外泌體(Exosome)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);存在于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;外泌體攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、RNA等重要信息,不只在細胞與細胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。外泌體(Exosomes)是細胞分泌到胞外的一種囊泡(Extracellular Vesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等),參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,包括血液、林巴液、唾液、尿液、、乳汁等,同時也存在于組織樣本中,如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測出,特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體。福建腹膜透析液外泌體染色PKH67/PKH26
Aqil等在進行裸鼠實驗時發(fā)現(xiàn),加載至外泌體中的雷公藤紅素(Exo-CEL)比普通的CEL有更強的抗種瘤功效,且在小鼠中未發(fā)現(xiàn)明顯全身性或系統(tǒng)性毒性,由此可以證明,外泌體制劑可以有效增強CEL功效并降低與劑量有關(guān)的毒性。到目前為止,外泌體在肺病醫(yī)治方面的研究主要集中于免疫壓制,有效的外泌體藥物遞送平臺的搭建以及外泌體相關(guān)的潛在醫(yī)治靶點的探索。已有的研究表明外泌體在肺病醫(yī)治領(lǐng)域有著廣闊的前景,期待外泌體在肺病醫(yī)治領(lǐng)域早日得到突破,造福更多的患者。血液外泌體染色從癥狀患者樹突狀細胞釋放的外泌體中,含有各種癥狀細胞來源的蛋白質(zhì)。
外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時發(fā)現(xiàn),外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),NY-ESO-1是單獨對低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào),進一步研究發(fā)現(xiàn),let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。
過細胞分泌到外泌體中的分子引起的。其中已發(fā)現(xiàn)外泌體內(nèi)含有分泌細胞來源mRNA和miRNA,外泌體與細胞間遺傳基因表達信息的水平傳播相關(guān)性倍受矚目。這些RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所保護,不會被核糖核酸酶所分解,可以在血液和體液中穩(wěn)定存在。被靶細胞吞噬的外泌體通過與內(nèi)體膜融合,將RNA釋放到靶細胞的細胞質(zhì)中。釋放出來的mRNA翻譯為蛋白質(zhì),但miRNA壓制目的基因的翻譯,因此外泌體在靶細胞內(nèi)控制基因的表達。外泌體的蛋白質(zhì)有數(shù)萬種,mRNA、miRNA的種類有數(shù)千種以上,它們的結(jié)構(gòu)除了受細胞來源不同的影響,還受到細胞狀態(tài)不同的影響。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。
l 親脂染料標(biāo)記外泌體:目前已發(fā)表的外泌體文章中,外泌體大多使用親脂性染料進行標(biāo)記,體內(nèi)和體外都有較多應(yīng)用。親脂性染料主要分為兩大類,一類是PKH67(綠色熒光)/PKH26(紅色熒光),由于它們可以與外泌體的脂質(zhì)雙層膜穩(wěn)定結(jié)合,所以染色效果較好,應(yīng)用較普遍。第二類是Di系列的親脂性染料,包括DiI(橙色熒光)、DiO(綠色熒光)、DiD(紅色熒光)、DiR(深紅色熒光)。其中DiR的紅外熒光可穿透細胞和組織,在活成像中用來示蹤。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,包括血液、唾液、尿液、乳汁等。血液外泌體染色
癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關(guān)的分子。福建腹膜透析液外泌體染色PKH67/PKH26
理論上,所有促進肺病細胞分泌外泌體的機制都可以被用來作為肺病醫(yī)治的潛在靶點,但目前關(guān)于其可行性的研究還比較少。有研究表明,種瘤來源的外泌體對種瘤免疫的調(diào)控具有一定的影響作用,包括免疫壓制和免疫開啟兩個方面。Romagnoli等研究發(fā)現(xiàn),肺病細胞可以刺激樹突狀細胞等抗原提呈細胞產(chǎn)生攜帶特異抗原的外泌體,這些外泌體可以遷移到區(qū)域淋巴結(jié),進而開啟CD4+T與CD8+T細胞產(chǎn)生抗種瘤免疫反應(yīng),進而壓制種瘤生長。Besse等研究發(fā)現(xiàn),在晚期NSCLC患者中,裝載有IFN-γ,MHC I和MHCⅡ限制抗原的樹突狀細胞外泌體增強了NK細胞的抗種瘤免疫功能,研究證實外泌體參與相關(guān)種瘤生理病理過程,在NSCLC免疫醫(yī)治中有著重要的臨床應(yīng)用價值,為NSCLC的醫(yī)治打開了新的視野。福建腹膜透析液外泌體染色PKH67/PKH26