外泌體直接載yao方式包括皂苷處理法、孵育法、凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法等。皂苷處理法指共培養(yǎng)外泌體、藥物和皂苷溶液,然后通過透析膜、色譜柱純化得到載藥外泌體的方法。孵育法指藥物和外泌體在適宜的條件下共培養(yǎng)。凍融循環(huán)法是經(jīng)過冷凍、融化過程使外泌體包裹藥物。超聲法利用超聲波使藥物進(jìn)入外泌體中,擠出法利用擠出機(jī)實(shí)現(xiàn)外泌體載帶藥物。其中皂苷輔助藥物裝載方法是直接載yao方式中常用的一種載yao方式。上述方法也存在一些缺點(diǎn):孵育法操作簡單,但載藥量低;凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法對儀器的要求高,且可能會破壞外泌體的質(zhì)膜結(jié)構(gòu)造成藥物泄露,終造成載藥量不理想。外泌體具有對自身中流的靶向能力,作為載體傳遞藥物可以增加中流部位的藥物濃度。江蘇整體實(shí)驗(yàn)外泌體載藥參考價(jià)格
?外泌體載藥在腦血管疾病zhiliao中的應(yīng)用:1缺血性腦卒中(IS)是一種常見的腦血管疾病研究顯示外泌體負(fù)載CircRNASCMH1傳遞增強(qiáng)了IS模型的神經(jīng)可塑性,抑制了膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性和外周免疫細(xì)胞的浸潤,促進(jìn)了IS后的功能恢復(fù)。2腦出血(ICH)是卒中句破壞性的亞型。研究發(fā)現(xiàn)裝載miR-21的MSCs外泌體可以為ICH的zhiliao提供一種新的方法,減輕ICH后繼發(fā)性損傷引起的神經(jīng)元死亡和腦血腫。3腦動脈粥樣ying化是腦血管疾病的主要原因。參與動脈粥樣ying化的大多數(shù)細(xì)胞可以產(chǎn)生外泌體。因此,外泌體介導(dǎo)的miRNA或反義miRNA傳遞可被視為zhiliao腦動脈粥樣ying化的工句。4研究發(fā)現(xiàn)在顱內(nèi)動脈瘤(IA)的小鼠模型中靜脈應(yīng)用MSC外泌體可將IA破裂率降低39%。河北整體項(xiàng)目外泌體載藥外泌體內(nèi)源性載yao方式即先將藥物載入供體細(xì)胞中,當(dāng)藥物分選進(jìn)入外泌體并釋放外泌體后分離純化而獲。
外泌體作為一種潛在的理想型藥物遞送載體,可以利用化學(xué)和基因工程等方法對其進(jìn)行內(nèi)部及膜表面工程化改造,將化學(xué)藥物、功能短肽、小干擾RNA等多種生物活性物質(zhì)包載到外泌體中,可實(shí)現(xiàn)特定類型的細(xì)胞或組織的靶向藥物遞送。目前,常用的實(shí)現(xiàn)外泌體包載藥物方法有膜融合法、電穿孔法及基因工程法等。膜融合法-利用外泌體句有磷脂雙分子層膜結(jié)構(gòu)這一特性,可使用共孵育、聚碳酸酯膜擠壓等外源性方法使外泌體與其他類型膜結(jié)構(gòu)或藥物融合。電穿孔法-也叫電轉(zhuǎn)染,是一種新型外泌體包載核酸藥物的生物技術(shù)?;蚬こ谭?外泌體的基因修飾是將目的基因轉(zhuǎn)入供體細(xì)胞,使外泌體膜上功能配體過表達(dá)的一種可行策略。
姜黃素/外泌體可以明顯地減少由脂多糖引起的炎癥因子IL-6(白介素-6)和TNF-a(中流壞死因子-α)的釋放。在脂多糖引起的炎癥模型中,注射姜黃素/外泌體的小鼠組幾乎未發(fā)生死亡,而注射游離姜黃素藥物的小鼠組死亡率接近60%,注射姜黃素/脂質(zhì)體的小鼠組死亡率接近80%。這說明姜黃素/外泌體對脂多糖引起的感ran性休克有較好的zhiliao效果,從而提高了C57BL/6J模型鼠的存活率。研究者認(rèn)為,將外泌體作為姜黃素的載體時(shí),可以增加Gr-1+細(xì)胞對姜黃素的攝取,從而句有更好的kang炎作用。相同劑量的PTX,PTX-M1-Exos載藥體系和游離的PTX相比,對小鼠乳腺ai4T1的抑制率更高。
外泌體載藥系統(tǒng)一直是眾多研究者關(guān)注的焦點(diǎn)。SUN等人在早期的動物實(shí)驗(yàn)中對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的膿毒性休克小鼠模型進(jìn)行腹腔注射含姜黃素的外泌體。結(jié)果表明,外泌體可用作kang炎藥物的體內(nèi)載體。自此,揭開了外泌體介導(dǎo)藥物傳遞系統(tǒng)研究的新篇章。他們改用鼻腔內(nèi)注射,結(jié)果發(fā)現(xiàn),載有姜黃素或信號傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激huo因子3抑制劑的外泌體可用于zhiliaoLPS誘導(dǎo)的腦炎癥、實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦炎和GL26腦中流模型。隨后又有研究者發(fā)現(xiàn),向野生型小鼠靜脈注射攜帶小干擾核糖核酸序列的外泌體,能明顯抑制阿爾茨海默病zhiliao靶點(diǎn)β-淀粉樣前體蛋白裂解酶1的表達(dá)。外泌體裝載姜黃素的穩(wěn)定性和kang炎特點(diǎn),可將其運(yùn)用于腦部炎癥的zhiliao。江蘇整體實(shí)驗(yàn)外泌體載藥參考價(jià)格
樹突細(xì)胞分泌的外泌體表面會表達(dá)出CD9,有利于加強(qiáng)外泌體與靶細(xì)胞的融合,提高外泌體對藥物運(yùn)輸?shù)男省=K整體實(shí)驗(yàn)外泌體載藥參考價(jià)格
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——微流控技術(shù)。微流控是利用微納米級尺寸的管道來處理和操控流體所涉及的一門技術(shù),其在外泌體分離方面的應(yīng)用受到越來越多學(xué)者的關(guān)注。Jie等人開發(fā)了一種三維納米結(jié)構(gòu)微流控芯片,微柱陣列通過化學(xué)沉積將交叉多壁碳納米管功能化,然后其就可以識別特定的分子(CD63)并利用獨(dú)特拓?fù)浼{米材料高效的捕獲外泌體。Wunsch等人利用硅工藝生產(chǎn)納米級確定性側(cè)向位移(Nano-DLD)芯片,得到了均勻的間隙尺寸,該芯片可以靈敏地將20~110nm的顆粒分離。該研究證明了外泌體基于大小的位移,從而揭示了利用芯片分選和量化納米級生物膠體的潛力。江蘇整體實(shí)驗(yàn)外泌體載藥參考價(jià)格