浙江動物組織外泌體wb檢測

來源: 發(fā)布時間:2023-02-04

    外泌體在心肌梗死后的診治中的成功應用取決于對其在心臟信號傳導和調節(jié)中的作用的更好理解。在這里,我們報道了心肌梗死(MI)后循環(huán)的外泌體攜帶LncRNATUG1,它通過抑制HIF-1α/VEGF-α軸來下調血管生成,并且這種作用可以通過遠程缺血調節(jié)(RIC)來抵消。通過左冠狀動脈結扎(MI模型)和再灌注(缺血/再灌注I/R模型)誘發(fā)MI的大鼠被隨機分為RIC、MI(I/R)或假手術(SO)對照。還利用了一項隊列研究和一項針對MI患者的隨機對照試驗的數據,前者涉及未接受經皮冠狀動脈介入診治(PCI)的患者,后者涉及接受PCI的患者。外泌體濃度在大鼠(MI和I/R模型)以及人類(有和沒有PCI)的干預組(RIC與對照組)之間沒有差異。然而,MI和I/R外泌體減弱了HIF-1α、VEGF-α和內皮功能。LncRNATUG1在MI和I/R外泌體中增加,但在SO和RIC外泌體中減少。HIF-1α表達隨MI和I/R外泌體而下調,但隨RIC外泌體而增加。外泌體抑制通過RIC外泌體抑制HIF-1α上調。VEGF-α被鑒定為HIF-1α調節(jié)的靶基因。HIF-1α的敲低降低了VEGF-α、內皮細胞管形成。HIF-1α的過度表達產生相反的效果。用外泌體抑制劑GW4869和HIF-1α抑制劑si-HIF-1α轉染和共轉染293T細胞證實了外泌體-LncRNATUG1/HIF-1α/VEGF-α通路。 外泌體與其他方法協同更有助于提高液體活檢的檢測成功率和預測的準確性。浙江動物組織外泌體wb檢測

基于其表面配體呈遞富集,外泌體也可能使受體介導的組織靶向的發(fā)展成為可能。工程化外泌體上的配體富集也可用于誘導或抑制受體細胞中的信號事件或將外泌體靶向特定的細胞類型。例如,整合素特異性RGD(R,精氨酸;G,甘氨酸;D,天冬氨酸)修飾的肽(修飾的tumour歸巢肽序列,作為整合素的識別序列)對未成熟樹突狀細胞來源的外泌體負載多柔比星,在乳腺荷瘤小鼠中顯示診治反應。其他化療化合物也被裝載到外泌體中進行CA診治,并在小鼠中進行了測試,并報道了抗tumour療效和降低毒性。例如,巨噬細胞來源的外泌體負載紫杉醇誘導小鼠肺tumour反應[3]。江蘇動物組織外泌體TEM外泌體circ_0006602作為肝ai的早期診斷和篩查標志物,診斷的靈敏度和特異度均高于常見的血清中流標志物。

    外泌體在生物相容性、藥物裝載能力、體內靶向性、血流穩(wěn)定性和可工程化等方面具有獨特的優(yōu)勢,成為遞送基因編輯核糖核旦白復合物的理想遞送載體?,F有將Cas9RNP包載至外泌體中的方法主要依賴細胞內源性技術,需要事先在細胞中轉染CRISPR-Cas9質粒,轉錄翻譯后在特定時間收集該細胞的外泌體,步驟較多,復雜費時且可控性差。本研究采用優(yōu)化的電穿孔方法避免了質粒轉染的復雜過程,在細胞外直接將Cas9RNP裝載至肝成纖維細胞來源的外泌體中,制備獲得的外泌體基因編輯納米顆粒(ExosomeRNP)可成功將RNP遞送至靶細胞內產生高效的基因編輯效應。值得注意的是,在動物體內ExosomeRNP可通過肝臟蓄積和同源靶向作用,將RNP精細遞送至肝臟組織中,避免非靶organ的基因編輯,提高體內基因組編輯的安全性和精細性。

    細胞外泌體生物發(fā)生和診療遞送潛力——所有真核細胞都會釋放大量的細胞外泌體:膜結合的納米顆粒,大致呈球形,直徑范圍在50至500nm左右。細胞外泌體多種多樣,不僅按大小分類,還按起源細胞、釋放模式、分子組成和功能分類。細胞外泌體被認為在以下方面發(fā)揮作用通過在細胞之間傳遞核酸、蛋白質、小分子和脂質來進行細胞間通訊,但也可以設想其他相互作用模式。值得注意的是,已觀察到這些分子在細胞外泌體中運輸后在受體細胞中保留其功能,這表明含有活性蛋白質、RNA、蛋白質或DNA的細胞外泌體可以改變遠離細胞外泌體生產細胞的細胞生物學。這些特性賦予細胞外泌體無yu倫比的安全性和生物相容性潛力。迄今為止,一些診療性生物分子已被裝載到細胞外泌體中并遞送至靶細胞,并在體外和體內模型進行了實驗驗證。 可采取通過透射電鏡確定外泌體大小。

    外泌體的產生過程涉及質膜的雙重內陷和含有腔內囊泡intraluminalvesicles(ILVs)的細胞內多泡體multivesicularbodies(MVBs)的形成。ILV醉終通過質膜的損傷和MVB胞吐作用以直徑范圍約為40-160nm的外泌體形式分泌1).質膜的di一次內陷形成杯狀結構,包括細胞表面蛋白和與細胞外環(huán)境相關的可溶性蛋白2).這導致了早期分選內體early-sortingendosome(ESE)的新生形成,在某些情況下可能直接與預先存在的ESE合并[1]。ESEs可以成熟為晚期分選內體late-sortingendosomes(LSEs),醉終生成MVBs,也稱為多囊泡內體。MVBs由胞內體界膜向內內陷(即質膜雙重內陷)形成。這一過程導致MVB含有幾種ILV(未來的外泌體)。MVB既可以與溶酶體或自噬體融合降解,也可以與質膜融合釋放所含的ILV作為外泌體。根據外泌體數據庫的醉新更新列表[2],包含9769個蛋白質、3408個mRNA、2838個miRNA和1116個脂質。外泌體的這些內容物可作為CA進展的預后標志物和(或)分級依據。同時調節(jié)tumour生長、轉移、血管生成,介導腫瘤細胞耐藥。 可以通過檢測CD9、CD63和CD81等外泌體標志物來判斷外泌體是否存在。遼寧植物根組織外泌體分離

外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,快速直達基底層起效。浙江動物組織外泌體wb檢測

    神經退行性疾病是醉常見的殘疾原因之一,占全球疾病負擔的。其中,阿爾茨海默病、帕金森病和亨廷頓病會導致認知能力下降,是個人和社會層面上醉嚴重的癥狀。癡呆癥發(fā)病和進展的分子機制仍知之甚少,包括可能影響分化神經元、神經膠質細胞和神經干細胞生態(tài)位的分泌因子。在過去十年中,外泌體作為相鄰細胞和遠處細胞之間交換信息的新型載體受到了普遍關注。這些囊泡可以被包括神經元、神經干細胞、星形膠質細胞和小膠質細胞在內的不同腦細胞產生和內化,從而影響生理和病理條件下的神經可塑性和認知功能。在這里,我們回顧了外泌體作為生物活性分子載體的作用的數據,這些生物活性分子可能參與神經退行性疾病的發(fā)病機制,并且在生物體液中可檢測為癡呆癥的生物標志物。 浙江動物組織外泌體wb檢測

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