湖北植物外泌體western blot

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-14

外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。同時(shí),外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)種瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)有哪些?l exoRBase數(shù)據(jù)庫(kù)收集和描述人類血液外泌體中所有長(zhǎng)的RNA,包括circRNA、lncRNA和mRNA。l EVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫(kù)匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。l ExoCarta數(shù)據(jù)庫(kù)主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個(gè)物種的286個(gè)研究結(jié)果,涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。隨著EV研究倍受世界矚目,各國(guó)啟動(dòng)了大型研究項(xiàng)目。湖北植物外泌體western blot

已經(jīng)有許多關(guān)于外泌體作用的報(bào)導(dǎo),根據(jù)這些現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)中,從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制,通過(guò)促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制,分析會(huì)引起何種生理作用,這是進(jìn)一步研究的發(fā)展方向。甚至活內(nèi)的外泌體動(dòng)態(tài)(哪個(gè)外泌體遷移至何處)也會(huì)成為今后需要努力研究的重要課題。實(shí)際上,用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體,其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較, PS親和法提取的外泌體,其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上,幾乎沒有混入外泌體以外的蛋白,回收量高,操作重復(fù)性好。北京外泌體粒徑檢測(cè)外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成。

外泌體是在研究網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟過(guò)程中被Johnstone等人發(fā)現(xiàn)并命名的。外泌體是一種球形的納米級(jí)細(xì)胞外囊泡,直徑30~100nm,密度1.13~1.19g/ml。在生理和病理?xiàng)l件下,外泌體都可以被一些細(xì)胞以胞吐的方式所釋放,如:免疫細(xì)胞、干細(xì)胞、種瘤細(xì)胞,并且其普遍分布于各種體液中,如:尿液、唾液、血液、羊水、腦脊液及病理性腹水等,同時(shí),由于其起源于相應(yīng)的母細(xì)胞,故種瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體有望成為一種全新的非傾入性檢查替代以往的組織活檢技術(shù)。

近年來(lái),高通量質(zhì)譜分析被普遍地應(yīng)用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究,這為我們揭示了更多具有生物標(biāo)志物價(jià)值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術(shù)研究了431例肺病患者和150例對(duì)照者血漿外泌體中的蛋白表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達(dá)不只能區(qū)分種瘤與正常組織,同時(shí)也能區(qū)分各種肺病的組織亞型。此外,聯(lián)合應(yīng)用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達(dá)到0.74。Clark等采用納升液聯(lián)用技術(shù)(nano-ESI-LC-MS/MS)分析了來(lái)自正常支氣管上皮細(xì)胞系和兩個(gè)攜帶NSCLC細(xì)胞系的外泌體的蛋白表達(dá)譜,從中篩選出如細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達(dá)的蛋白,同時(shí)檢測(cè)分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性。外泌體研究相對(duì)困難,需要盡快開發(fā)操作簡(jiǎn)單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。

外泌體中這些物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與它們?cè)诜置诩?xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)不同,所以可能存在一種外泌體特異蛋白和mRNA/miRNA在外泌體內(nèi)選擇性積累的機(jī)制。這種特異性可將外泌體內(nèi)的RNA作為生物標(biāo)記,更進(jìn)一步作為醫(yī)治開發(fā)方法的靶點(diǎn)。外泌體中的mRNA一旦被靶細(xì)胞吞噬,能夠引起這個(gè)細(xì)胞內(nèi)的功能性蛋白的表達(dá),但外泌體中多數(shù)的miRNA是前體而非功能性miRNA,這些miRNA起著何種生理性意義,學(xué)者們正在研究。由于外泌體含有各種蛋白質(zhì)、RNA和脂質(zhì),研究人員正將其進(jìn)行細(xì)胞分類,建立數(shù)據(jù)庫(kù)(ExoCarta)。此外,在世界各地分別進(jìn)行著運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和系統(tǒng)生物學(xué)的大規(guī)模分析工作,而FunRich的EV plugin作為一種通用的分析手段已被公布出來(lái)。今后,在推進(jìn)外泌體研究方面,各領(lǐng)域的研究人員信息共享至關(guān)重要。外泌體可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。湖北血清外泌體示蹤

外泌體其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較。湖北植物外泌體western blot

過(guò)細(xì)胞分泌到外泌體中的分子引起的。其中已發(fā)現(xiàn)外泌體內(nèi)含有分泌細(xì)胞來(lái)源mRNA和miRNA,外泌體與細(xì)胞間遺傳基因表達(dá)信息的水平傳播相關(guān)性倍受矚目。這些RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所保護(hù),不會(huì)被核糖核酸酶所分解,可以在血液和體液中穩(wěn)定存在。被靶細(xì)胞吞噬的外泌體通過(guò)與內(nèi)體膜融合,將RNA釋放到靶細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。釋放出來(lái)的mRNA翻譯為蛋白質(zhì),但miRNA壓制目的基因的翻譯,因此外泌體在靶細(xì)胞內(nèi)控制基因的表達(dá)。外泌體的蛋白質(zhì)有數(shù)萬(wàn)種,mRNA、miRNA的種類有數(shù)千種以上,它們的結(jié)構(gòu)除了受細(xì)胞來(lái)源不同的影響,還受到細(xì)胞狀態(tài)不同的影響。湖北植物外泌體western blot