l 納米顆粒追隨分析法：簡稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度快，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。l Western blot分子標志物檢測：外泌體標志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；細胞質(zhì)蛋白，如肌動蛋白（Actin）和鈣磷脂結(jié)合蛋白（Annexins）；參與生物功能的分子，如凋亡轉(zhuǎn)接基因2互作蛋白X（ALIX）、種瘤易感基因101蛋白（TSG101）、熱休克蛋白（HSP70、HSP90），以及細胞分泌的特異性蛋白。外泌體內(nèi)含有與細胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)和核酸，可以運輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等進入受體細胞，參與細胞間通訊。不同細胞來源的外泌體所含有的蛋白成分和RNA不太相同，可作為多種疾病的早期診斷標記物，也能作為靶向藥物的載體進行疾病醫(yī)治。外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運融合蛋白annexins、RAN、GTPases。浙江體液外泌體提取
外泌體中這些物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與它們在分泌細胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)不同，所以可能存在一種外泌體特異蛋白和mRNA/miRNA在外泌體內(nèi)選擇性積累的機制。這種特異性可將外泌體內(nèi)的RNA作為生物標記，更進一步作為醫(yī)治開發(fā)方法的靶點。外泌體中的mRNA一旦被靶細胞吞噬，能夠引起這個細胞內(nèi)的功能性蛋白的表達，但外泌體中多數(shù)的miRNA是前體而非功能性miRNA，這些miRNA起著何種生理性意義，學者們正在研究。由于外泌體含有各種蛋白質(zhì)、RNA和脂質(zhì)，研究人員正將其進行細胞分類，建立數(shù)據(jù)庫（ExoCarta）。此外，在世界各地分別進行著運用蛋白質(zhì)組學、轉(zhuǎn)錄組學和系統(tǒng)生物學的大規(guī)模分析工作，而FunRich的EV plugin作為一種通用的分析手段已被公布出來。今后，在推進外泌體研究方面，各領(lǐng)域的研究人員信息共享至關(guān)重要。鼻腔灌洗液外泌體label free外泌體作為細胞間信號傳導的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。
外泌體作為藥物遞送載體較以往的合成系統(tǒng)具有多方面的優(yōu)勢，比如：人工遞送載體具有更低的免疫原性，其含有的磷脂雙分子層可與靶細胞細胞膜融合，從而避廉價核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬作用。Srivastava等開發(fā)了一種基于外泌體-金奈米粒子（Exo-GNP）的藥物遞送系統(tǒng)—“nanosomes”用于肺病的醫(yī)治，研究表明該系統(tǒng)與單用多柔比星醫(yī)治相比，前者的多柔比星釋放量增加、攝取率提高、化療毒性降低且化療效果增強。此外，還有研究發(fā)現(xiàn)，使用外泌體運載紫杉醇（PTX）可顯著提高病細胞對PTX的吸收，將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性，Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。
腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進行消化，經(jīng)水浴、反復輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程，包括除雜、濾膜過濾、超離等。后用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追隨分子（NTA）和marker WB鑒定。所有的細胞都能分泌外泌體，但是不同細胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral、ARF6、PLD2、RAB家族。
目前外科手術(shù)仍是肺病醫(yī)治的有效方法，但術(shù)后復發(fā)率很高，而傳統(tǒng)放化療對肺病的醫(yī)治效果又極其有限。因此，肺病醫(yī)治的新模式受到廣大研究者的關(guān)注，已有大量研究證明外泌體在肺病醫(yī)治中有廣闊的應用前景。外泌體作為細胞間通訊的一種形式，在肺病的進程中具有重要作用，因此，控制外泌體的分泌可能成為醫(yī)治肺病的潛在靶點。據(jù)相關(guān)報道稱，EPI64可以通過開啟特異的和Rab27A來控制A549肺病細胞的外泌體分泌，提示EPI64可以作為醫(yī)治的潛在靶點。此外，CD9、CD63、HSP90和HSP70在外泌體中富集，從而上調(diào)主要組織相容性復合物Ⅱ類分子表達水平，顯著促進CD4+T細胞的增殖，通過免疫途徑壓制種瘤。各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達，由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞。鼻腔灌洗液外泌體label free
通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預測腫細胞轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標。浙江體液外泌體提取
肺病細胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激種瘤血管的形成來促進種瘤的生長。據(jù)相關(guān)報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進種瘤血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過開啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加，促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。浙江體液外泌體提取