近年來眾多文獻報道,肺病細胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質并促進肺病的發(fā)發(fā)展,是早期診斷肺病的有效途徑。有研究發(fā)現,NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%,而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%,因而認為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標志物。Park等通過Sys-BodyFlu-id數據庫分析發(fā)現153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質,進一步的Western blotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號傳導途徑以促進種瘤的發(fā)發(fā)展,因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學標記物。外泌體分析會引起何種生理作用,這是進一步研究的發(fā)展方向。黑龍江血漿外泌體示蹤
外泌體(Exosome)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質雙分子層結構;存在于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;外泌體攜帶有多種蛋白質、脂類、RNA等重要信息,不只在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。外泌體(Exosomes)是細胞分泌到胞外的一種囊泡(Extracellular Vesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層膜結構和茶托狀形態(tài),含有豐富的內含物(包括核酸、蛋白和脂質等),參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,包括血液、林巴液、唾液、尿液、、乳汁等,同時也存在于組織樣本中,如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。黑龍江細胞外泌體透射電鏡檢測科學家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能。
泌體是細胞內源性的小囊泡,由大多數細胞分泌。在抗原呈遞細胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后,人們對外泌體的興趣增強,并且觀察到它們可以在體內刺激免疫應答。在過去幾年中,有幾個實驗室報道了各種細胞類型的外泌體分泌,并討論了其潛在的生物學功能。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質,總結了其生物學效應,特別是免疫系統(tǒng),討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內源性和質膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式,作為膜和細胞溶質蛋白、脂質和RNA細胞之間傳遞的載體。然而,我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內生理相關性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。
外泌體mirRNA和蛋白質被認為是NSCLC的預后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發(fā)現,外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現,NY-ESO-1是單獨對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內的365種miRNA,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調,進一步研究發(fā)現,let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關。目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。
幾乎所有類型的細胞都可以分泌外泌體,同時外泌體也普遍存在于體液中,包括血液、眼淚、尿液、唾液、乳汁、腹水等。目前研究發(fā)現外泌體中富含核酸(microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA等)、蛋白、膽固醇等。外泌體的表面marker主要有CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27等。目前對于外泌體的鑒定主要有四種方法:透射電子顯微鏡(TEM)、Nanosight、Western Blot、流式細胞術。近年來,隨著外泌體研究的不斷深入,它的應用已經涉及種瘤醫(yī)治領域、醫(yī)學基礎和免疫領域、寄生蟲領域;臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內分泌代謝系統(tǒng)等。有望將外泌體應用在各種疾病醫(yī)治上。腹膜透析液外泌體染色
外泌體又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達水平的標記蛋白。黑龍江血漿外泌體示蹤
膜封閉的囊泡釋放到周圍環(huán)境中已經成為近幾年來越來越受關注的問題。令人信服的證據表明囊泡可交換復雜的信息有助于這種興趣的興起。但是,也已經清楚,不同類型的分泌囊泡共存,具有不同的細胞內起源和形成模式,因此可能具有不同的組成和功能。外泌體是分泌囊泡的一種亞型。它們在真核細胞內的多泡小體中形成,并且當這些多泡小體與質膜融合時分泌到細胞外。有趣的是,不同的分子家族已被證明參與細胞內形成外泌體及其隨后的分泌,這表明即使在外泌體中也存在不同的亞型。黑龍江血漿外泌體示蹤