干細(xì)胞外泌體可直接促進(jìn)血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。因此,干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理,改善神經(jīng)預(yù)后,增加血管與神經(jīng)生成。干細(xì)胞外泌體對(duì)多種類(lèi)型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用,包括樹(shù)突狀細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。靜脈輸注干細(xì)胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細(xì)胞的活化和浸潤(rùn),從而延長(zhǎng)GVHD小鼠模型的存活時(shí)間,并減少多個(gè)組織的病理?yè)p傷。干細(xì)胞在人類(lèi)健康領(lǐng)域所發(fā)揮出來(lái)的潛能,令人驚嘆。而干細(xì)胞外泌體,作為干細(xì)胞與其它組織細(xì)胞相互交流信息的載體,儼然會(huì)成為生物醫(yī)學(xué)研究的新風(fēng)口之一。外泌體作為細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標(biāo)記話題比較熱門(mén)。北京動(dòng)物組織外泌體分離
外泌體開(kāi)始被認(rèn)為是細(xì)胞排出代謝廢物的一種方式,能夠幫助缺乏高效降解能力或位于排泄系統(tǒng)的細(xì)胞排出不必要的蛋白質(zhì)和RNA。近年來(lái),隨著人們對(duì)外泌體的深入了解,外泌體的多種生物功能先后被發(fā)現(xiàn)。如今外泌體作為一種細(xì)胞間交流、傳遞大量的生物功能分子的重要方式日益受到重視。外泌體與受體細(xì)胞的信息交流可能通過(guò)以下4種途徑實(shí)現(xiàn):(1)外泌體表面膜蛋白質(zhì)被目的細(xì)胞表面的受體識(shí)別,從而激huo靶細(xì)胞;(2)外泌體在蛋白酶作用下產(chǎn)生的表面膜蛋白質(zhì)碎片可作為目的細(xì)胞表面受體的配體;(3)外泌體脂膜可以與目的細(xì)胞膜融合,將蛋白質(zhì)和RNA等內(nèi)容物釋放進(jìn)去,此類(lèi)膜融合可能改變靶細(xì)胞的一些膜特性,例如脂質(zhì)和膜蛋白質(zhì)的密度及種類(lèi);(4)目的細(xì)胞通過(guò)胞吞的形式攝入外泌體。上海海洋動(dòng)物組織外泌體透射電鏡檢測(cè)越來(lái)越多的文獻(xiàn)證實(shí)間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體具有與間充質(zhì)干細(xì)胞相似的作用(免疫調(diào)節(jié)、抗yan等)。
外泌體作為細(xì)胞外囊泡的一個(gè)亞群, 直徑集中于30~150 nm。目前, 基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過(guò)濾透析法和非對(duì)稱(chēng)場(chǎng)流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜, 對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離以獲得外泌體, 一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好, 不jin能減輕力對(duì)外泌體的破壞, 而且可通過(guò)增大離心力和延長(zhǎng)離心時(shí)間提高外泌體產(chǎn)物濃度。但離心力過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂。此外, 超濾法可以和切向流過(guò)濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過(guò)濾色譜法等方法結(jié)合進(jìn)一步提高分離效率。
外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,導(dǎo)致流體和固體的總含量不同;細(xì)胞的微環(huán)境和固有的生物學(xué)特性可能會(huì)影響外顯體的含量及其生物學(xué)標(biāo)記,如乳腺病細(xì)胞及其外泌體的蛋白質(zhì)組可以顯示來(lái)源細(xì)胞是上皮樣細(xì)胞還是間充質(zhì)樣細(xì)胞;由于細(xì)胞表面受體表達(dá)的不同,外泌體對(duì)受體細(xì)胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細(xì)胞存活,也可能誘導(dǎo)凋亡,或誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)等;異質(zhì)性也可以基于外泌體起源的組織,包括它們是否來(lái)自病細(xì)胞,瘤細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進(jìn)瘤細(xì)胞增殖。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制,通過(guò)促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制。
臨床上,干細(xì)胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍、再生健康皮膚。在護(hù)膚方面,主要是對(duì)外傷受損、衰老進(jìn)行修復(fù),比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì),令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。干細(xì)胞外泌體可以再生皮膚和強(qiáng)化皮膚屏障,具有比較好的再生效果,且沒(méi)有其它副作用。干細(xì)胞外泌體或?qū)⒊蔀橹巍⑻禺愋云ぱ椎葘挿貉装Y性皮膚疾病的一種有效且安全可靠的治理方法。如今,干細(xì)胞外泌體已在幾種不同類(lèi)型的疾病中顯示出令人鼓舞的治理效果,包括腎損傷、心臟損傷、腦損傷和肝肺損傷等。主要機(jī)制可能是外泌體介導(dǎo)了MSC的旁分泌/自分泌機(jī)制。干細(xì)胞外泌體對(duì)多種類(lèi)型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用。河北海洋生物組織外泌體NTA
關(guān)于外泌體相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù),關(guān)于需要改進(jìn)的課題存在很多。北京動(dòng)物組織外泌體分離
血清和血漿為常規(guī)檢測(cè)樣本,具有微創(chuàng)取樣的優(yōu)點(diǎn),是診斷疾病的理想樣本。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評(píng)價(jià)提供潛在標(biāo)志物。血液外泌體來(lái)源的疾病標(biāo)志物主要包括蛋白質(zhì)和miRNA兩類(lèi)。Melo等發(fā)現(xiàn)利用胰腺ai細(xì)胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠?qū)崿F(xiàn)胰腺ai早期診斷,利用該方法對(duì)血清中包含GPC1的外泌體進(jìn)行檢測(cè),能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區(qū)分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。北京動(dòng)物組織外泌體分離