在活性氧類(reactiveoxygenspecies,ROS)、營養(yǎng)缺乏、細胞衰老、缺氧和缺血等刺激下,細胞內(nèi)線粒體受損,線粒體形態(tài)和功能發(fā)生改變,因此被自噬蛋白特異性包裹并被溶酶體降解。在心臟缺血缺氧性疾病、高xue壓及大血管疾病中,線粒體自噬可以修復(fù)因缺氧、缺血及損傷等所致的線粒體結(jié)構(gòu)和功能的改變。心肌細胞的正常工作需要線粒體的氧化功能,適當?shù)木€粒體自噬對心肌細胞具有保護作用,然而過度的線粒體自噬則會導(dǎo)致細胞內(nèi)線粒體過度清chu,影響線粒體的氧化功能,從而導(dǎo)致心肌細胞無法正常工作,進而加重心肌細胞損害。在用GFP-LC3B慢病毒感染細胞后,在非自噬的情況下,熒光顯微鏡下GFP-LC3B以彌散的形式存在于細胞質(zhì)中;湖南透射電鏡檢測自噬
自噬是一系列自噬體結(jié)構(gòu)演變的過程,由自噬相關(guān)基因(autophagy-relatedgene,ATG)執(zhí)行精細的調(diào)控。在饑餓、低氧、藥物等因素作用下,待降解的細胞成分周圍會形成雙層結(jié)構(gòu)分隔膜,隨后分隔膜逐漸延伸,較終將待降解的胞漿成分完全封閉形成自噬體(autophosome);自噬體形成后將通過細胞骨架微管系統(tǒng)運輸至溶酶體,二者融合形成自噬溶酶體(autopholysome);較終其內(nèi)容物在溶酶體酶作用下被細胞降解利用。目前研究發(fā)現(xiàn)自噬調(diào)節(jié)涉及多種信號通路,其中以腺苷單磷酸活化蛋白激酶(adenosinemono-phosphateactivatedproteinkinase,AMPK)及哺乳動物雷帕霉素受體(mammaliantargetofrapamycin,mTOR)信號通路為調(diào)控中心。AMPK促進自噬發(fā)生,而mTOR阻止自噬發(fā)生。此外,許多經(jīng)典的凋亡信號通路或蛋白被發(fā)現(xiàn)與自噬調(diào)控之間存在著復(fù)雜的交織。湖南自噬LC3適度的線粒體自噬有助于清chu細胞內(nèi)受損或功能障礙的線粒體。
目前認為,自噬體的膜不是直接來源于高爾基體或內(nèi)質(zhì)網(wǎng),而是在胞漿中重新生成的,但具體的機制尚不清楚。當beclin-1被活化后,胞漿中先形成比較多個membranesource(自噬體膜發(fā)生中心),在它們不斷擴展的過程中,VMP1蛋白由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體轉(zhuǎn)位到自噬體膜上(VMP1又叫TMEM49,已知唯獨與自噬有關(guān)的跨膜蛋白),同時,MAP1-LC3由胞漿型(即LC3-I)轉(zhuǎn)位到自噬體膜(即LC3-II),LC3這一轉(zhuǎn)變過程可被WesternBlot和熒光顯微鏡檢測到,現(xiàn)已成為監(jiān)測自噬體形成的推薦方法。UA可引導(dǎo)粒線體的自噬作用,并防止有功能障礙粒線體的累積。在囓齒動物理,UA可經(jīng)由粒線體引發(fā)增進運動能力,這些新的發(fā)現(xiàn)建議UA在增進粒線體和肌肉功能方面有醫(yī)藥潛力。研載生物科技(上海)有限公司。
凋亡相關(guān)caspase家族蛋白可與自噬相關(guān)蛋白互相影響。caspase-3通過剪切滅活Beclin-1阻止自噬促發(fā)凋亡。研究發(fā)現(xiàn)凋亡死亡受體通路中DISC可在自噬體膜上組裝,應(yīng)用蛋白酶阻止劑如硼替佐米或溶酶體阻止劑氯喹阻止自噬,會增進DISC形成進一步喚醒caspase-8寡聚化誘導(dǎo)凋亡。T細胞研究中發(fā)現(xiàn)caspase-8調(diào)控著自噬,caspase-8缺陷或Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白(Fas-associateddeathdomain,FADD)缺陷的T細胞其自噬功能被上調(diào)。Furuya等發(fā)現(xiàn)Beclin-1可通過提高caspase-9活性而增強凋亡誘導(dǎo)劑誘發(fā)的細胞凋亡。自噬能夠明顯抑制造血干細胞的代謝,能夠清理線粒體堆積,保持自我的再生能力。
自噬的功能(1)饑餓應(yīng)答時的作用,在肝臟或在培養(yǎng)細胞中,氨基酸的匱乏會誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生自體吞噬,由自體吞噬分解大分子,產(chǎn)生在分解代謝和合成代謝過程中所必須的中間代謝物。(2)在細胞正?;顒又械淖饔?如在動物的不正常發(fā)育、老化和分化過程中,自體吞噬負責降解正常的蛋白以重新組建細胞。盡管通常人們認為自體吞噬不具有選擇性,但是在某些病理和壓力條件下,通過自體吞噬能選擇性地隔離某些細胞器,如線粒體、過氧化物酶體等。(3)在某些組織中的特定功能,如黑質(zhì)的塞梅林神經(jīng)節(jié)中,多巴胺能神經(jīng)元中的神經(jīng)黑色素的合成就需要把細胞質(zhì)中的多巴胺醌用AV包被隔離起來。LC3B-II 增加既可能是自噬活化后自噬小體增多而成,也可能是自噬溶酶體降解失敗所致。遼寧單熒光自噬慢病毒包裝
由于自噬體膜形成過程中需要LC3,因此通過標記LC3可以識別自噬體。湖南透射電鏡檢測自噬
什么是自噬?簡單來說,細胞自噬,就好像一臺電腦,用時間長了,出問題了,而斷食引發(fā)的細胞自噬,就像是給它重裝系統(tǒng),讓它煥然一新。自噬(Autophagy),希臘語“auto”(自我)和“phagein”(進食),直接翻譯過來就是,自己吃自己。從專業(yè)上說是,細胞溶質(zhì)的成分被降解,然后通過溶酶體(細胞里面有一個專門的小隔間,里面有消化蛋白質(zhì),碳水,和脂肪的酶,專門管這個小隔間叫做溶酶體(lysosome)),回收細胞中損壞的元件,循環(huán)再利用,組成一個新的細胞。湖南透射電鏡檢測自噬