希望本期的分享能夠為您的細胞培養(yǎng)過程提供凍存方面的幫助,同時我公司也能為您提供凍存液等凍存相關(guān)產(chǎn)品,與成熟的實驗技術(shù)指導(dǎo),非常感謝您的支持!產(chǎn)品訂購信息:品牌貨號產(chǎn)品描述包裝OriGenCP-70USP級**DMSO二甲基亞砜,CE、USP、EP認(rèn)證70mL/瓶,6瓶/盒OriGenCP-10USP級**DMSO二甲基亞砜10mL/瓶,12瓶/盒OriGenCD-100DMSO/Dextran/remainderwater55%二甲基亞砜,5%右旋糖酐40混合液,CE、USP、EP認(rèn)證100mL/瓶,6瓶/盒OriGenCD-50DMSO/Dextran/remainderwater在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分重要的。細胞凍存液配比
如果將細胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長,細胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞,細胞便發(fā)生滲漏,在復(fù)溫時,大量水分會因此進入細胞內(nèi),造成細胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。當(dāng)溫度進一步下降,細胞內(nèi)外都結(jié)冰,產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結(jié)合,從而降低冰點,減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,使細胞免受溶質(zhì)損傷,細胞得以在很低溫條件下保存細胞凍存液配比細胞凍存液常用比例是多少?
凍存細胞類型:臍血及臍帶組織、外周血、間充質(zhì)干細胞、多能干細胞、組織樣本等①用于減輕冷凍和解凍復(fù)蘇期間由溫度引起的分子應(yīng)激反應(yīng)②分別以2%、5%或10%USP級的二甲基亞砜(DMSO)預(yù)先配制即用型細胞凍存液凍存細胞類型:臍血及臍帶組織、外周血和骨髓①BloodStor®55-5以55%(重量/體積)的DMSO(USP)級、5%(重量/體積)的葡萄糖-40(USP)級和注射液(WFI)級別的水預(yù)先配制②BloodStor®100含有**(重量/體積)的DMSO(USP級)
3、步驟:(1)冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數(shù)生長期。(2)配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。(3)離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。(4)取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO***濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示完全之冷凍保存管中,1~2ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后,注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。無血清快速細胞凍存液,是一種新型開發(fā)的快速凍存細胞的保護液.
根據(jù)細胞培養(yǎng)皿的大小加入適量細胞培養(yǎng)基后進行細胞常規(guī)培養(yǎng)。保存條件:4℃保存,有效期一年。若長不用可凍存于-20℃,有效期三年。產(chǎn)品質(zhì)量:無血清細胞凍存液經(jīng)過嚴(yán)格的內(nèi),滲透壓,pH檢測,并經(jīng)過0.1um濾膜過濾,確保產(chǎn)品不含有細菌,支原體等污染。注意事項:1.請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存,由于DMSO對細胞有一定的損傷,凍存細胞分裝后應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱,減少在室溫存放時間。如遇特殊情況,可先短暫放置于4℃并盡快轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術(shù)手段。即用型細胞凍存液保質(zhì)期多久
復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化.細胞凍存液配比
在復(fù)蘇時,一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內(nèi)即恢復(fù)到常溫,細胞內(nèi)外不會重新形成較大的冰晶,也不會暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過長的時間,從而無冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生,凍存的細胞經(jīng)復(fù)蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能。冷凍保護劑對細胞的冷凍保護效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復(fù)溫速率有關(guān)。而且不同的冷凍保護劑其冷凍保護效果也不一樣諾為生物所提供的STEMCELLTechnologiescGMP級別、無血清的細胞凍存液可使長期儲存的細胞保持高存活率,可應(yīng)用于臨床細胞和特殊珍貴細胞的凍存。細胞凍存液配比
上海儒安生物科技有限公司擁有從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用爆炸物品、易制毒化學(xué)品)、實驗窒設(shè)備的銷售。等多項業(yè)務(wù),主營業(yè)務(wù)涵蓋細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體。公司目前擁有專業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺與成長空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),深受員工與客戶好評。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營宗旨,深受客戶好評。公司深耕細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領(lǐng)域拓展。