小鼠中流的生長,這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,樹突狀細胞來源的外泌體也能夠通過激huo其他免疫細胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng),從而抑制中流。B細胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物,能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細胞,從而實現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能。細菌或病原體感ran的巨噬細胞外泌體能夠刺激巨噬細胞和中性粒細胞分泌炎性介質(zhì),在增強機體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記。浙江動物組織外泌體NTA外泌體的組成較為復(fù)雜,其內(nèi)含有多種生物大分子,如:核酸(雙鏈DN...
血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定, 將血清在4 °C短期保存期間即發(fā)生降解, 這可能是由外泌體的異質(zhì)性所導(dǎo)致的。–80 °C保存被公認是保存各種生物標本如尿、牛奶、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環(huán)境, 雖然這樣保存血漿可能產(chǎn)生含有大量“污染物”的外泌體。4 °C保存雖然容易導(dǎo)致外泌體中蛋白和核酸的損失, 但卻能夠避免凍融過程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80 °C環(huán)境下, 但在處理或運輸過程中有時很難維持這種低溫條件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體, 在冷凍過程中使用海藻糖作為保護劑, 海藻糖可以提供生物保護作用, 如穩(wěn)定蛋白質(zhì)、細胞膜和...
由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式,外泌體作為藥物運輸?shù)妮d體具有獨特的優(yōu)勢。例如外泌體的尺寸分布能夠增強滲透滯留效應(yīng),從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護內(nèi)容物不受各種生物酶的影響,維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中,其體積小,結(jié)構(gòu)、組成與細胞膜類似,導(dǎo)致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時深入組織內(nèi)部,有較好的生物相容性;當采用內(nèi)源外泌體時,能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外,某些細胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性,可以與特定的qi官或組織結(jié)合。從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。湖北水果...
外泌體作為細胞外囊泡的一個亞群, 直徑集中于30~150 nm。目前, 基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過濾透析法和非對稱場流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜, 對樣品進行選擇性分離以獲得外泌體, 一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好, 不jin能減輕力對外泌體的破壞, 而且可通過增大離心力和延長離心時間提高外泌體產(chǎn)物濃度。但離心力過大或離心時間過長均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂。此外, 超濾法可以和切向流過濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過濾色譜法等方法結(jié)合進一步提高分離效率。外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即:對各種外泌體的分類。廣東海洋生物組織外泌...
利用蛋白質(zhì)免疫印跡和酶聯(lián)免疫吸附分析技術(shù)可以對外泌體標志性蛋白質(zhì)進行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經(jīng)典表征手段之一,操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照。常用的外泌體標志性蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白質(zhì)CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2,尿液中)和凋亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白(Alix)等,內(nèi)參蛋白質(zhì)可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛-3-磷酸脫氫酶,陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB,線粒體標志蛋白)或鈣聯(lián)結(jié)蛋白Calnexin。在酶聯(lián)免疫吸附析法中,外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質(zhì),隨后與檢測抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、...
干細胞外泌體的六大內(nèi)在改善:細胞排毒:有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。細胞修復(fù):加速細胞修復(fù)、促進微循環(huán)修復(fù),修復(fù)痘坑痘印。增加彈性:重塑彈力纖維膠原纖維網(wǎng)狀纖維,恢復(fù)肌膚彈性,提亮皮膚。淡化皺紋、細紋:促進生成纖維細胞,增強皮膚產(chǎn)生蛋白能力,淡化皺紋、頸紋等。減緩衰老:調(diào)節(jié)機體組織間物質(zhì)及信息傳遞速度,加強修復(fù),減緩衰老。營養(yǎng)供給:針對肌膚脆弱敏感日夜修復(fù),面部、眼周、肌底多效保護,不斷給皮膚補充充足的營養(yǎng),喚醒肌膚細胞,有助于后續(xù)產(chǎn)品營養(yǎng)更好的吸收。關(guān)于外泌體相關(guān)的實驗技術(shù),關(guān)于需要改進的課題存在很多。湖南植物根組織外泌體wb檢測在免疫系統(tǒng)中,淋巴細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、肥...
外泌體在神經(jīng)系統(tǒng)中與神經(jīng)回路的控制相關(guān),同時各種神經(jīng)退行性疾病的致病蛋白還可以通過外泌體釋放到細胞外并傳遞到其他細胞,與病情發(fā)展密切相關(guān)。病細胞釋放的外泌體含有許多與血管新生和免疫逃逸相關(guān)的分子,構(gòu)建適合病細胞生長的微環(huán)境,促進病細胞的發(fā)展。另外,病細胞來源的外泌體上粘著分子的表達形式?jīng)Q定著癥狀向身體部位的轉(zhuǎn)移途徑。近,有報告指出脂肪細胞釋放的外泌體對肝臟的遺傳基因表達有控制作用。許多病毒利用外泌體的產(chǎn)生路徑傳播細胞,受病毒傳播的細菌和寄生蟲通過外泌體控制其他受細胞傳播的細菌、寄生蟲的活動。外泌體可幫助預(yù)防胎盤感ran。安徽植物葉組織外泌體NTA小鼠骨髓樹突狀細胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能...
為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息,可以通過電鏡、動態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現(xiàn)囊泡獨有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,導(dǎo)致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形,由于不會脫水變性,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實狀態(tài)。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。通常認為胞外囊泡為外...
雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢,但在臨床應(yīng)用上仍有一些限制:外泌體的提取方法金標準仍然是差速離心法,但這種方法費時費力且提取效率較低,難以進行臨床推廣和應(yīng)用;而商業(yè)化的試劑盒質(zhì)量參差不齊,往往導(dǎo)致提取物雜質(zhì)過多,且其售價較高。外泌體的定量是采用顆粒濃度定量,蛋白濃度定量,亦或是核酸濃度定量,目前仍存有爭議。由于傳統(tǒng)的內(nèi)參并不適用于外泌體,在實時熒光定量PCR檢測靶分子含量時內(nèi)參的選擇尚沒有統(tǒng)一的標準。外泌體分子標志物的研究還處于初級階段。目前外泌體研究的整個流程中成本都很高。來源于ai細胞的外泌體對自然殺傷細胞具有細胞毒性作用。上海海洋動物組織外泌體粒徑檢測外泌體(exosome)是多種活...
外泌體(Exosome),是細胞外囊泡(EV)的一種主要類型,是直徑為30至150nm的納米大小的膜結(jié)構(gòu),大多數(shù)細胞都會分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中,通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和代謝物等來發(fā)揮細胞間通訊功能,參與免疫應(yīng)答、代謝和心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進展等多種生理和病理過程。在內(nèi)體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體(MVE)的過程中,內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡(ILV),MVE與細胞膜融合釋放ILV到細胞外,即形成外泌體。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區(qū)分。福建動物組織外泌體鑒定外泌體可以調(diào)控星狀細胞(HSC)活化,并參與HSC細胞...
Exosome(外泌體)是由活細胞分泌小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);參與細胞之間的交流,物質(zhì)的運輸以及正常生理過程的維持,此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對分離的外泌體進行體外標記或示蹤,有助于對外泌體的功能進行進一步的研究。目前對于外泌體的標記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67,PKH-26具有更長的半衰期,標記在兔紅細胞上的PKH26半衰期長達100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長期的體內(nèi)細胞跟蹤研究。外泌體本身的惰性相當高,但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學(xué)功能。天津海洋動物...