外泌體具有親水性核新，這使得它們適合容納可溶姓藥物。由于外泌體是納米級的并攜帶細胞表面分子，因此它們具有克服各種生物屏障的能力，并且具有天然的靶向能力。此外，與脂質(zhì)體和基于病毒的藥物遞送系統(tǒng)相比，外泌體的免疫原性非常低。外泌體起著藥物傳遞載體的作用越來越多的研究表明，藥物外泌體是診療許多人類疾病的一種有前途的方法。目前，比較大的障礙是克服關(guān)于如何開發(fā)基于外泌體的藥物制劑。泌體裝載藥物的方法——1）孵化將藥物與外泌體結(jié)合的醉簡單方法可能是共孵育。將PTX與MSC一起孵育產(chǎn)生了負載PTX的外泌體，這些外泌體表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤作用。2）電穿孔電穿孔涉及使用短的高壓脈沖穿透外泌體膜。在1000kV電壓下電穿孔藥物和外泌體的混合物5毫秒，成功地將藥物裝載到外泌體中。3）超聲處理藥物-外泌體混合物通過超聲處理可以有效地將藥物裝載到外泌體中（圖3）。考慮到大小、Zeta電位和載藥量，超聲處理后外泌體膜的結(jié)構(gòu)和含量沒有明顯變化。此外，藥物外泌體制劑在各種條件下保持了一個多月的穩(wěn)定性。與其他納米顆粒相比，載藥的外泌體被大量吸收。它們還可以克服P-糖蛋白（P-gp）介導(dǎo)的藥物外流，從而提高耐藥tumour的診療效果。 外泌體內(nèi)的miRNA、lncRNA和cirRNA表達低，檢測難度大。北京植物葉組織外泌體wb檢測
將蛋白質(zhì)包裝到外泌體中雖然EXOtic系統(tǒng)允許將編碼蛋白質(zhì)的mRNA包裝到外泌體中，但其他人已經(jīng)開發(fā)出一種將未結(jié)合的診療性蛋白質(zhì)加載到外泌體中的方法。CRY2是一種植物蛋白，在暴露于藍光時會改變構(gòu)象，而CIBN是CIB1的截短版本，CIB1是一種對處于激發(fā)態(tài)的CRY2具有親和力的蛋白質(zhì)。CIB1附著在外泌體標(biāo)記CD9的胞質(zhì)尾部，而CRY2附著在報告蛋白，例如mCherry和GFP。當(dāng)生產(chǎn)細胞暴露在藍光下時，這個名為EXPLOR的系統(tǒng)被證明可以通過與CIB1的可逆結(jié)合將cargo-CRY2加載到外泌體中?；谶@個模型，Osteikoetxea等人測試了CRISPR相關(guān)核酸內(nèi)切酶9(Cas9)蛋白是否可以加載到外泌體中，并將其與其他三種基于暴露于激huo刺激物后的異二聚化的類似加載系統(tǒng)進行比較。研究證明，裝載CRY2-CIB1導(dǎo)致外泌體級分中的Cas9濃度比較高，達到每個外泌體超過20個Cas9分子。這項研究的一個值得注意的觀察是數(shù)據(jù)表明，用于蛋白質(zhì)貨物輸送的MysPalm工程似乎與工程化四跨膜蛋白標(biāo)記（如CD9）相比更具優(yōu)勢。這種觀察的兩個可能原因是：1)結(jié)合結(jié)構(gòu)域在與膜蛋白結(jié)合時可能無法在ER中正確折疊或2)它可能干擾CD9定位到外泌體膜中的天然位點。支持這一觀點的觀察結(jié)果表明，連在一起的Cas9活性only為WTCas9的30-50%。 北京植物葉組織外泌體wb檢測中流細胞來源的外泌體能促進中流的轉(zhuǎn)移。
研究認為，在外泌體中可以發(fā)現(xiàn)少量的DNA，這種DNA可以對檢測血清外泌體中CA相關(guān)突變有價值，外泌體中特定的miRNA或miRNA組可能在CA的檢測中提供診斷或預(yù)后潛力。外泌體中的致ai和抑aimiRNA可能具有較高的診斷價值，因為它們在ai細胞和正常細胞之間的差異表達，可能增強它們在早期診斷中的有用性，致aiKras被報道在外泌體中差異富集miR-100，循環(huán)中外泌體miR-21升高與膠質(zhì)母細胞瘤和胰腺ai、結(jié)直腸ai、結(jié)腸ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai和食管ai相關(guān)，尿源性外泌體miR-21升高與膀胱ai和前列腺ai相關(guān)。其他與多種CA類型相關(guān)的外泌體致aimicroRNA包括miR-155、miR-17-92簇和miR-1246。在腦、胰腺、結(jié)直腸、結(jié)腸、肝臟、乳腺、前列腺和食管ai；口腔鱗狀細胞ai；以及淋巴瘤和白血病中觀察到上調(diào)。tumour抑制miRNA，包括miR-146a和miR-34a，與肝臟、乳腺、結(jié)腸、胰腺和血液惡性tumour相關(guān)。
在真核生物中，泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(UPS)和自噬-溶酶體途徑(ALP)對于維持細胞蛋白穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要并與CA進展相關(guān)。我們之前的研究表明，磷酸酶和張力蛋白同系物(PTEN)是人類CA中醉常見的突變基因之一，它限制了蛋白酶體的豐度，并決定了膽管ai(CCA)中蛋白酶體抑制劑的化學(xué)敏感性。然而，PTEN是否調(diào)節(jié)溶酶體通路仍不清楚。我們在CCA細胞系中使用功能喪失和功能獲得策略測試了PTEN對溶酶體生物發(fā)生和外泌體分泌的影響。使用體外去磷酸化測定，我們探索了PTEN與溶酶體生物發(fā)生的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子轉(zhuǎn)錄因子EB(TFEB)之間的調(diào)節(jié)機制。使用遷移試驗、侵襲試驗和經(jīng)脾肝轉(zhuǎn)移小鼠模型，我們評估了PTEN缺陷、TFEB介導(dǎo)的溶酶體生物發(fā)生和外泌體分泌對tumour轉(zhuǎn)移的作用。此外，我們通過回顧性分析研究了PTEN表達和外泌體分泌的臨床意義。PTEN通過其蛋白磷酸酶活性使TFEB在Ser211位點去磷酸化，從而促進溶酶體生物發(fā)生和酸化。值得注意的是，PTEN缺乏通過減少溶酶體介導(dǎo)的多泡體(MVB)降解來增加外泌體分泌，這進一步促進了CCA的增殖和侵襲。TFEB激動劑姜黃素類似物C1抑制了小鼠模型中PTEN缺陷引起的轉(zhuǎn)移表型，我們強調(diào)了臨床隊列中PTEN缺陷與外泌體分泌之間的相關(guān)性。在CCA中。 流式細胞分選法純度高，能特異性分選某種細胞來源的外泌體，不適于大體積樣本的分選。
間充質(zhì)干細胞來源的外泌體(MSC-EVs)通過調(diào)節(jié)Mβ介導(dǎo)的血管生成為基礎(chǔ)的診療已成為組織再生的有前途的策略。盡管如此，調(diào)整外泌體功能以診療肌腱損傷的方法仍然有限。我們通過應(yīng)用生物活性玻璃(BG)增強的MSC-EV報告了一種新策略。BG誘導(dǎo)的外泌體(EVB)顯示藥用miRNA的上調(diào)，包括miR-199b-3p和miR-125a-5p，它們在M2巨噬細胞介導(dǎo)的血管生成中起關(guān)鍵作用。與幼稚的MSC-EV(EVN)相比，EVB通過重新編程的抗嚴(yán)M2巨噬細胞加速血管生成。在嚙齒類動物跟腱斷裂模型中，EVB局部給藥通過M2極化激huo抗嚴(yán)反應(yīng)，并導(dǎo)致M2肌腱與新形成的血管之間存在空間相關(guān)性。我們的結(jié)果表明，EVB在促進肌腱形成和減少有害形態(tài)變化而不引起異位骨化方面優(yōu)于EVN。生物力學(xué)測試表明，EVB顯著提高了修復(fù)肌腱的極限載荷、剛度和拉伸模量，同時M2/M1比值與生物力學(xué)特性呈正相關(guān)?；谥匦戮幊淘偕h(huán)境的增強性質(zhì)，EVB具有相當(dāng)大的潛力被開發(fā)為下一代診療方式，以增強功能再生以實現(xiàn)令人滿意的肌腱再生。 外泌體特主要來源于細胞內(nèi)多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。上海海洋生物組織外泌體鑒定
外泌體表面具有特定的蛋白標(biāo)志物，其內(nèi)含物也極為豐富。北京植物葉組織外泌體wb檢測
醉近，細胞來源的納米顆粒被稱為細胞外囊泡（EV），在再生皮膚病學(xué)領(lǐng)域引起了相當(dāng)大的興趣。EV是一種有效的、可擴展的和穩(wěn)定的生物因子來源，用于改善軟組織質(zhì)量，減少與baheng和燒傷等軟組織損傷相關(guān)的患者發(fā)病率，改善再生醫(yī)學(xué)美容領(lǐng)域中與組織衰老相關(guān)的美容結(jié)果。EV是由細胞自然產(chǎn)生的脂質(zhì)包裹的納米顆粒，參與蛋白質(zhì)、RNA和代謝物等生物物質(zhì)的細胞間轉(zhuǎn)移。這些無處不在的納米顆粒幾乎由人體內(nèi)的每一種細胞類型分泌，以自分泌、旁分泌和內(nèi)分泌的方式作用，改變局部和遠處受體細胞的功能。越來越多的證據(jù)表明EV在許多生理和再生過程中具有復(fù)雜和普遍的功能，包括干細胞維持、組織修復(fù)和免疫調(diào)節(jié)。EV的生物相容性、體內(nèi)的長保留能力和跨越生物屏障能力，使它們成為再生醫(yī)學(xué)中有吸引力的候選診治物。 北京植物葉組織外泌體wb檢測
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