浙江單熒光自噬慢病毒

來源: 發(fā)布時間:2022-11-14

當自噬體與溶酶體融合后,形成自噬溶酶體。自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡,作用底物是內(nèi)源性的,即細胞內(nèi)的蛻變、破損的某些細胞器或局部細胞質(zhì)。這種溶酶體普遍存在于正常的細胞內(nèi),在細胞內(nèi)起“清道夫”作用,作為細胞內(nèi)細胞器和其它結(jié)構(gòu)自然減員和更新的正常途徑。在組織細胞受到各種理化因素傷害時,自噬性溶酶體大量增加的,因此對細胞的損傷起一種保護作用。自噬性溶酶體的作用底物是內(nèi)源性的,即來自細胞內(nèi)的衰老和崩解的細胞器或局部細胞質(zhì)等。它們由單層膜包圍,內(nèi)部常含有尚未分解的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和高爾基復(fù)合體或脂類、糖原等。正常細胞中的自噬性溶酶體在消化、分解、自然更替一些細胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)上起著重要作用。當細胞受到藥物作用、射線照射和機械損傷時,其數(shù)量明顯地增多。在病變的細胞中也常可見到自噬性溶酶體。間歇性活化自噬對于藥物副作用突出的患者更為有利。浙江單熒光自噬慢病毒

自噬(Autophagy)是一種在進化上高度保守的通過溶酶體吞噬并降解部分自身組分的細胞內(nèi)分解代謝途徑。自噬與多種生理功能有關(guān),在饑餓等不利的環(huán)境條件下, 細胞通過自噬降解多余或異常的細胞內(nèi)組分,為細胞的生存提供能量及原材料,促進生物體的生長發(fā)育、細胞分化及對環(huán)境變化產(chǎn)生應(yīng)答。自噬異常與多種病理過程如神經(jīng)退行性疾病、代謝疾病等都有密切關(guān)系。由于細胞自噬在生理和病理過程中都有重要作用,自噬已經(jīng)成為細胞生物學(xué)領(lǐng)域的一個新的研究熱點。北京細胞自噬通路自噬可清理受損線粒體,從而避免受損線粒體產(chǎn)生大量活性氧對DNA等遺傳物質(zhì)造成損傷進而致病。

在活性氧類(reactiveoxygenspecies,ROS)、營養(yǎng)缺乏、細胞衰老、缺氧和缺血等刺激下,細胞內(nèi)線粒體受損,線粒體形態(tài)和功能發(fā)生改變,因此被自噬蛋白特異性包裹并被溶酶體降解。在心臟缺血缺氧性疾病、高xue壓及大血管疾病中,線粒體自噬可以修復(fù)因缺氧、缺血及損傷等所致的線粒體結(jié)構(gòu)和功能的改變。心肌細胞的正常工作需要線粒體的氧化功能,適當?shù)木€粒體自噬對心肌細胞具有保護作用,然而過度的線粒體自噬則會導(dǎo)致細胞內(nèi)線粒體過度清chu,影響線粒體的氧化功能,從而導(dǎo)致心肌細胞無法正常工作,進而加重心肌細胞損害。

根據(jù)細胞物質(zhì)運到溶酶體內(nèi)的途徑不同,自噬分為以下幾種。①大自噬:由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體或細胞質(zhì)膜等來源的膜包繞待降解物形成自噬體,然后與溶酶體融合并降解其內(nèi)容物;②小自噬:溶酶體的膜直接包裹長壽命蛋白等,并在溶酶體內(nèi)降解;③分子伴侶介導(dǎo)的自噬(chaperonemediatedautophagy,CMA):胞質(zhì)內(nèi)蛋白結(jié)合到分子伴侶后被轉(zhuǎn)運到溶酶體腔中,然后被溶酶體酶消化。CMA的底物是可溶的蛋白質(zhì)分子,在清理蛋白質(zhì)時有選擇性,而前兩者無明顯的選擇性。中間雙重細胞膜囊泡是一種自噬體,可與溶酶體相結(jié)合,形成自噬體。白藜蘆醇通過誘導(dǎo)自噬途徑抑制PrP(106~126)介導(dǎo)的神經(jīng)SH-SY5Y細胞凋亡和線粒體功能障礙。

細胞經(jīng)誘導(dǎo)或阻止后,需對自噬過程進行觀察和檢測,常用的策略和技術(shù)有:1、利用WesternBlot檢測LC3-II/I比值的變化以評價自噬形成自噬形成時,胞漿型LC3(即LC3-I)會酶解掉一小段多肽,轉(zhuǎn)變?yōu)椋ㄗ允审w)膜型(即LC3-II),因此,LC3-II/I比值的大小可估計自噬水平的高低。(注意:LC3抗體對LC3-II有更高的親和力,會造成假陽性。方法2和3需結(jié)合使用,同時需考慮溶酶體活性的影響。)2、檢測長壽蛋白的批量降解:非特異。3、MDC(Monodansylcadaverine,單丹磺酰尸胺)染色:包括自噬體,所有酸性液泡都被染色,故屬于非特異性的。4、CellTrackerTMGreen染色:主要用于雙染色,但其能染所有的液泡,故也是屬于非特異性的。自噬功能不全的細胞易于壞死,但是壞死組織產(chǎn)生的細胞因子(包括部分生長因子)反而會促進病變的生長。遼寧自噬RFP-GFP-LC3B

自噬可通過調(diào)控免疫來發(fā)揮抗瘤作用。浙江單熒光自噬慢病毒

自噬是一種通過溶酶體在細胞內(nèi)部降解功能失調(diào)的細胞組分的過程。自噬可以降解和消化受損、變性的細胞器、蛋白質(zhì)與核酸等生物大分子。為細胞的再生和修復(fù)提供原料,實現(xiàn)細胞內(nèi)物質(zhì)的循環(huán)利用。自噬屬動態(tài)過程。在基礎(chǔ)條件下,各類細胞中均存在低水平自噬。但營養(yǎng)不足或缺氧等刺激可能導(dǎo)致自噬水平上調(diào)。自噬是普遍存在于真核細胞的現(xiàn)象,并且可分為巨自噬、微自噬和分子伴侶介導(dǎo)的自噬三大類。這是一個受到緊密調(diào)控的步驟,此步驟是細胞生長、發(fā)育與穩(wěn)態(tài)中的常規(guī)步驟,幫助細胞產(chǎn)物在合成、降解以及接下來的循環(huán)中保持一個平衡狀態(tài)。目前已有多份研究表明自噬在許多細胞的分化進程中被不同程度地喚醒,例如參與血管生成、成骨分化、脂肪生成、神經(jīng)發(fā)生等過程。正常細胞自噬增強,可表現(xiàn)出阻止腫細胞發(fā)生的功能。浙江單熒光自噬慢病毒

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