研究認(rèn)為，在外泌體中可以發(fā)現(xiàn)少量的DNA，這種DNA可以對(duì)檢測(cè)血清外泌體中CA相關(guān)突變有價(jià)值，外泌體中特定的miRNA或miRNA組可能在CA的檢測(cè)中提供診斷或預(yù)后潛力。外泌體中的致ai和抑aimiRNA可能具有較高的診斷價(jià)值，因?yàn)樗鼈冊(cè)赼i細(xì)胞和正常細(xì)胞之間的差異表達(dá)，可能增強(qiáng)它們?cè)谠缙谠\斷中的有用性，致aiKras被報(bào)道在外泌體中差異富集miR-100，循環(huán)中外泌體miR-21升高與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和胰腺ai、結(jié)直腸ai、結(jié)腸ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai和食管ai相關(guān)，尿源性外泌體miR-21升高與膀胱ai和前列腺ai相關(guān)。其他與多種CA類型相關(guān)的外泌體致aimicroRNA包括miR-155、miR-17-92簇和miR-1246。在腦、胰腺、結(jié)直腸、結(jié)腸、肝臟、乳腺、前列腺和食管ai；口腔鱗狀細(xì)胞ai；以及淋巴瘤和白血病中觀察到上調(diào)。tumour抑制miRNA，包括miR-146a和miR-34a，與肝臟、乳腺、結(jié)腸、胰腺和血液惡性tumour相關(guān)。 外泌體被認(rèn)為是一種合適的藥物傳遞系統(tǒng)，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)和遺傳物質(zhì)都可以裝載到其中。上海腹膜透析液外泌體染色
液體活檢是一種非侵入性的血液檢測(cè)突破性技術(shù)，能早期快速地檢測(cè)中流及其病灶或者轉(zhuǎn)移過程中釋放到血液中的循環(huán)中流細(xì)胞（circulatingtumorcell，CTC）、循環(huán)中流DNA（circulatingtumorDNA，ctDNA）和中流外泌體等中流組分。中流外泌體作為液體活檢的一個(gè)重要組成，基于其內(nèi)容物成分多樣和穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì)，正成為中流標(biāo)志物相關(guān)研究的熱點(diǎn)。中流來源納米大小的外泌體具有易通過血腦屏障、天然的歸巢特性、雙分子層脂質(zhì)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和高效的生物相容性等特征。因此，中流外泌體正成為中流靶向zhiliao理想的載體，尤其是工程化外泌體更表現(xiàn)出很好的中流靶向干預(yù)和增強(qiáng)藥物zhiliao的效果。遼寧植物外泌體示蹤外泌體被工程化改造后，具有靶向特定細(xì)胞類型或組織的功能。
除了siRNA和miRNA，mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運(yùn)輸。研究表明，在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來的外泌體含有中流細(xì)胞特異性的mRNA，而被愛潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細(xì)胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而，外泌體的這種運(yùn)載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期，Saydam等率先報(bào)道了利用多泡體(含外泌體)負(fù)載mRNA/蛋白進(jìn)行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對(duì)HEK-293細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRT EGFP，其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPＲT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;EGFP:增強(qiáng)型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經(jīng)鞘瘤處，并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC)，神經(jīng)鞘瘤的增長被明顯抑制。
缺氧已被證明會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞外囊泡(EV)的釋放，并對(duì)EV的組成和功能產(chǎn)生影響。缺氧EV可增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的存活和血管生成能力，在免疫細(xì)胞中具有kang炎作用，并通過改變浸潤性單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的免疫代謝特征來促進(jìn)tumour進(jìn)展和侵襲。miR-21-5p是EV中醉常報(bào)道的缺氧誘導(dǎo)的microRNA(miRNA)。載有miR-21-5p的EV與轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的血管生成，并已被證明可以增加ai細(xì)胞的遷移、擴(kuò)張和侵襲。在幾項(xiàng)研究中，缺氧顯示以缺氧誘導(dǎo)因子-α(HIFα)依賴性方式增加EV中miR-21-5p的水平，并且這些EV與受體的kang炎和抗細(xì)胞凋亡作用相關(guān)細(xì)胞。EVs調(diào)節(jié)受體細(xì)胞功能的能力使EVs成為診治性診治的有吸引力的候選者，并且從生物流體中檢測(cè)背景特定EV貨物改變的可能性支持它們作為生物標(biāo)志物的潛力。 對(duì)分離提取的外泌體進(jìn)行鑒定的經(jīng)典方案有：NTA分析、電鏡分析、蛋白標(biāo)志物鑒定等。
在真核生物中，泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(UPS)和自噬-溶酶體途徑(ALP)對(duì)于維持細(xì)胞蛋白穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要并與CA進(jìn)展相關(guān)。我們之前的研究表明，磷酸酶和張力蛋白同系物(PTEN)是人類CA中醉常見的突變基因之一，它限制了蛋白酶體的豐度，并決定了膽管ai(CCA)中蛋白酶體抑制劑的化學(xué)敏感性。然而，PTEN是否調(diào)節(jié)溶酶體通路仍不清楚。我們?cè)贑CA細(xì)胞系中使用功能喪失和功能獲得策略測(cè)試了PTEN對(duì)溶酶體生物發(fā)生和外泌體分泌的影響。使用體外去磷酸化測(cè)定，我們探索了PTEN與溶酶體生物發(fā)生的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子轉(zhuǎn)錄因子EB(TFEB)之間的調(diào)節(jié)機(jī)制。使用遷移試驗(yàn)、侵襲試驗(yàn)和經(jīng)脾肝轉(zhuǎn)移小鼠模型，我們?cè)u(píng)估了PTEN缺陷、TFEB介導(dǎo)的溶酶體生物發(fā)生和外泌體分泌對(duì)tumour轉(zhuǎn)移的作用。此外，我們通過回顧性分析研究了PTEN表達(dá)和外泌體分泌的臨床意義。PTEN通過其蛋白磷酸酶活性使TFEB在Ser211位點(diǎn)去磷酸化，從而促進(jìn)溶酶體生物發(fā)生和酸化。值得注意的是，PTEN缺乏通過減少溶酶體介導(dǎo)的多泡體(MVB)降解來增加外泌體分泌，這進(jìn)一步促進(jìn)了CCA的增殖和侵襲。TFEB激動(dòng)劑姜黃素類似物C1抑制了小鼠模型中PTEN缺陷引起的轉(zhuǎn)移表型，我們強(qiáng)調(diào)了臨床隊(duì)列中PTEN缺陷與外泌體分泌之間的相關(guān)性。在CCA中。 在細(xì)胞通訊過程中，細(xì)胞分泌的大小在40～100nm之間的外泌體具有負(fù)載“貨物”并將其傳遞給靶細(xì)胞的能力。河南腹膜透析液外泌體small RNA測(cè)序
人體內(nèi)多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，包括干細(xì)胞、免疫細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、及平滑肌細(xì)胞等。上海腹膜透析液外泌體染色
膀胱ai(bladdercancer,BC)是醉常見的CA之一，具有高發(fā)病率與病死率。積累的結(jié)構(gòu)與基因變異，細(xì)胞代謝和信號(hào)通路的改變都被認(rèn)為是BC發(fā)生的原因。同時(shí)，tumour逃逸免疫監(jiān)控及抗腫瘤免疫功能的耗竭同樣發(fā)揮了重要的作用。然而盡管經(jīng)過多年研究，BC的發(fā)生機(jī)制仍未被完全闡明。自然殺傷（NK）細(xì)胞(CD56+CD3?)是一種大顆粒淋巴細(xì)胞，不依賴預(yù)先免疫，可直接殺死異變的細(xì)胞和病毒感ran的細(xì)胞，并通過分泌促炎因子和趨化因子促進(jìn)獲得性免疫，在抗腫瘤免疫監(jiān)視中發(fā)揮重要作用。臨床研究表明，BC患者的NK細(xì)胞數(shù)量減少且活性受損，這表明BC細(xì)胞可通過未知機(jī)制誘導(dǎo)NK細(xì)胞功能障礙，從而逃避抗腫瘤免疫監(jiān)視。而外泌體(exosomes)和外泌體貨物如DNA、RNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，在細(xì)胞間通訊和調(diào)節(jié)靶細(xì)胞活性中的重要作用已被研究者所熟知。腫瘤細(xì)胞可分泌10倍于健康細(xì)胞的外泌體。這些tumour來源的外泌體(TEXs)在tumour的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、血管生成和耐藥等方面發(fā)揮著重要作用。在tumour微環(huán)境中，TEXs和NK細(xì)胞之間存在重要的相互作用，但BC衍生的外泌體對(duì)NK細(xì)胞的影響尚未得到充分研究。 上海腹膜透析液外泌體染色
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