羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性,在超過350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證,尤其針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證還有一個好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷哦快去搶購吧~賽默飛提供了多種...
siRNA,加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細(xì)胞直到適當(dāng)?shù)臅r候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”,方便至極。當(dāng)然,習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細(xì)胞匯合度50%—80%進(jìn)行轉(zhuǎn)染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實(shí)驗(yàn)簡化到了***。適合多種細(xì)胞類型:HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細(xì)胞,產(chǎn)品手冊中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞...
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑 LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點(diǎn):高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細(xì)胞系對細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基 1轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細(xì)胞系圖1. LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細(xì)胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。 2細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。 連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖...
用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進(jìn)行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。 靶向敲低 在實(shí)驗(yàn)靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實(shí)現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復(fù)合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進(jìn)行評估)。 轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡單分...
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦!載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證。3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢...
轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程,是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞不開的話題。然而常常聽到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細(xì)胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細(xì)胞換液了",真所謂辛辛苦苦實(shí)驗(yàn)N多回,一夜回到解放前……眾所周知,影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多,包括細(xì)胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量、微生物污染、轉(zhuǎn)染試劑等。各種細(xì)胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同,現(xiàn)實(shí)中也并沒有一種放之四海而皆準(zhǔn)的方案。轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,超過其他RNAi試劑。上海核酸轉(zhuǎn)染試劑梯度細(xì)胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題,那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞了,轉(zhuǎn)染效...
在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供 制備大鼠的動脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評價轉(zhuǎn)染效率。 對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較 圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institu...
轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具收錄于話題轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程,是細(xì)胞生物學(xué)、基因表達(dá)和基因***實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵步驟。不同的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)差別巨大,我們可以利用化學(xué)方法或脂質(zhì)體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細(xì)胞內(nèi),也可以使用電穿孔方法利用電流在細(xì)胞膜上開孔,使核酸進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,適用于各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染。如何選擇**受信賴的可用于轉(zhuǎn)染的系統(tǒng),是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要影響因素。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。轉(zhuǎn)染試劑使用方法 .在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。 高靈活應(yīng)用, 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共...
圖3. 用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進(jìn)行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。 高效、靶向敲低 在實(shí)驗(yàn)靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果 圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實(shí)現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復(fù)合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低(使用Ta...
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要!!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦! 載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證. 質(zhì)粒細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟是...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中**常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法:生物轉(zhuǎn)染,物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用***等微生物作為基因?qū)胼d體,以慢***、腺***和腺相關(guān)***等**常見,其侵染效率可以達(dá)到90%以上,但常因安全性等問題,很多實(shí)驗(yàn)室對其敬而遠(yuǎn)之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***,無論哪一種都需要特定的設(shè)備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都很性感電轉(zhuǎn)化化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中**常用的轉(zhuǎn)染方法,主要包括兩類:陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物。其基本原理是利用陽離子的化學(xué)分子與帶有負(fù)電荷的核酸通過正負(fù)電荷作用...
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。 4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4. 用LipoFectMax? 和LipoFectamine?2000分別對小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine?2000(右圖)高5倍。 LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程 細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine?2000及...
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時,實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時,實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡便的實(shí)驗(yàn)方案,易于針對***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能,使用微克級的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢測的生物標(biāo)...
圖3. 用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進(jìn)行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。 高效、靶向敲低 在實(shí)驗(yàn)靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果 圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實(shí)現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復(fù)合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低(使用Ta...
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要?。‘?dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦! 載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證. 賽默飛提供了多種高...
十全十美難,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來實(shí)現(xiàn)。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率,細(xì)胞毒性低,操作簡單可重復(fù),價格還要可愛?,F(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑,但脂質(zhì)體對細(xì)胞毒性大,某些細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率還很低,看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面,脂質(zhì)體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領(lǐng)域的研發(fā)思路與其核酸純化領(lǐng)域的精而專,全而深不同。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過程中,另辟蹊徑,研精致思進(jìn)而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中,神奇的開辟出一塊藍(lán)海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具.湖北一次轉(zhuǎn)染...
美國Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品,單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng),所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)(顯微技術(shù))、生物技術(shù)、電子技術(shù)、護(hù)理及制藥工程等多個領(lǐng)域。起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。隨后,開拓了在病理(組織研究)應(yīng)用產(chǎn)品,使組織除了石蠟包埋外,還能夠包埋在塑料塊中;開發(fā)染料和染色劑,以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測方式。與****合作,開發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球。與美國國家**中心合作,開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品,并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn)。繼而開發(fā)出超順磁珠,用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究。.0試劑及RNAi復(fù)...
.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。 2.高靈活應(yīng)用, 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。 3.細(xì)胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。 4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。 圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。 通過LightCycler? h-HPRT Housek...
將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(3×105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFE...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時費(fèi)力的優(yōu)化工作.pei轉(zhuǎn)染試劑說明書是什么?通用型無血清轉(zhuǎn)染試劑一次加多少 簡介: X-tremeGENE HP...
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦! 載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證. 連續(xù)細(xì)胞系具有無限...
簡介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時費(fèi)力的優(yōu)化工作.我們希望把mRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)入原代細(xì)胞,那**適合的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品就是Lipofectamine Messenge...
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.轉(zhuǎn)染試劑配方轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程,是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞...
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。我們希望把mRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)入原代細(xì)胞,那**適合的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品就是Lipofectamine MessengerMAX?或是Neon電轉(zhuǎn)儀。廣東2000轉(zhuǎn)染試劑 Po...
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑..江蘇快速轉(zhuǎn)染試劑 確定希望輸送的運(yùn)載物 (如DNA、RNA或蛋白質(zhì)) 根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)類型,我們可能需要將不...
十全十美難,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來實(shí)現(xiàn)。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率,細(xì)胞毒性低,操作簡單可重復(fù),價格還要可愛?,F(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑,但脂質(zhì)體對細(xì)胞毒性大,某些細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率還很低,看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面,脂質(zhì)體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領(lǐng)域的研發(fā)思路與其核酸純化領(lǐng)域的精而專,全而深不同。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過程中,另辟蹊徑,研精致思進(jìn)而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中,神奇的開辟出一塊藍(lán)海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA...
轉(zhuǎn)染 48 小時后,使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進(jìn)行成像(左側(cè)四幅圖),A:LipoD293; B:293fectin;C:Xfect 和 D:Fugene 6. 帶有 6xHis 標(biāo)記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術(shù)實(shí)現(xiàn)分離。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進(jìn)行 Coomassie 亮藍(lán)染色(右上圖 E),道 1 為 LipoD293293、道 2 為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子、道 3 為 Xfect、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量(見右下圖 F)。產(chǎn)生慢***的比較 通過 L...
對 HepG2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較 右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細(xì)胞(在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng))。在轉(zhuǎn)染 48 小時之后,用流式細(xì)胞儀檢測 GFP 陽性細(xì)胞(%)和熒光強(qiáng)度。 左圖:血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑(升級版)對在 HepG2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞(生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上)---無血清和***,10% 血清和***的存在,轉(zhuǎn)染 5 小時后換液和不換液。 .0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進(jìn)行孵...
對 HepG2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較 右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細(xì)胞(在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng))。在轉(zhuǎn)染 48 小時之后,用流式細(xì)胞儀檢測 GFP 陽性細(xì)胞(%)和熒光強(qiáng)度。 左圖:血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑(升級版)對在 HepG2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞(生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上)---無血清和***,10% 血清和***的存在,轉(zhuǎn)染 5 小時后換液和不換液。 MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.北京磷酸鈣轉(zhuǎn)染...