當(dāng)外泌體在第1次被發(fā)現(xiàn)的時(shí)候，外泌體被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對(duì)其生物來(lái)源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號(hào)的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類型，其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、瘤侵襲等方方面面。有研究表明瘤來(lái)源的外泌體參與到瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成，促進(jìn)了瘤的生長(zhǎng)與侵襲。外泌體由細(xì)胞分泌釋放出來(lái)，在血液等體液內(nèi)傳播，然后又可被其他細(xì)胞吞噬，是細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)。腹水外泌體tmt
外泌體的生物發(fā)生途徑主要包括三個(gè)關(guān)鍵的檢查點(diǎn)：ILV的形成，阻止MVEs的降解以及MVEs和細(xì)胞膜的融合，這三個(gè)檢查點(diǎn)都包含在內(nèi)體相關(guān)的囊泡運(yùn)輸過(guò)程中。RABGTPase定位到特定膜結(jié)構(gòu)的表面，通過(guò)招募效應(yīng)因子來(lái)調(diào)節(jié)相應(yīng)膜結(jié)構(gòu)的囊泡運(yùn)輸，例如，在內(nèi)體溶酶體運(yùn)輸網(wǎng)絡(luò)中，RAB5調(diào)節(jié)早期內(nèi)體的形成及相互融合；內(nèi)體膜上RAB5到RAB7的轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)早期向晚期內(nèi)體的轉(zhuǎn)變；RAB7調(diào)節(jié)晚期內(nèi)體/MVEs與溶酶體的融合來(lái)降解ILVs；RAB27調(diào)節(jié)MVEs與細(xì)胞膜的對(duì)接和融合來(lái)釋放ILVs形成外泌體。內(nèi)吞的膜蛋白，特別是受體酪氨酸激酶家族的表皮生長(zhǎng)因子受體，定位到內(nèi)體和MVEs，通過(guò)MVEs和溶酶體融合來(lái)進(jìn)入溶酶體降解，此過(guò)程受多種RABGTPases和ESCRT復(fù)合體的調(diào)控。浙江CD9外泌體慢病毒包裝干細(xì)胞外泌體具有抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能。
密度梯度離心是基于差速超高速離心的改良技術(shù)。該方法需預(yù)先利用常用的梯度液介質(zhì)如蔗糖、碘克沙醇和氯化銫等，在離心管中構(gòu)筑從底部到頂部密度逐漸降低的密度梯度帶。根據(jù)密度梯度構(gòu)建和沉降方式的不同, 又可以分為速率區(qū)帶離心法和等密度梯度離心法, 前者主要根據(jù)顆粒的沉降速率分離, 介質(zhì)密度均小于外泌體密度, 離心時(shí)樣品在向超速離心管底部移動(dòng)時(shí), 會(huì)通過(guò)密度不斷增加的密度梯度區(qū)帶, 密度大的顆粒更容易穿過(guò)密度更高的梯度層, 更快地到達(dá)管底, 因此控制離心的時(shí)間很重要; 等密度梯度離心法中的密度梯度區(qū)帶, 則會(huì)根據(jù)樣品液中各種溶質(zhì)成分來(lái)進(jìn)行組合, 離心過(guò)程中, 無(wú)論離心時(shí)間多久, 不同密度顆粒jin會(huì)富集到具有相同密度的梯度區(qū)帶, 而不會(huì)沉淀到底部。
外泌體是細(xì)胞間信息傳遞的重要“信使”, 可通過(guò)三種方式介導(dǎo)細(xì)胞通訊: (1) 外泌體以旁分泌的方式與靶細(xì)胞相互作用, 通過(guò)受體–配體作用黏附到靶細(xì)胞表面, 隨后被內(nèi)吞入靶細(xì)胞, 或直接將內(nèi)容物釋放到靶細(xì)胞內(nèi), 從而激huo靶細(xì)胞; (2) 外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割, 產(chǎn)生的片段可以與靶細(xì)胞的細(xì)胞表面受體結(jié)合, 從而激huo靶細(xì)胞; (3) 外泌體還可以與靶細(xì)胞直接接觸發(fā)生膜融合, 導(dǎo)致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉(zhuǎn)移到目標(biāo)細(xì)胞, 從而引起靶細(xì)胞的響應(yīng)。通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊, 外泌體不jin能夠參與多種生理過(guò)程, 比如消除胞內(nèi)陳舊分子、呈遞抗原、分化調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞或髓樣細(xì)胞以抑制免疫反應(yīng), 而且還可以參與疾病形成的病理過(guò)程, 如通過(guò)與受體細(xì)胞的相互作用傳播病原物質(zhì)、促進(jìn)中流轉(zhuǎn)移過(guò)程中的血管生長(zhǎng)和中流細(xì)胞遷移。中流細(xì)胞來(lái)源的外泌體能促進(jìn)中流的轉(zhuǎn)移。
外泌體介導(dǎo)中流耐藥性:中流細(xì)胞來(lái)源的外泌體中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的變化在中流化療抗藥性的發(fā)生中起重要作用。Qu等研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-34/miR-449，促進(jìn)晚期腎細(xì)胞ai細(xì)胞中的跨膜受體酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表達(dá)，引發(fā)舒尼替尼耐藥。而外泌體能夠?qū)⑦@一lncRNA運(yùn)輸至舒尼替尼敏感的ai細(xì)胞，從而傳播舒尼替尼的抗性。外泌體中的miR21能夠抑制卵巢ai細(xì)胞凋亡，并通過(guò)結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲相關(guān)蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteaseactivatingfactor1，APAF1)使得卵巢ai細(xì)胞產(chǎn)生對(duì)紫杉醇的抗藥性。NTA技術(shù)已被外泌體研究領(lǐng)域認(rèn)可為外泌體表征手段之一。江西體液外泌體粒徑檢測(cè)
外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域均起著重要的作用，并且可以作為很好靶向給藥系統(tǒng)。腹水外泌體tmt
外泌體（Exosome），是細(xì)胞外囊泡（EV）的一種主要類型，是直徑為30至150nm的納米大小的膜結(jié)構(gòu)，大多數(shù)細(xì)胞都會(huì)分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中，通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和代謝物等來(lái)發(fā)揮細(xì)胞間通訊功能，參與免疫應(yīng)答、代謝和心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進(jìn)展等多種生理和病理過(guò)程。在內(nèi)體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體（MVE）的過(guò)程中，內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡（ILV），MVE與細(xì)胞膜融合釋放ILV到細(xì)胞外，即形成外泌體。腹水外泌體tmt
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