細胞上清外泌體測序

來源: 發(fā)布時間:2023-01-30

    研究認為,在外泌體中可以發(fā)現(xiàn)少量的DNA,這種DNA可以對檢測血清外泌體中CA相關(guān)突變有價值,外泌體中特定的miRNA或miRNA組可能在CA的檢測中提供診斷或預后潛力。外泌體中的致ai和抑aimiRNA可能具有較高的診斷價值,因為它們在ai細胞和正常細胞之間的差異表達,可能增強它們在早期診斷中的有用性,致aiKras被報道在外泌體中差異富集miR-100,循環(huán)中外泌體miR-21升高與膠質(zhì)母細胞瘤和胰腺ai、結(jié)直腸ai、結(jié)腸ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai和食管ai相關(guān),尿源性外泌體miR-21升高與膀胱ai和前列腺ai相關(guān)。其他與多種CA類型相關(guān)的外泌體致aimicroRNA包括miR-155、miR-17-92簇和miR-1246。在腦、胰腺、結(jié)直腸、結(jié)腸、肝臟、乳腺、前列腺和食管ai;口腔鱗狀細胞ai;以及淋巴瘤和白血病中觀察到上調(diào)。tumour抑制miRNA,包括miR-146a和miR-34a,與肝臟、乳腺、結(jié)腸、胰腺和血液惡性tumour相關(guān)。 干細胞外泌體可用于中風的治理,改善神經(jīng)預后,增加血管與神經(jīng)生成。細胞上清外泌體測序

研究者利用電穿孔法對外泌體進行DOX的負載,進行體內(nèi)抗中流效果的研究。實驗結(jié)果顯示,負載DOX的iRGD肽靶向性外泌體對中流的抑制效果遠優(yōu)于單純的DOX。直接靜脈注射DOX,其不僅水溶性低,而且容易使DOX與血液中的蛋白結(jié)合,從而被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識別捕獲,起不到理想的抗中流效果。而用iRGD肽靶向性的外泌體保護DOX,可以提高DOX水溶性,避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉,提高靶向性,從而降低由于用藥過量和非靶向性引起的毒性,起到更好的抗中流效果。福建血漿外泌體染色PKH67/PKH26天然或者工程化修飾的外泌體或可用于zhiliao難治性中流。

    在這項研究中,研究人員檢測了內(nèi)皮細胞衍生的EV對缺氧-葡萄糖剝奪(OGD,模擬人類中風的神經(jīng)元缺血再灌注損傷)后的神經(jīng)元的影響。在人臍帶內(nèi)皮細胞(HUVEC)-神經(jīng)元共培養(yǎng)測定中,研究發(fā)現(xiàn)HUVEC減少了OGD下神經(jīng)元的凋亡,并且這種作用被外泌體釋放抑制劑GW4869削弱。純化的EV可被神經(jīng)元內(nèi)化并減輕OGD作用下的神經(jīng)元凋亡。miRNA-1290在HUVEC衍生的EV中高度富集,并在OGD下負責EV介導的神經(jīng)元保護。OGD可以增強體外培養(yǎng)的神經(jīng)元對EV的攝入。對EV攝入受體的表達檢測結(jié)果顯示,在OGD處理的神經(jīng)元和中腦動脈阻塞(MCAO)的小鼠中,caveolin-1(Cav-1)表達上調(diào)。抑制神經(jīng)元中的Cav-1表達能夠減少EV的攝入,并抑制了OGD下EV介導的神經(jīng)元保護。HUVEC衍生的EV可減輕MCAO誘導的體內(nèi)神經(jīng)元凋亡。這些發(fā)現(xiàn)表明,缺血可能會上調(diào)神經(jīng)元中Cav-1的表達,從而增加神經(jīng)元對EVmiRNA-1290的攝入,醉終通過減緩凋亡來保護神經(jīng)元。

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng),參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控,在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥,如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生,很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括:多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中,多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法,該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來,然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體,還包括許多其他種類細胞釋放的外泌體,如樹突狀細胞、淋巴細胞等,且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中,這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。支氣管肺泡灌洗液中外泌體冷凍保存與新鮮樣本相比, 體積變大且有一半以上種類蛋白質(zhì)的豐度發(fā)生變化。

目前市面上開發(fā)的外泌體提取試劑盒,是根據(jù)外泌體表面由類似于細胞膜的脂質(zhì)雙分子層具有一定疏水性這一特性,用試劑捆綁水分子,從而可通過常規(guī)離心收集沉淀獲取外泌體。這種快速提取外泌體的方法雖簡便快捷、樣本需求少、對設備要求低,但與差速離心方法類似,其分離得到的沉淀包含其他細胞分泌的囊泡,且血清中含有大量血清蛋白分子,成分復雜,很可能摻雜一些未知的疏水大分子物質(zhì)。Sabapatha等曾根據(jù)來源于胎盤的外泌體表面特異表達PLAP這一特性,使用耦合到磁珠的抗PLAP抗體,采用磁珠分選方法分離血漿中胎盤來源外泌體。此法可以提取的胎盤外泌體量少,不適用于大規(guī)模提取制備,且免疫磁珠價格昂貴,不利于提取技術(shù)的普及。中流來源的外泌體可誘導中流細胞增殖、促進瘤變。上海外泌體circRNA測序

外泌體是細胞通訊重要的調(diào)節(jié)者,疾病發(fā)生時,外泌體的組成會發(fā)生變化,在診斷和zhiliao方面均有重要作用。細胞上清外泌體測序

由于卵巢中流細胞質(zhì)膜上的磷脂酰絲氨酸(phosphati[1]dylserine,PS)可以外泌體形式分泌入血,惡性卵巢ai患者血漿外泌體中的PS水平明顯高于卵巢良xing病變患者和健康對照者,因此外泌體中的PS可用于協(xié)助早期卵巢惡性中流的篩查和診斷。外泌體可穿透血-腦脊液屏障的特點也為腦中流患者提供了早期診斷的重要工具。血漿微囊泡EGFRvIII mRNA已被證明可作為膠質(zhì)母細胞瘤患者診斷的支持證據(jù)。2020年,David Lyden和William R. Jarnagin教授團隊合作,通過探究來自不同ai種組織、血漿和其他體液的426個人類樣品中細胞外囊泡和顆粒(extracellular vesicle and particle,EVP)的蛋白質(zhì)組學特征,鑒定出一批中流特異性血漿EVP蛋白(特異度和靈敏度分別為95%和90%),并可區(qū)分患者的中流類型,使基于外泌體的中流診斷和鑒別診斷向前邁進了一步。細胞上清外泌體測序

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