外泌體免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài) 的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH 和非 生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性， 不便進(jìn)行下一步的實驗 。PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9 《Scientific Reports》 雜志發(fā)表了該方法新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。色譜法，這種方法分離到的外泌體在 電鏡下大小均 一， 但是需要特殊的設(shè)備 ， 應(yīng)用不普遍 。神經(jīng)細(xì)胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。浙江CD9外泌體慢病毒包裝
全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)的基本原理是一種基于特異性免疫捕獲技術(shù)，允許研究者直接分析特定群體的外泌體或外囊泡。通過配套的試劑盒，客戶一次性能夠分析多達(dá)9個不同的樣本，很大節(jié)省了時間和經(jīng)濟(jì)成本。全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)兼容各種生物樣本，除了純化的外泌體之外，對于血液、尿液、腹水中的外泌體也可直接檢測分析，很大拓展了研究范圍。全自動的可對單個外泌體進(jìn)行表征分析的全新設(shè)備。該設(shè)備能夠提供全部的外泌體表征信息，包括外泌體粒徑大小、計數(shù)、分布、攜帶蛋白表達(dá)、生物標(biāo)志物（CD9，CD81，CD63等）共定位等。操作簡單，結(jié)果可靠。一經(jīng)推出，便引起了外泌體領(lǐng)域科研工作者的普遍關(guān)注，短短兩年時間在全球已有50多個實驗室采用該技術(shù)，發(fā)表重要文獻(xiàn)近百篇。江蘇外泌體透射電鏡檢測目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。
為了解決外泌體實驗遇到的上述的各種問題, Wako 研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS（MagCapture? Exosome Isolation Kit PS）提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì)，眾所周知磷脂酰絲氨酸（PS）在活細(xì)胞通過翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，暴露在外泌體膜外側(cè)3）。另外，T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-containing protein 4（Tim4 通過巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體）蛋白通過細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4）?；谏鲜鲋R，我們利用Tim4固化磁珠，在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體，再添加螯合劑洗脫外泌體，這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開發(fā)，并取得了成功。5）這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法。
外泌體即細(xì)胞分泌的直徑約40-100 nm的微小膜泡，多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。一開始被當(dāng)做細(xì)胞排泄物，但是近幾年，研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用。種瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移后，如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個巨大挑戰(zhàn)。發(fā)表于Nano Lett的一項研究中，研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)（LD-MDS），并取得成功。在這項研究中，研究人員將相關(guān)藥物錨定在活巨噬細(xì)胞膜上，細(xì)胞自身相關(guān)蛋白酶響應(yīng)開啟并將藥物轉(zhuǎn)載進(jìn)入外泌體，順利遞送至肺轉(zhuǎn)移灶并且轉(zhuǎn)化為納米囊泡和次級納米囊泡，促進(jìn)轉(zhuǎn)移性4T1病細(xì)胞的有效內(nèi)化和細(xì)胞死亡。之后，受損的4T1病細(xì)胞可以釋放次級納米囊泡和游離藥物分子，再破壞鄰近的病細(xì)胞。研究顯示， LD-MDS對體內(nèi)直徑小于100μm的肺轉(zhuǎn)移病灶顯示出優(yōu)異的靶向效率，并顯著壓制肺轉(zhuǎn)移。幾乎沒有混入外泌體以外的蛋白，回收量高，操作重復(fù)性好。
目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法，但這些方法混有非常多的雜質(zhì)，必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定，不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機(jī)、無法進(jìn)行多樣品分析等問題。因此外泌體研究相對困難，需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此，日本和光著眼于巨噬細(xì)胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細(xì)胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過磷酯酰絲氨酸（PS）法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠，再經(jīng)過含有EDTA的洗脫緩沖液進(jìn)行分離，提取高純度的完整外泌體。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態(tài)學(xué)（電子顯微鏡技術(shù)）、粒子大小以及標(biāo)志蛋白等方式實現(xiàn)的。鼻腔灌洗液外泌體熒光標(biāo)記
外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml。浙江CD9外泌體慢病毒包裝
外泌體是由各種細(xì)胞分泌的小型膜囊泡（直徑30~100nm），存在于大多數(shù)體液（如血液、尿液、髓液等）和細(xì)胞培養(yǎng)液中。外泌體是由脂質(zhì)雙層膜包被的膜囊泡，產(chǎn)生于稱為多囊泡體的細(xì)胞外囊泡中，多囊泡體通過與細(xì)胞膜融合將外泌體釋放到細(xì)胞外。外泌體含核內(nèi)體來源的蛋白質(zhì)（如ESCRTs）、細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸相關(guān)蛋白（如RabGTPase等）及細(xì)胞膜來源蛋白（如CD63, CD81等）等各種內(nèi)分泌細(xì)胞來源的蛋白和RNA，同時還含有分泌細(xì)胞膜來源和內(nèi)體膜來源的脂質(zhì)（如膽固醇和鞘磷脂等）。浙江CD9外泌體慢病毒包裝