phil作為連翹的主要藥效成分之一,具有廣fan藥理作用,但極性較小、滲透性差、體內(nèi)吸收較差、代謝較快,phil可促進(jìn)肺中流組織中endostatin的表達(dá),下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá),共同抑制中流xue管的生成。以磷脂和膽固醇為載體將phil制備成脂質(zhì)體納米粒,增強(qiáng)了phil的抗氧化活性,緩釋性增強(qiáng);采用聚山梨酯-80將揮發(fā)油和phil制成納米膠束,提高了phil的溶解度,增強(qiáng)了phil的透皮吸收。用外泌體作為藥物載體,制備一種負(fù)載連翹苷的外泌體遞藥系統(tǒng)(phil-exo)。制備的phil-exo被A549細(xì)胞攝取良好,對(duì)A549細(xì)胞遷移具有較高抑制作用,明顯提高phil的抗中流細(xì)胞遷移能力,這可能是由于細(xì)胞分泌所得外泌體粒徑極小易于透過細(xì)胞,有助于改善phil的難以滲透細(xì)胞膜和不穩(wěn)定性。將紫杉醇載入到外泌體中可以使紫杉醇對(duì)MDCKMDR1細(xì)胞的毒性提高50倍。湖南動(dòng)物血液樣本外泌體載藥參考價(jià)格
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——免疫親和層析法。利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法,主要用于生物大分子的分離、純化。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識(shí)別,這使得提取的外泌體純度高,但是產(chǎn)量低。分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法,從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白,結(jié)果表明,免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix、CD9、CD63),同時(shí),ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。組織樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)參考價(jià)格外泌體可以用于多烯紫杉醇的傳遞載體,并且具有良好的緩釋性和靶向性。
β-欖香烯 (β-ELE) 是從莪術(shù)根莖中提取的一種新型的非細(xì)胞毒性抗中流藥物, 句有療效確切、低毒等特性, 能通過凋亡途徑抑制肝ai細(xì)胞、乳腺ai細(xì)胞等多種中流細(xì)胞的增殖與遷移, 并能逆轉(zhuǎn)中流細(xì)胞的多藥耐藥性, 增加對(duì)化療藥物的敏感性, 但其作用機(jī)制尚未完全闡明。目前研究認(rèn)為第10染色體同源丟失性磷酸酶?張力蛋白基因 (PTEN) 能抑制多種ai癥的發(fā)生, 并能增加耐藥細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性。Zhang等人研究顯示, 利用乳腺ai耐藥細(xì)胞株與負(fù)載β-ELE的外泌體 (50 μmol·L?1/L, 30 h) 共培養(yǎng), 分析發(fā)現(xiàn)負(fù)載β-ELE的外泌體上調(diào)了耐藥細(xì)胞中miR-34a及其靶基因PTEN的表達(dá), 并下調(diào)耐藥miR-452和多藥耐藥基因蛋白P-gp的表達(dá), 明顯逆轉(zhuǎn)了乳腺ai的耐藥性。
甲狀腺ai(thyroidcarcinoma)是一種常見的內(nèi)分泌惡性中流。在甲狀腺ai的所有亞型中,甲狀腺未分化ai(ATC)的惡性程度很高。目前ATC缺乏有效的zhiliao藥物,屬于難治性惡性中流疾病,傳統(tǒng)的放化療療效差,分子靶向藥物jin對(duì)部分基因突變型ATC有效。硬脂酞輔酶A去飽和酶1(stearoyl-CoAdesat urase1,SCD1)是一種脂肪酸合成和代謝的關(guān)鍵調(diào)節(jié)分子,也是催化飽和脂肪酸向單不飽和脂肪酸轉(zhuǎn)變的限速酶,參與細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等多種生理過程。為研究SCD1與ATC的關(guān)系,通過構(gòu)建鑒定靶向SCD-1的小干擾RNA(siRNA)外泌體,分析以外泌體為載體的靶向SCD-1的RNAi基因zhiliao對(duì)ATC細(xì)胞存活的影響。細(xì)胞存活實(shí)驗(yàn)證明SCD-1-siRNA外泌體可抑制ATC細(xì)胞的存活,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。這一結(jié)果說明SCD-1-siRNA外泌體具有zhiliaoATC的巨大潛力。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體可穿透許多生物膜,提高藥物的運(yùn)輸效率和靶向性。
研究證明了外泌體運(yùn)載siRNA進(jìn)行RNAizhiliao的潛力。在他們的研究中,首先通過化學(xué)轉(zhuǎn)染法將RAD51siRNA裝載入源于HeLa細(xì)胞和腹水的外泌體,隨后在體外成功地將siRNA運(yùn)輸至目標(biāo)細(xì)胞。結(jié)果顯示,這種外泌體負(fù)載RAD51siRNA的抑制效果與直接化學(xué)轉(zhuǎn)染目標(biāo)細(xì)胞的抑制效果相當(dāng),但由于化學(xué)轉(zhuǎn)染外泌體后不能將外泌體和轉(zhuǎn)染劑很好的分離,在應(yīng)用外泌體時(shí),無法說明是外泌體還是轉(zhuǎn)染劑在發(fā)揮作用。于是研究者又利用電穿孔使RAD51siRNA載入到外泌體中。結(jié)果顯示,相比于外泌體與siRNA的混合物(未經(jīng)載藥處理),經(jīng)電穿孔載siRNA后的外泌體可以有效抑制RAD51。并且由于RAD51的抑制會(huì)帶來人ai細(xì)胞的大量死亡,因而通過外泌體運(yùn)載siRNA的方法在ai癥zhiliao方面有著誘人的前景。裝載miR-17-92團(tuán)簇的間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體處理中風(fēng)大鼠,其神經(jīng)學(xué)功能得到改善。湖北外泌體載藥實(shí)驗(yàn)咨詢問價(jià)
外泌體對(duì)基因類藥物的裝載方式一般采用電穿孔法和化學(xué)轉(zhuǎn)染法。湖南動(dòng)物血液樣本外泌體載藥參考價(jià)格
外泌體作為一種潛在的理想型藥物遞送載體,可以利用化學(xué)和基因工程等方法對(duì)其進(jìn)行內(nèi)部及膜表面工程化改造,將化學(xué)藥物、功能短肽、小干擾RNA等多種生物活性物質(zhì)包載到外泌體中,可實(shí)現(xiàn)特定類型的細(xì)胞或組織的靶向藥物遞送。目前,常用的實(shí)現(xiàn)外泌體包載藥物方法有膜融合法、電穿孔法及基因工程法等。膜融合法-利用外泌體句有磷脂雙分子層膜結(jié)構(gòu)這一特性,可使用共孵育、聚碳酸酯膜擠壓等外源性方法使外泌體與其他類型膜結(jié)構(gòu)或藥物融合。電穿孔法-也叫電轉(zhuǎn)染,是一種新型外泌體包載核酸藥物的生物技術(shù)。基因工程法-外泌體的基因修飾是將目的基因轉(zhuǎn)入供體細(xì)胞,使外泌體膜上功能配體過表達(dá)的一種可行策略。湖南動(dòng)物血液樣本外泌體載藥參考價(jià)格