外泌體載藥系統(tǒng)的性質(zhì)評(píng)估：1對(duì)外泌體進(jìn)行一般性質(zhì)評(píng)估的方法已有多種，包括納米顆粒跟蹤分析技術(shù)(NTA)、動(dòng)態(tài)光散射(DLS)、流式細(xì)胞術(shù)、原子力顯微技術(shù)(AFM)、透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM)等。2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：將載藥外泌體添加到相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，通過培養(yǎng)觀察、檢測(cè)表達(dá)物或統(tǒng)計(jì)細(xì)胞凋亡率來驗(yàn)證載藥外泌體與靶細(xì)胞的親和力、藥理作用并分析其作用機(jī)制。3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：不jin可驗(yàn)證載藥外泌體的體內(nèi)藥理作用，還可研究其全部或部分藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)比較，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)考慮內(nèi)環(huán)境、體溫、免疫qing除等各種因素對(duì)載藥外泌體的影響，同時(shí)還考慮個(gè)體差異的影響，從而得出更句臨床意義的結(jié)論。外泌體內(nèi)源性載yao方式即先將藥物載入供體細(xì)胞中，當(dāng)藥物分選進(jìn)入外泌體并釋放外泌體后分離純化而獲。上海組織外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用
小分子siRNA、miRNA常作為基因zhiliao的核酸藥物，但其穩(wěn)定性差，極易被體內(nèi)的酶降解，限制了它在臨床中的運(yùn)用。而外泌體的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)可以保護(hù)基因類藥物，避免其降解。其次，外泌體能通過膜融合的方式直接將包載的基因類藥物釋放到受體細(xì)胞中，實(shí)現(xiàn)更高的投遞效率。許多研究證明外泌體能成功遞送小分子siRNA、miRNA。通過體外實(shí)驗(yàn)證明，來源于血漿的外泌體可以有效地傳遞siRNA到單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，使MAKP1基因沉默。利用類似的方法遞送RAD51- siRNA和RAD52－siRNA到HELA細(xì)胞和纖維素肉瘤細(xì)胞中從而誘導(dǎo)兩個(gè)基因的沉默，研究證明RAD51基因的沉默可以造成中流細(xì)胞大量的凋亡，因而通過外泌體負(fù)載siRNA用于中流疾病方面的zhiliao句有廣闊的前景。浙江外泌體載藥rna的綜述分泌作為藥物載體的外泌體的母代細(xì)胞主要有干細(xì)胞類、中流細(xì)胞類、樹突細(xì)胞類以及其他細(xì)胞(HEK293細(xì)胞)。
甲狀腺ai（thyroidcarcinoma）是一種常見的內(nèi)分泌惡性中流。在甲狀腺ai的所有亞型中，甲狀腺未分化ai（ATC）的惡性程度很高。目前ATC缺乏有效的zhiliao藥物，屬于難治性惡性中流疾病，傳統(tǒng)的放化療療效差，分子靶向藥物jin對(duì)部分基因突變型ATC有效。硬脂酞輔酶A去飽和酶1（stearoyl-CoAdesat urase1，SCD1）是一種脂肪酸合成和代謝的關(guān)鍵調(diào)節(jié)分子，也是催化飽和脂肪酸向單不飽和脂肪酸轉(zhuǎn)變的限速酶，參與細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等多種生理過程。為研究SCD1與ATC的關(guān)系，通過構(gòu)建鑒定靶向SCD-1的小干擾RNA（siRNA）外泌體，分析以外泌體為載體的靶向SCD-1的RNAi基因zhiliao對(duì)ATC細(xì)胞存活的影響。細(xì)胞存活實(shí)驗(yàn)證明SCD-1-siRNA外泌體可抑制ATC細(xì)胞的存活，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。這一結(jié)果說明SCD-1-siRNA外泌體具有zhiliaoATC的巨大潛力。
外泌體的小尺寸和輕微的負(fù)ZETA電位賦予了它們特殊的體內(nèi)特性，如增強(qiáng)滲透性和保留率（EPR）。EV的免疫監(jiān)測(cè)特性也引起了人們對(duì)基于免疫療法的藥物遞送系統(tǒng)（DDSs）的極大關(guān)注。因此，從材料的角度來看，外泌體是一種自然形成的納米載體，將功能貨物包裹在磷脂雙分子層囊泡中，引起了人們對(duì)生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用的關(guān)注。外泌體已經(jīng)證明了它們克服其他基于納米顆粒的相關(guān)限制和不足。除了物理化學(xué)性質(zhì)外，外泌體還表現(xiàn)出更快的內(nèi)化進(jìn)入細(xì)胞、更長的循環(huán)半衰期、以及與理想配體的額外功能。這些優(yōu)勢(shì)可以進(jìn)一步擴(kuò)展它們?cè)诩{米生物學(xué)和臨床應(yīng)用中的作用。通過外泌體傳遞藥物的方法已經(jīng)得到了很多試驗(yàn)，研究策略要么改變了它們的表面修飾、要么制造混合納米囊泡。由于其納米級(jí)尺寸，外泌體有可能改善抗ai診治和藥物輸送。使用基因或非基因修飾的外泌體可以增強(qiáng)化療藥物的細(xì)胞毒性和靶向性。 裝載紫杉醇的外泌體可有效抑制胰腺ai細(xì)胞的增殖。
電穿孔法時(shí)外泌體載藥的方法的一種，因參數(shù)容易控制,多種藥物載入外泌體都可以使用該方法。Wang等人研究了胞外囊泡作為小RNA的靶向遞送系統(tǒng),利用電穿孔法將siRNA/microRNA載入核酸適配體AS1411(AS1411是一種靶向中流細(xì)胞高表達(dá)核仁素的核酸適配體)修飾的囊泡中,然后通過外泌體將siRNA/microRNA靶向遞送到乳腺ai組織。由于AS1411和核仁素的的結(jié)合達(dá)到瘤靶向(核仁素在乳腺ai細(xì)胞表面高表達(dá)),這種靶向let-7miRNA的囊泡可在體外傳遞到人乳腺aiMDA-MB-231細(xì)胞。靜脈注射載有Cy5熒光標(biāo)記的miRNAlet-7的AS1411囊泡,可以選擇性靶向荷瘤小鼠中的中流部位,并抑制中流的生長,而且修飾的囊泡耐受性良好,沒有顯示明顯的非特異性副作用或免疫應(yīng)答反應(yīng)。外泌體已開發(fā)作為多種藥物的載體，主要包括抗中流藥物類、kang炎藥物類、基因類及蛋白類等其他類型藥物。浙江外泌體載藥rna的綜述
連翹酯苷A制備成外泌體載藥系統(tǒng)可明顯提高其體外抗中流細(xì)胞轉(zhuǎn)移的能力。上海組織外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用
利用外泌體進(jìn)行體內(nèi)藥物遞送時(shí)必須考慮以下因素：①外泌體和細(xì)胞之間相互作用的模式是否與所遞送的zhiliao劑作用機(jī)制一致，是否會(huì)對(duì)所遞送的zhiliao劑功效有所影響；②外泌體廣fan參與了機(jī)體的生物過程，大量的外源性外泌體的存在可能會(huì)破壞內(nèi)源性外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊；③一些尚不明了甚至未知的機(jī)制可能會(huì)導(dǎo)致不良副作用，如外泌體表面蛋白質(zhì)的脫靶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，還有其他如ai基因和病毒miRNA，或朊病毒顆粒以及外泌體純化過程中未能去除的可溶性顆粒因子等物質(zhì)在外泌體中一起遞送，均有可能產(chǎn)生不良副作用。提示純化方案中采用嚴(yán)格的質(zhì)控與安全性分析使這些復(fù)雜的影響因素小化，對(duì)體內(nèi)和體外研究至關(guān)重要。上海組織外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用
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