在血液和大多數(shù)體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質(zhì)瘤診斷和預后的指標,特別對預測中流復發(fā)或轉(zhuǎn)移具有價值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。外泌形態(tài)呈現(xiàn)多樣性,有研究將其分為9個類別。上海動物組織外泌體分離
外泌體(exosomes)是一類由細胞分泌到胞外的囊泡。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比,外泌體在產(chǎn)生方式、尺寸、密度和內(nèi)容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式,外泌體主要通過胞吐過程釋放至細胞外:首先細胞膜向內(nèi)凹陷形成早期核內(nèi)體(earlyendosomes),早期核內(nèi)體進一步內(nèi)陷形成多泡體(multivesicularbodies,MVBs),其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合,進而降解;另一部分與細胞膜融合,將其內(nèi)部所包含的囊泡釋放至胞外,即為外泌體。外泌體具有獨特的物理化學性質(zhì),其直徑為30~200nm,密度為1.13~1.19g/mL,組成包括細胞來源相關的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA、DNA等物質(zhì),在其表面連接有大量的糖鏈,如甘露糖、聚乳糖胺和α2,6-唾液酸等。安徽動物組織外泌體wb檢測來源于ai細胞的外泌體對自然殺傷細胞具有細胞毒性作用。
除運輸藥物進行疾病zhiliao之外,外泌體還能進行免疫zhiliao,外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao。進行免疫調(diào)節(jié)時,外泌體通常運載TGF-β1、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質(zhì)。在這些研究中,分泌外泌體的母代細胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹突細胞或者中流細胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤細胞作為母代細胞,通過熱處理的方式使淋巴瘤細胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子,如主要組織相容性復合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等,與未熱處理的鼠B淋巴瘤細胞分泌的外泌體相比,熱處理后分泌的外泌體可以增強對T細胞的激huo能力,從而增強這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力。
卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達譜有明顯差異,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標志物。多項研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數(shù)ai癥的多種病理條件下過度表達。尿液外泌體來源于泌尿系統(tǒng)相關的各種細胞,包括腎小球足細胞、腎小管細胞和膀胱等,因此尿液外泌體數(shù)目、形態(tài)和生化性質(zhì)的改變往往反映泌尿系統(tǒng)疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進行轉(zhuǎn)錄組分析,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測ai癥患者狀態(tài)的潛力。NTA技術已被外泌體研究領域認可為外泌體表征手段之一。
外泌體的異質(zhì)性包括:大小異質(zhì)性、含量異質(zhì)性、功能異質(zhì)性和細胞來源異質(zhì)性。尺寸不等可能是由于MVB界膜內(nèi)陷不均勻,導致液體和固體的總含量不同,外泌體可能包含由不同大小范圍定義的亞群。大小異質(zhì)性也會導致不同量的外泌體含量;微環(huán)境和細胞固有的生物學可能影響外泌體的含量及其生物學標志物。外泌體可含有膜蛋白、胞質(zhì)和核dan白、細胞外基質(zhì)蛋白、代謝產(chǎn)物和核酸,即mRNA、非編碼RNA種類和DNA;外泌體對受體細胞的影響可以不同,因為它們的細胞表面受體表達各不相同,這樣的功能性有不同的表現(xiàn),1.誘導細胞存活,2.誘導細胞凋亡,3.誘導免疫調(diào)節(jié)等;異質(zhì)性也可以基于外泌體的起源organ和組織,包括它們是否來自ai細胞,使它們具有獨特的特性,如對某些organ的趨向性和特定細胞類型的攝取。所有這些特征的組合將有可能引起更高階的復雜性和外泌體的異質(zhì)性。 前列腺ai患者的血漿和尿液中的外泌體含有更多的前列腺特異抗原(PSA)。北京水果外泌體NTA
模仿外泌體組成及結(jié)構(gòu)(尤其是其表面組成的模仿)是進行新型脂質(zhì)體和聚合物基藥物載體構(gòu)建的一個方向。上海動物組織外泌體分離
外泌體作為藥物或作為藥物遞送載體的診治潛力正在被積極的探索。與脂質(zhì)體相比,注射的外泌體可有效進入其他細胞,并可在小鼠外源性給藥后以醉小的免疫清chu遞送功能性分子。此外,外泌體的診治應用前景廣闊,因為它們已被證實耐受性良好。來源于間充質(zhì)細胞及上皮細胞的外泌體在小鼠中重復注射時不會誘導毒性。MSC來源的外泌體已被提出是診治本身,使用MSC來源的外泌體診治移植物抗宿主病患者表明,重復注射耐受性良好,沒有實質(zhì)性副作用,未引起患者反應。上海動物組織外泌體分離
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