在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí),需考慮您希望輸送的運(yùn)載物(DNA、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型。您可通過(guò)下表選擇各類陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。 我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對(duì)自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細(xì)胞無(wú)毒性作用—您之所以能看到結(jié)果,是因?yàn)楹怂岽嬖冢皇且驗(yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類型提供了快速、簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案 連續(xù)細(xì)胞系 具有無(wú)限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力,它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必...
羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級(jí)版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性,在超過(guò)350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證,尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。 兩種試劑對(duì)CHO-K1 細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場(chǎng)顯微圖. 與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較,X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性 不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENE HP 試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑 超過(guò)350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證 還有一個(gè)好消息 X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑 ...
用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后,細(xì)胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。 對(duì)懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/ 30 毫升的 293F 細(xì)胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),用量為 LipoD293? 試...
.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%。 2.高靈活應(yīng)用, 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。 3.細(xì)胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo)。 4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基)。 圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說(shuō)明書建議的操作流程,或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。 通過(guò)LightCycler? h-HPRT Housek...
對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測(cè)器測(cè)定;GFP陽(yáng)性細(xì)胞率使用BD公司的FACS檢測(cè)。左圖:LipoD293試劑(升級(jí)版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的價(jià)格比較(美元/1000微升)。所有的價(jià)格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑制作原理是什么?動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu) 對(duì) HepG...
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級(jí)版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性,在超過(guò)350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證,尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對(duì)CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場(chǎng)顯微圖.與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過(guò)350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證還有一個(gè)好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷哦快去搶購(gòu)吧~原代細(xì)胞直接分離...
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要?。‘?dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒(méi)有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦! 載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見(jiàn)的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對(duì)照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對(duì)照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證. pei轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明...
Polysciences的高純度單體和聚合物產(chǎn)品在醫(yī)療器械中有許多應(yīng)用,并不斷開(kāi)發(fā)和增強(qiáng)其性能。公司秉承為應(yīng)用而研發(fā),目前已擁有超過(guò)3000種產(chǎn)品。質(zhì)量保證1、遵循ISO 13485質(zhì)量管理認(rèn)證 獲得美國(guó)FDA有效注冊(cè) 遵守良好生產(chǎn)規(guī)范(cGMP) 獲得管理系統(tǒng)CSMS認(rèn)證 特種化學(xué)行業(yè)公認(rèn)的代言人功能強(qiáng)大、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、安全可靠 這么好的轉(zhuǎn)染試劑,難道你不心動(dòng)嗎? 華雅思創(chuàng)生物經(jīng)營(yíng)品牌 經(jīng)過(guò)幾年的不懈努力,華雅思創(chuàng)生物提供的產(chǎn)品覆蓋免疫細(xì)胞***、干細(xì)胞***、干細(xì)胞基礎(chǔ)研究、動(dòng)物模型疾病研究、基因檢測(cè)(NGS)、試管嬰兒、產(chǎn)品質(zhì)控等諸多熱點(diǎn)科學(xué)研究...
Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無(wú)其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中(包括常見(jiàn)細(xì)胞類型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來(lái)難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型)提供如此簡(jiǎn)便、高效的siRNA輸送效果。 高效 可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果 相對(duì)于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑,Lipofectamine RNAiMAX 轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下,Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,超過(guò)其他RNAi試劑。 隨后分...
X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì):1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間,只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.轉(zhuǎn)染試劑--總有一款你想要的.上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑對(duì)照 羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升...
簡(jiǎn)介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無(wú)動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲(chóng)細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢(shì):1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑,無(wú)動(dòng)物源性成分,室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率,對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過(guò)X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高...
確定希望輸送的運(yùn)載物 (如DNA、RNA或蛋白質(zhì)) 根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)類型,我們可能需要將不同的運(yùn)載物輸送到細(xì)胞內(nèi)部,包括**常見(jiàn)的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。 2 希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型 轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡(jiǎn)單分為兩大類,連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。 連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力,它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。 從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑 簡(jiǎn)介: X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2 μm濾膜過(guò)濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。 優(yōu)勢(shì):1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。 2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間,只需對(duì)X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。 3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作。 無(wú)論有無(wú)血清、***存在均可獲得很高的轉(zhuǎn)染...
在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供 制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測(cè) GFP 熒光,以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。 對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institu...
簡(jiǎn)介: X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無(wú)動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲(chóng)細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。 優(yōu)勢(shì): 1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑,無(wú)動(dòng)物源性成分,室溫穩(wěn)定。 2.高轉(zhuǎn)染效率,對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。 3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好. 圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過(guò)X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA,RNA等導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細(xì)胞基因功能、實(shí)現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。市場(chǎng)上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目,各有千秋,然而沒(méi)有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細(xì)胞種類、滿足所有實(shí)驗(yàn)需求和目的,成分控認(rèn)為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機(jī)理對(duì)轉(zhuǎn)染效果及細(xì)胞生理作用影響***,是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù),選試劑時(shí)要留意成分哦。嚴(yán)格來(lái)講,轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學(xué)法、物理法(電穿孔、顯微注射等)以及***介導(dǎo)法,沒(méi)有一種方法是放之四海而皆準(zhǔn)。作為成分控的小編,本次主要為大家介紹基于各類轉(zhuǎn)染試劑的化學(xué)法轉(zhuǎn)染。采用siRNA轉(zhuǎn)染試劑可以將siRNA輕松導(dǎo)入細(xì)胞...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì):1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間,只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成; 混勻后室溫下孵育15-20分鐘,直接取10μL加入已鋪好細(xì)胞的孔中.上海核酸轉(zhuǎn)染試劑類型細(xì)胞...
siRNA,加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細(xì)胞直到適當(dāng)?shù)臅r(shí)候檢測(cè)基因沉默效果。這個(gè)快速操作流程簡(jiǎn)便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”,方便至極。當(dāng)然,習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細(xì)胞匯合度50%—80%進(jìn)行轉(zhuǎn)染就可以了。沒(méi)有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)化到了***。適合多種細(xì)胞類型:HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對(duì)于原代細(xì)胞,產(chǎn)品手冊(cè)中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞...
LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉(zhuǎn)染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光,以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細(xì)胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達(dá)到95%的細(xì)胞融合。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后,分別通過(guò)Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)效率。所...
在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%。2.高靈活應(yīng)用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。3.細(xì)胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo)。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說(shuō)明書建議的操作流程,或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。通過(guò)LightCycler?h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率。...
基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,其主要作用原理是與DNA通過(guò)沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物,粘附到細(xì)胞膜表面,借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時(shí)間,細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響,因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長(zhǎng),且重復(fù)性不佳?;谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽(yáng)離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物,從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞...
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō),這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑公司 對(duì) HepG2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較 右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDN...
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級(jí)版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性,在超過(guò)350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證,尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對(duì)CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場(chǎng)顯微圖.與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過(guò)350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證還有一個(gè)好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷哦快去搶購(gòu)吧~試劑可在單次靜脈...
將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(3×105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測(cè)siRNA***效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFE...
轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)程,是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞不開(kāi)的話題。然而常常聽(tīng)到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細(xì)胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細(xì)胞換液了",真所謂辛辛苦苦實(shí)驗(yàn)N多回,一夜回到解放前……眾所周知,影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多,包括細(xì)胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量、微生物污染、轉(zhuǎn)染試劑等。各種細(xì)胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同,現(xiàn)實(shí)中也并沒(méi)有一種放之四海而皆準(zhǔn)的方案。RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比...
在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供 制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測(cè) GFP 熒光,以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。 對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institu...
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō),這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過(guò)程,是細(xì)胞生物學(xué)、基因表達(dá)和基因***實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵步驟。細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)siRNA,加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5...
簡(jiǎn)介: X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無(wú)動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲(chóng)細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。 優(yōu)勢(shì): 1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑,無(wú)動(dòng)物源性成分,室溫穩(wěn)定。 2.高轉(zhuǎn)染效率,對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。 3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好. 圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過(guò)X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)...
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時(shí),實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案,易于針對(duì)***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能,使用微克級(jí)的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。采用Lipofectamine RNAiMA...
產(chǎn)生慢***的比較 通過(guò) LipoD293? 試劑(升級(jí)版)和 Lipofectamine LTX(LTX)試劑將三個(gè) cDNAs 共轉(zhuǎn)染進(jìn) 293T 細(xì)胞。一個(gè) GFP 載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來(lái)測(cè)定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細(xì)胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上圖)和 10 微升(下圖)。 5 天后,細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來(lái)測(cè)定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/m...