安徽動物組織外泌體分離

來源: 發(fā)布時間:2022-01-18

外泌體作為疾病診斷標志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破,要將其用于臨床治理,外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)面臨很大的挑戰(zhàn)。外泌體(exosome)是細胞分泌囊泡(extracellularvesicles)的一種亞型,存在于生物體液中,并參與多種生理和病理過程。外泌體被認為是細胞間通信的一種新機制,允許細胞交換蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和遺傳物質(zhì)。過去,細胞分泌的外泌體一度被認為只是參與廢物排泄;現(xiàn)在,隨著高通量蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)的發(fā)展,外泌體被寬泛認為是生物體內(nèi)細胞間短距離和長距離交流的高度保守的途徑,這種細胞間通信對于正常細胞和瘤細胞都是非常重要的。外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域均起著重要的作用,并且可以作為很好靶向給藥系統(tǒng)。安徽動物組織外泌體分離

有研究表明外泌體通過喚醒瘤相關(guān)信號通路、誘導(dǎo)免疫耐受、重塑細胞外基質(zhì)、增強瘤細胞侵襲性和調(diào)控瘤微環(huán)境促進瘤的發(fā)生和發(fā)展,外泌體在瘤的診斷上有諸多優(yōu)勢:外泌體可保護其中的核酸類物質(zhì),防止其迅速降解;外泌體的形成與親源細胞的狀態(tài)密切相關(guān);針對外泌體內(nèi)容物的檢測比傳統(tǒng)的瘤標志物更具有特異性;外泌體寬泛存在于多種體液樣本中,以其為基礎(chǔ)的瘤診斷可在病情發(fā)展過程中及時監(jiān)測分子標志物的變化,這種檢測更易監(jiān)控且樣本更易收集。北京海洋動物組織外泌體分離外泌體作為細胞間信號傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。

目前的主流觀點認為,外泌體的產(chǎn)生過程為:細胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicular bodies,MVB),后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體早見于1981年,EG Trams 等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為 exosome。對于外泌體的作用,當(dāng)時推測為細胞排泄廢物的一種方式。1996年G Raposo 等發(fā)現(xiàn)類似于B 淋巴細胞的免疫細胞也會分泌抗原呈遞外泌體(antigen presenting vesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+ 細胞的抗種瘤反應(yīng)。2007 年H Valadi 等進一步發(fā)現(xiàn)細胞之間可以通過外泌體中RNA 交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細胞分化、種瘤生長于侵襲等各種生物過程中。

各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達,由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞,期望開發(fā)利用該特征的新型DDS。外泌體在體液中十分穩(wěn)定,同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解。另外在從體液中提取外泌體后,體液可長期穩(wěn)定保存,因此外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測出,特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體,其與正常細胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目,并作為癥狀早期診斷技術(shù),應(yīng)用于與癥狀進展相關(guān)的研究。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟、前列腺疾病、膀胱疾病的新型診斷標記,髓液中的外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標記物。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體。

過細胞分泌到外泌體中的分子引起的。其中已發(fā)現(xiàn)外泌體內(nèi)含有分泌細胞來源mRNA和miRNA,外泌體與細胞間遺傳基因表達信息的水平傳播相關(guān)性倍受矚目。這些RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所保護,不會被核糖核酸酶所分解,可以在血液和體液中穩(wěn)定存在。被靶細胞吞噬的外泌體通過與內(nèi)體膜融合,將RNA釋放到靶細胞的細胞質(zhì)中。釋放出來的mRNA翻譯為蛋白質(zhì),但miRNA壓制目的基因的翻譯,因此外泌體在靶細胞內(nèi)控制基因的表達。外泌體的蛋白質(zhì)有數(shù)萬種,mRNA、miRNA的種類有數(shù)千種以上,它們的結(jié)構(gòu)除了受細胞來源不同的影響,還受到細胞狀態(tài)不同的影響。外泌體在化療藥物的促轉(zhuǎn)移過程中具有重要的作用。廣東海洋生物組織外泌體Western blot檢測

干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。安徽動物組織外泌體分離

人體內(nèi)多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,包括干細胞、免疫細胞、內(nèi)皮細胞、血小板及平滑肌細胞等。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中。雙層膜保護外泌體的內(nèi)容物,使外泌體能夠在組織中長距離移動。干細胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用,有望成為“無細胞的細胞治理”工具。干細胞來源的外泌體可通過囊泡,將干細胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì),打包運出干細胞體外。通過“細胞間高速公路”來“快遞”到人體各個組織內(nèi)。安徽動物組織外泌體分離