外泌體載藥系統(tǒng)中外泌體提取的方法有很多種,有差速超高速離心法、超濾法、試劑盒提取方法、磁珠免疫法等,但單一外泌體分離方法都有其不可解決的弊端,而聯(lián)合不同的分離方法可得到更純凈、更豐富的外泌體。在裝載連翹酯苷A(FTA)的外泌體遞藥系統(tǒng)的功效中的研究中,采用了差速離心法和超濾法提取外泌體,先使用超濾管濃縮細胞上清液,富集外泌體,再使用超高速離心提取外泌體,縮減了離心次數(shù)和時間,提高了外泌體提取效率,且整個過程簡單易操作。同時采用低溫超聲孵育的方法制備FTA-Exos遞藥系統(tǒng)。外泌體可以通過細胞內(nèi)吞的方式將紫杉醇釋放到受體細胞中,提高藥物對供體中流細胞的毒性。貴州外泌體載藥原理
在醫(yī)學載藥領(lǐng)域,多肽、蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子zhiliao藥物的穩(wěn)定性差和吸收率低是普遍存在的問題,因此納米囊泡載藥體系應運而生。目前人工合成的納米囊泡中,針對高分子聚合物囊泡與低分子脂質(zhì)體的研究很常見。然而,這些人工納米載藥體進入人體后,易引發(fā)自身免疫反應,從而被人體免疫系統(tǒng)qing除; 同時其靶向性差,因而載藥效率不高且具有一定的毒副作用。近年來,外泌體作為天然生物囊泡的成員之一,因具有介導細胞間信號轉(zhuǎn)導、 抗原呈遞和免疫應答等功能,兼具人工合成囊泡的小粒徑、脂溶、穩(wěn)定、高滲透性和可改造性等特點,越來越多地被應用于藥物靶向遞送,有望成為藥物遞送系統(tǒng)發(fā)展過程中的一項重要突破。浙江動物血液樣本外泌體載藥參考價格裝載連翹苷(phil)的MHS來源外泌體具有完整茶托狀膜結(jié)構(gòu)的類圓形。
天然來源的外泌體含有眾多內(nèi)源性脂質(zhì)、蛋白及核酸類物質(zhì),其自身句有一定的成藥潛力,例如間充質(zhì)干細胞來源的外泌體在組織修復領(lǐng)域獲得了巨大成功。當外泌體用作遞送載體時,一般還需人為裝載藥物。理想的載yao方法不jin要實現(xiàn)較高的載藥效率,還應保留外泌體和藥物的功能和完整性。目前,在不破壞外泌體膜完整性的情況下將藥物有效載入到外泌體中仍是一個巨大挑戰(zhàn)?,F(xiàn)有的載yao方法可分為分泌前載藥法和分泌后載藥法。分泌前載藥法通常將親代細胞與藥物共孵育(一般需要加轉(zhuǎn)染試劑),使藥物進入細胞質(zhì),細胞質(zhì)中的藥物通過主動或被動的方式被分選到外泌體中,然后通過合適的提取方法即可獲得載藥的外泌體。分泌后載yao方法是目前常用的外泌體載藥策略,通常需要先分離提純外泌體,再將藥物載入其中。
傳統(tǒng)藥物往往存在水溶性差、易被人體快速qing除、生物相容性差、體內(nèi)分布不理想和向細胞滲透能力低等缺陷,這些問題在一定程度上限制了它們的臨床應用。藥物投遞系統(tǒng)就是要解決上述一個或多個問題以達到增加藥物的安全性和效果的目的。在外泌體載藥中,外泌體作為藥物載體進行藥物運輸有獨特的優(yōu)勢,主要體現(xiàn)在:(1)當使用自源外泌體時,外泌體引起的有害免疫反應極低;(2)外泌體在人血液中的穩(wěn)定性好;(3)向細胞轉(zhuǎn)運“貨物”的效率高;(4)外泌體運載藥物時句有一定的靶向性;(5)外泌體直徑在40~100nm之間,因此可以很好地利用增強滲透滯留(EPR)效應,有選擇性地滲入到中流或者炎癥組織部位。外泌體裝載PTX,磷脂雙分子層可直接靶向融合細胞,增加PTX的細胞內(nèi)化量,提高藥物zhiliao效果。
乳腺ai是發(fā)生在乳腺上皮組織的惡性中流,是女性致死率較高的ai種之一。紫杉醇(PTX)是一種高效、廣譜的抗ai藥物,其不jin能殺死中流細胞,還可以調(diào)節(jié)免疫功能。使用天然殺傷細胞來源外泌體(NK-Exos)運載紫杉醇形成載藥外泌體(PTX-NK-Exos)作用于乳腺ai細胞的抗中流效果。PTX在包埋過程中會部分嵌入到外泌體的脂質(zhì)雙層中,導致載藥后外泌體的粒徑增加??怪辛鲗嶒灡砻?,與游離PTX相比,相同劑量的PTX-NK-Exos載藥系統(tǒng)對人乳腺aiMCF-7細胞有較高的抑制率。外泌體可增強PTX的細胞內(nèi)化,提高zhiliao效果。包載厚樸酚的外泌體比游離厚樸酚有更高的zhiliao功效,可改善細胞攝取從而提高抗中流功效。浙江動物血液樣本外泌體載藥參考價格
外泌體載阿霉素可以部分限制阿霉素穿過心血管內(nèi)皮細胞,減少阿霉素在心臟部位的聚集,降低心臟毒性。貴州外泌體載藥原理
細胞外囊泡(EVs)因其生物相容性、大小適宜、體循環(huán)中保存時間長和低免疫原性等優(yōu)勢,在生物醫(yī)學應用中得到了普遍的應用。研究發(fā)現(xiàn)EV比普通的細胞膜囊泡更有優(yōu)勢。EV的優(yōu)勢在于,由于其表面的跨膜蛋白(如MHC復合物)數(shù)量減少,它們的免疫原性低于其宿主細胞膜,具體的多少取決于它們的細胞來源。凋亡小體、微泡和外泌體是根據(jù)EV的生物成因進行分類的。當胞內(nèi)體的膜向內(nèi)萌發(fā)形成外泌體時,就產(chǎn)生多泡體(MVB)。當MVBs與質(zhì)膜融合時,外泌體被釋放到細胞外空間。一旦從細胞表面釋放出來,外泌體能夠與細胞外基質(zhì)相互作用,或在微環(huán)境內(nèi)外引發(fā)反應。將RNA和蛋白質(zhì)引入外泌體,并將其定向到身體特定區(qū)域的方法仍在開發(fā)中。外泌體被認為是一種合適的藥物傳遞系統(tǒng),因為蛋白質(zhì)和遺傳物質(zhì)都可以裝載到其中。 貴州外泌體載藥原理
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