干細(xì)胞外泌體示蹤

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-02-18

從體液中高精度分離小細(xì)胞外囊泡 (sEV) 對(duì)于開(kāi)發(fā)下一代液體活檢和再生療法至關(guān)重要。然而,目前的 sEV 分離方法需要專門(mén)的設(shè)備和耗時(shí)的協(xié)議,并且難以產(chǎn)生高純度的 sEV 亞群。在這里,我們介紹了通過(guò)波柱激發(fā)共振 (ANSWER) 進(jìn)行的聲學(xué)納米級(jí)分離,它允許單步、快速(<10 分鐘)、高純度(>96% 小外泌體,>80% 外泌體)分離來(lái)自無(wú)需任何樣品預(yù)處理的體液樣品。粒子通過(guò)激發(fā)共振以尺寸選擇性的方式迭代偏轉(zhuǎn)。這種以前未發(fā)現(xiàn)的現(xiàn)象使用表面聲波在流體中產(chǎn)生虛擬的、可調(diào)諧的柱狀聲場(chǎng)模式。無(wú)需樣品預(yù)處理或復(fù)雜納米制造方法的高精度 sEV 分離已使用 ANSWER 進(jìn)行了證明,顯示出作為強(qiáng)大工具的潛力,可以對(duì) sEV 亞群的復(fù)雜性、異質(zhì)性和功能進(jìn)行更深入的研究。外泌體大小不均的原因可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,導(dǎo)致流體和固體的總含量不同。干細(xì)胞外泌體示蹤

    細(xì)胞外囊泡(EV)在臨床診治診斷學(xué)中有多種應(yīng)用。然而,目前分離等離子EV的技術(shù)存在繁瑣的程序和有限的產(chǎn)量。在此,我們報(bào)告了一種快速高效的EV分離平臺(tái),即EV-FISHER,它由具有可裂解脂質(zhì)探針(PO43--spacer-DNA-cholesterol,PSDC)的金屬有機(jī)框架構(gòu)成。EV-FISHER通過(guò)膽固醇從血漿中誘捕EV,并用普通離心機(jī)將它們分離。捕獲的EV可以在隨后被脫氧核糖核酸酶I切割PSDC時(shí)釋放和收集。我們得出結(jié)論,EV-FISHER在時(shí)間(-0分鐘對(duì)240分鐘)、分離效率(對(duì)),以及分離要求(12,800g對(duì)135,000g)方面具有優(yōu)勢(shì)。除了在血漿中的穩(wěn)定性外,EV-FISHER還表現(xiàn)出與下游單EV流式細(xì)胞儀的良好兼容性,能夠鑒定glypican-1(GPC-1)EVs用于早期診斷、臨床分期和療效評(píng)估。這項(xiàng)工作描繪了一種有效的策略,可以將EV從復(fù)雜的生物流體中分離出來(lái),具有促進(jìn)基于EV的診治診斷學(xué)的潛力。 干細(xì)胞外泌體示蹤從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物,可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。

    細(xì)胞外泌體(EV)被認(rèn)為是用于各種基因診療的有前途的運(yùn)載工具。它們是相對(duì)惰性的、非免疫原性的、可生物降解的和生物相容的。至少在嚙齒動(dòng)物中,它們甚至可以通過(guò)具有挑戰(zhàn)性的身體障礙,例如血腦屏障。EV可以設(shè)計(jì)為攜帶和遞送診療分子,如蛋白質(zhì)和RNA。因此,EV正在成為一種體內(nèi)基因診療載體。近日,MolTher雜志上發(fā)表一篇文章,對(duì)EV作為遞送載體的應(yīng)用進(jìn)行了概覽。我們需要更深入地了解基本的EV生物學(xué)——包括細(xì)胞生產(chǎn)、EV加載、全身分布和細(xì)胞遞送——以有效利用這些內(nèi)源性細(xì)胞納米粒子作為下一代納米遞送工具。然而,即使是完美的EV產(chǎn)品也很難在臨床規(guī)模上生產(chǎn)。在這方面,作者建議可以使用載體轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)將細(xì)胞離體或直接體內(nèi)轉(zhuǎn)化為EV工廠,以穩(wěn)定、安全地調(diào)節(jié)基因表達(dá)和功能。作者從當(dāng)前的EV醉xian進(jìn)技術(shù)推斷出一個(gè)光明的潛在未來(lái),即使用EV診療當(dāng)前療法難以診療的遺傳疾病。

    外泌體是細(xì)胞分泌的納米級(jí)細(xì)胞外泌體,攜帶反映其起源細(xì)胞的各種貨物分子。由于外泌體的含量、結(jié)構(gòu)和大小高度異質(zhì),因此通過(guò)貨物分子確定其來(lái)源對(duì)其進(jìn)行分類具有挑戰(zhàn)性。在這里,提出了一種將表面增強(qiáng)拉曼光譜(SERS)與機(jī)器學(xué)習(xí)算法相結(jié)合的方法,以使用來(lái)自五種不同細(xì)胞系的外泌體的分類來(lái)揭示它們的細(xì)胞起源。使用人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)算法,表明無(wú)標(biāo)記拉曼光譜方法的預(yù)測(cè)比率與混合物中HT-1080外泌體的比率相關(guān)。這種機(jī)器學(xué)習(xí)輔助的SERS方法可以將ai細(xì)胞衍生的外泌體與健康外泌體區(qū)分開(kāi)來(lái),對(duì)外泌體制劑的無(wú)標(biāo)記研究開(kāi)辟了新的方向。這種方法可能會(huì)為早期發(fā)現(xiàn)和監(jiān)測(cè)包括CA在內(nèi)的各種疾病開(kāi)辟新的研究途徑。 健康母乳來(lái)源的外泌體含與免疫功能相關(guān)的miRNA,能在體外增強(qiáng)外周血來(lái)源的T調(diào)節(jié)細(xì)胞數(shù)量,調(diào)節(jié)免疫耐受。

    將shRNA、miRNA和circRNA包裝到外泌體中眾所周知,微小RNA(miRNA)會(huì)加載到外泌體中,并在功能上調(diào)節(jié)其他受體細(xì)胞類型中的基因表達(dá)。這可能是通過(guò)與Argonaut2(AGO2)的直接相互作用實(shí)現(xiàn)的,后者已被發(fā)現(xiàn)被包裝到外泌體s中?;蛘撸囟ǖ牡鞍踪|(zhì),如YBX1與將特定的miRNAs加載到外泌體s中有關(guān),而其他人則認(rèn)為可能沒(méi)有是參與外泌體s的miRNA募集的特定基序或途徑。還有一些人發(fā)現(xiàn)似乎沒(méi)有特定的miRNA包裝系統(tǒng)可以將這些RNA加載到外泌體s中。由于其靶基因范圍相對(duì)較大,miRNA可以明顯改變細(xì)胞的表型或基因表達(dá),因此它們可能是一種具有促進(jìn)、觸發(fā)或診療疾病潛力的高價(jià)值貨物。 可以通過(guò)檢測(cè)CD9、CD63和CD81等外泌體標(biāo)志物來(lái)判斷外泌體是否存在。遼寧血漿外泌體提取

干細(xì)胞外泌體通過(guò)改變細(xì)胞外基質(zhì),改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組,調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡,生長(zhǎng),增殖和分化途徑。干細(xì)胞外泌體示蹤

    當(dāng)肽單體聚集成不溶性淀粉樣蛋白時(shí)引起的血管淀粉樣變性是一種普遍的與年齡相關(guān)的病理學(xué)。主動(dòng)脈內(nèi)側(cè)淀粉樣蛋白(AMA)是醉常見(jiàn)的人類淀粉樣蛋白,由50個(gè)氨基酸的肽medin組成。新出現(xiàn)的證據(jù)表明細(xì)胞外囊泡(EV)是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)中病理性淀粉樣蛋白積累的介質(zhì)。為了確定AMA隨年齡增長(zhǎng)的形成機(jī)制,我們探討了血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)衰老、EV分泌和ECM重塑對(duì)介質(zhì)積累的影響。在初級(jí)VSMC分泌的EV中檢測(cè)到Medin。在體外脫細(xì)胞ECM中,小的圓形介質(zhì)聚集體與EV標(biāo)記共定位,沉積在ECM中的EV表面顯示介質(zhì)。用抑制劑減少EV分泌可減弱細(xì)胞外基質(zhì)中介質(zhì)的聚集和沉積。人類受試者主動(dòng)脈壁中的介質(zhì)積累與年齡密切相關(guān),VSMC衰老增加了EV分泌,增加了EV介質(zhì)負(fù)荷并觸發(fā)了原纖維樣介質(zhì)的沉積。蛋白質(zhì)組學(xué)分析顯示VSMC衰老引起EV貨物和ECM組成的變化,從而導(dǎo)致EV-ECM結(jié)合增強(qiáng)并加速medin聚集。蛋白多糖HSPG2的豐度在衰老的ECM中增加,并與EV和介質(zhì)共定位。孤立的EV選擇性地與ECM中的HSPG2結(jié)合,其敲低減少了原纖維樣介質(zhì)結(jié)構(gòu)的形成。這些數(shù)據(jù)將ECM中VSMC衍生的EV和HSPG2確定為介質(zhì)積累的關(guān)鍵介質(zhì),有助于與年齡相關(guān)的AMA發(fā)展。 干細(xì)胞外泌體示蹤

上海研載生物,2017-10-23正式啟動(dòng),成立了外泌體實(shí)驗(yàn),細(xì)胞自噬實(shí)驗(yàn), 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn),鐵死亡實(shí)驗(yàn)等幾大市場(chǎng)布局,應(yīng)對(duì)行業(yè)變化,順應(yīng)市場(chǎng)趨勢(shì)發(fā)展,在創(chuàng)新中尋求突破,進(jìn)而提升研載生物的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力,把握市場(chǎng)機(jī)遇,推動(dòng)醫(yī)藥健康產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步。旗下研載生物在醫(yī)藥健康行業(yè)擁有一定的地位,品牌價(jià)值持續(xù)增長(zhǎng),有望成為行業(yè)中的佼佼者。我們強(qiáng)化內(nèi)部資源整合與業(yè)務(wù)協(xié)同,致力于外泌體實(shí)驗(yàn),細(xì)胞自噬實(shí)驗(yàn), 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn),鐵死亡實(shí)驗(yàn)等實(shí)現(xiàn)一體化,建立了成熟的外泌體實(shí)驗(yàn),細(xì)胞自噬實(shí)驗(yàn), 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn),鐵死亡實(shí)驗(yàn)運(yùn)營(yíng)及風(fēng)險(xiǎn)管理體系,累積了豐富的醫(yī)藥健康行業(yè)管理經(jīng)驗(yàn),擁有一大批專業(yè)人才。公司坐落于放鶴路1088號(hào),業(yè)務(wù)覆蓋于全國(guó)多個(gè)省市和地區(qū)。持續(xù)多年業(yè)務(wù)創(chuàng)收,進(jìn)一步為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)、社會(huì)協(xié)調(diào)發(fā)展做出了貢獻(xiàn)。