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胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦!
載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證. pei轉(zhuǎn)染試劑說明書主要內(nèi)容是什么?上海動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑類型
.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。
高靈活應(yīng)用, 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。
兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑購買世界上低價的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑PEI,這里有**詳細(xì)的操作步驟!
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時,實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時,實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡便的實(shí)驗(yàn)方案,易于針對***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能,使用微克級的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。
在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制備大鼠的動脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評價轉(zhuǎn)染效率。
對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)的 Lyn Gao 博士友情提供
轉(zhuǎn)染試劑快速查找工具上線!
確定希望輸送的運(yùn)載物
(如DNA、RNA或蛋白質(zhì))
根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)類型,我們可能需要將不同的運(yùn)載物輸送到細(xì)胞內(nèi)部,包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。
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希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型
轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。
連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。 帶你了解性價比比較高的轉(zhuǎn)染試劑-PEI轉(zhuǎn)染.上海pei轉(zhuǎn)染試劑報價
將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.上海動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑類型
細(xì)胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題,那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞了,轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率,那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時就是至關(guān)重要了!在這里給大家推薦一款性價比超高的轉(zhuǎn)染試劑,美國Polysciences家的PEIMAX40K!PEIMAX40K(也稱為游離堿PEI22K)是一種功能強(qiáng)大,值得信賴且經(jīng)濟(jì)高效的瞬時轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中,能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達(dá)。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑,以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑,使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達(dá)40%左右。ThomasM,etal(2005)研究數(shù)據(jù)表明,去乙?;腜EI40000(PolyethylenimineMAX40000)體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍,小鼠體內(nèi)靶向效率達(dá)到10000倍,隨之肺部特異療效顯示增強(qiáng)1500倍。上海動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑類型
上海儒安生物科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。是一家有限責(zé)任公司企業(yè),隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求,與多家企業(yè)合作研究,在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進(jìn),追求新型,在強(qiáng)化內(nèi)部管理,完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時,良好的質(zhì)量、合理的價格、完善的服務(wù),在業(yè)界受到寬泛好評。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體,價格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。上海儒安生物科技順應(yīng)時代發(fā)展和市場需求,通過**技術(shù),力圖保證高規(guī)格高質(zhì)量的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體。