自噬是細(xì)胞內(nèi)的一種自食（Self-eating）的現(xiàn)象，自噬和凋亡二者共用相同的刺激因素和調(diào)節(jié)蛋白，但是誘發(fā)閾值和門檻不同，如何轉(zhuǎn)換和協(xié)調(diào)目前還不清楚。自噬是指膜（目前來源還有爭議，大部分表現(xiàn)為雙層膜，有時多層或單層）包裹部分胞質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)需降解的細(xì)胞器、蛋白質(zhì)等形成自噬體（autophagosome），結(jié)尾與溶酶體融合形成自噬溶酶體（autophagolysosome），降解其所包裹的內(nèi)容物，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞器的更新。線粒體自噬通過自噬降解胞內(nèi)受損或多余的線粒體，是維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵機(jī)制之一。通過調(diào)節(jié)自噬活性, zhiliao神經(jīng)退行性疾病、中流、心衰以及組織纖維化是可行的途徑。福建細(xì)胞自噬GFP-LC3B
有研究表明，一種攜帶TSLC1抑病基因的溶瘤腺病毒可靶向Wnt信號通路使瘤細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞自噬、凋亡等從而抑制瘤生長，可延長小鼠模型的生存期，該研究則從基因?qū)用嬲{(diào)控了瘤代謝。自噬在肝病的發(fā)生的發(fā)展中發(fā)揮重要作用，但其影響呈雙面性。自噬的誘導(dǎo)和抑制在肝病免疫治理中均取得了一定進(jìn)展，但其作用機(jī)制并不完全明確，取決于很多因素，可能和肝病的分化、病程分期等有關(guān)。并且，自噬的調(diào)控機(jī)制在肝病發(fā)生的發(fā)展的不同階段可能起到不同的作用，如何調(diào)控自噬，減少肝病發(fā)生，并且促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入自噬死亡程序，已經(jīng)成為瘤預(yù)防和治理研究的新熱點(diǎn)。河南western blot檢測自噬微自噬在運(yùn)輸胞內(nèi)物質(zhì)、維持胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)以及增強(qiáng)細(xì)胞對饑餓的耐受能力方面有許多功能。
在抗中流zhiliao過程中, ai細(xì)胞的生死存亡不僅取決于自噬活性, 還與抗中流藥物的作用機(jī)制有關(guān)。Gump等近期發(fā)表的研究發(fā)現(xiàn), 經(jīng)流式細(xì)胞技術(shù)分選的高自噬水平和低自噬水平的HeLa細(xì)胞 (人子宮頸ai細(xì)胞), 用抗ai藥物TRAIL和Fas配體進(jìn)行處理, TRAIL處理之后, 高自噬水平的細(xì)胞存活率更高; 而Fas配體處理后, 低自噬水平的細(xì)胞卻顯現(xiàn)出更高的生存率。在TRAIL處理后, 高自噬水平的細(xì)胞降解了被藥物激huo的半胱天冬酶-8 (Caspase 8), 從而阻斷了致死的通路; 而在Fas配體處理后, 高自噬水平的細(xì)胞卻降解了FAP-1蛋白, 使得細(xì)胞對Fas配體更加敏感, 促進(jìn)中流細(xì)胞死亡。
自噬是參與線粒體循環(huán)更新的重要途徑, 這個過程異常也是PD發(fā)病的重要機(jī)制。當(dāng)線粒體損傷時, PINK-1和Parkin被募集至線粒體膜誘導(dǎo)線粒體自噬 (mitophagy) 活化, 從而清chu損傷的線粒體。家族遺傳型PD患者中, PINK-1和Parkin突變導(dǎo)致線粒體自噬受阻, 受損線粒體和ROS大量堆積對神經(jīng)元造成損傷。其他PD相關(guān)蛋白也參與了自噬調(diào)節(jié), DJ-1功能缺陷影響自噬流; UCH-L1與LAMP-2A結(jié)合調(diào)節(jié)分子伴侶介導(dǎo)的自噬, 影響泛素化的“貨物”進(jìn)入溶酶體, 導(dǎo)致α-synuclein形成聚集體; LRRK2的突變影響分子伴侶介導(dǎo)的自噬轉(zhuǎn)運(yùn)復(fù)合體組裝, 也導(dǎo)致分子伴侶介導(dǎo)自噬的缺陷。自噬參與了PD的發(fā)病過程，過量的α-syn可抑制自噬。
PINK1/Parkin介導(dǎo)的線粒體自噬在帕金森綜合征的發(fā)病中起重要作用。PINK1是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，廣fan表達(dá)于各組織細(xì)胞，尤其是心臟、腦、肌肉等耗能高的qi官或組織，由581個氨基酸組成，包含4個結(jié)構(gòu)域:N端的線粒體定位序列(1～84)、跨膜序列(85～110)、絲氨酸/蘇氨酸激酶結(jié)構(gòu)域(156～509)以及C端結(jié)構(gòu)域(510～581)。Parkin是由park2基因編碼的一種蛋白，具有E3泛素-蛋白連接酶活性。Parkin蛋白包含465個氨基酸，由三部分構(gòu)成:N端的泛素樣結(jié)構(gòu)域(1～76)、C端的環(huán)指結(jié)構(gòu)域(226～465)以及鏈接區(qū)(141～225)。環(huán)指結(jié)構(gòu)域是發(fā)揮泛素蛋白連接酶活性的關(guān)鍵。自噬體溶酶體的融合機(jī)制與同質(zhì)性液泡膜融合機(jī)制相同。湖南western blot檢測自噬
自噬體是自噬的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)。自噬體屬于亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，直徑一般為300～900nm，平均500nm，普通光鏡下看不到。福建細(xì)胞自噬GFP-LC3B
Beclin 1敲低的神經(jīng)元細(xì)胞中, Aβ、全長APP以及APP的C端片段均大量堆積, 并伴隨自噬小體轉(zhuǎn)化能力降低。Aβ除了作為自噬的底物以外, 本身可誘導(dǎo)自噬活化, 并抑制mTOR活性。因此, 正常生理?xiàng)l件下細(xì)胞內(nèi)Aβ活化自噬促進(jìn)自身降解, 形成一個負(fù)反饋平衡調(diào)節(jié)機(jī)制。然而病理?xiàng)l件下細(xì)胞內(nèi)大量堆積的Aβ將破壞溶酶體系統(tǒng), 使溶酶體通透性增加, 并影響自噬小體成熟。事實(shí)上, 還有實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明自噬參與了Aβ的產(chǎn)生。免疫染色和亞細(xì)胞組分分析表明, Aβ肽、β-CTF (C-terminal fragment of APP) 以及γ-分泌酶都大量存在于自噬小體中, γ-分泌酶能在自噬體中將β-CTF加工為Aβ肽, 尤其是毒性更強(qiáng)的Aβ42。福建細(xì)胞自噬GFP-LC3B