基于毛nang來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(HF-MSC)的療法可預(yù)防急性胰腺炎(AP)。然而，越來越多的證據(jù)表明，基于MSC的診治主要涉及通過旁分泌作用分泌MSC衍生的小細(xì)胞外囊泡(MSC-sEV)。因此，本研究調(diào)查了HF-MSC-sEVs在AP中的診治效果及其潛在機(jī)制。從培養(yǎng)的HF-MSC上清液中純化SEV。sEVs在體外對雨蛙素模擬的胰腺腺泡細(xì)胞(PACs)的影響進(jìn)行了分析。在雨蛙肽誘導(dǎo)的AP模型中檢查了sEV在體內(nèi)的診治潛力。通過近紅外熒光(NIRF)成像確定小鼠sEV的organ分布。收集血清標(biāo)本和胰腺組織以分析體內(nèi)炎癥和細(xì)胞焦亡的抑制作用，以及適當(dāng)?shù)妮斪⑼緩剑焊鼓?nèi)（ip）或靜脈內(nèi)（iv）注射。HF-MSC-sEVs被PACs吸收并提高了體外細(xì)胞活力。在體內(nèi)，sEVs大量存在于胰腺中，與AP組相比，sEV處理小鼠的胰腺炎指標(biāo)，包括淀粉酶、脂肪酶、炎癥反應(yīng)、髓過氧化物酶(MPO)表達(dá)和組織病理學(xué)評分均有顯著改善，特別是通過尾靜脈注射。此外，我們發(fā)現(xiàn)sEV可明顯下調(diào)PAC和AP組織中關(guān)鍵細(xì)胞焦亡蛋白的水平。我們創(chuàng)新地證明了HF-MSC-sEVs可以減輕AP中PAC的炎癥和細(xì)胞焦亡，這表明AP是一種令人耳目一新的無細(xì)胞療法。 外泌體是細(xì)胞分泌囊泡的一種亞型，存在于生物體液中，并參與多種生理和病理過程。山東胸水外泌體粒徑檢測
外泌體是細(xì)胞分泌的納米級細(xì)胞外泌體，攜帶反映其起源細(xì)胞的各種貨物分子。由于外泌體的含量、結(jié)構(gòu)和大小高度異質(zhì)，因此通過貨物分子確定其來源對其進(jìn)行分類具有挑戰(zhàn)性。在這里，提出了一種將表面增強(qiáng)拉曼光譜(SERS)與機(jī)器學(xué)習(xí)算法相結(jié)合的方法，以使用來自五種不同細(xì)胞系的外泌體的分類來揭示它們的細(xì)胞起源。使用人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)算法，表明無標(biāo)記拉曼光譜方法的預(yù)測比率與混合物中HT-1080外泌體的比率相關(guān)。這種機(jī)器學(xué)習(xí)輔助的SERS方法可以將ai細(xì)胞衍生的外泌體與健康外泌體區(qū)分開來，對外泌體制劑的無標(biāo)記研究開辟了新的方向。這種方法可能會為早期發(fā)現(xiàn)和監(jiān)測包括CA在內(nèi)的各種疾病開辟新的研究途徑。 成都細(xì)胞上清外泌體外泌經(jīng)核內(nèi)體途徑產(chǎn)生，在一些類似核內(nèi)體的質(zhì)膜區(qū)域也可形成，但核內(nèi)體起源是定義外泌體的常用標(biāo)準(zhǔn)。
Buller等利用miR-146b的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞，使其分泌的外泌體負(fù)載miR-146b，并將外泌體注射至移植到小鼠體內(nèi)的GBM處。結(jié)果表明，這種利用外泌體運輸miRNA進(jìn)行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流，體內(nèi)zhiliao不同于體外細(xì)胞實驗，更需考慮腦部組織微環(huán)境對藥物的影響，外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而，至今還沒有利用外泌體載藥經(jīng)靜脈注射zhiliaoGBM的報道，這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進(jìn)行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此， Wood等報道的在進(jìn)行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經(jīng)元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經(jīng)靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力，因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。
妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控，在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥，如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生，很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來，然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體，如樹突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等，且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中，這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。NTA技術(shù)已被外泌體研究領(lǐng)域認(rèn)可為外泌體表征手段之一。
基于外泌體microRNA有效地參與靶mRNA并抑制受體細(xì)胞中基因表達(dá)的觀察結(jié)果，外泌體工程遞送特定的miRNA或小干擾RNA(siRNA)有效負(fù)荷已被開發(fā)用于CNS疾病和CA。外泌體RNA可能受到血源性核糖核酸酶的保護(hù)而不被降解，與脂質(zhì)體相比，結(jié)合優(yōu)越的全身滯留，可以使外泌體在遠(yuǎn)處發(fā)揮其功能。使用外泌體遞送miRNA或siRNA有效負(fù)荷的臨床前試驗集中于對嚙齒類動物的乳腺ai、膠質(zhì)瘤和胰腺ai診治，以及探索性腦靶向。使用GE11合成肽修飾的外泌體靶向EGFR+乳腺ai細(xì)胞，并將microRNAlet-7a遞送至ai細(xì)胞，限制了其在體內(nèi)的生長。MSC來源的外泌體能夠在大鼠膠質(zhì)瘤中傳遞miR-146b和靶向EGFR。臨床級的MSC來源的外泌體與KrasG12DsiRNA有效載荷(Exosomes)已被用于診治多種動物模型中的胰腺ai。 機(jī)體內(nèi)幾乎所有細(xì)胞均能分泌外泌體，而間充質(zhì)干細(xì)胞分泌外泌體的能力很強(qiáng)。吉林外泌體熒光標(biāo)記
外泌體特主要來源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。山東胸水外泌體粒徑檢測
間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體(MSC-Exos)作為潰瘍性結(jié)腸炎(UC)的潛在無細(xì)胞療法而備受關(guān)注，這主要是由于其抗yan、組織修復(fù)和免疫調(diào)節(jié)特性。雖然靜脈注射MSC-Exos能夠在一定程度上改善UC，但口服外泌體是診治UC等胃腸道疾病的優(yōu)先方法。然而，外泌體含有易被胃腸道環(huán)境降解的蛋白質(zhì)和核酸，使得口服給藥難以實施。逐層(LbL)自組裝技術(shù)為外泌體的口服遞送提供了一種有前途的策略。因此，本研究構(gòu)建了一個有效的LbL-Exos自組裝系統(tǒng)，用于口服遞送靶向結(jié)腸的外泌體以改善UC診治。生物相容性和可生物降解的N-(2-羥基)丙基-3-三甲基銨殼聚糖氯化物(HTCC)和氧化魔芋葡甘聚糖(OKGM)多糖被用作外層以提供結(jié)腸靶向并保護(hù)外泌體免于降解。與普通外泌體類似，LbL-Exos具有相似的結(jié)構(gòu)和特征，但LbL可在炎癥結(jié)腸中控制釋放外泌體。與靜脈內(nèi)給藥相比，口服LbL-Exos可以使用一半數(shù)量的外泌體有效緩解UC。機(jī)制研究表明，LbL-Exos被巨噬細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞內(nèi)化，發(fā)揮抗yan和組織修復(fù)作用，從而減輕UC。此外，LbL-Exos系統(tǒng)能夠通過抑制MAPK/NF-kB信號通路來改善UC?？偟膩碚f，我們的數(shù)據(jù)表明LbL-MSC-Exos可以在口服后緩解UC，因此可能構(gòu)成未來UC診治的新策略。 山東胸水外泌體粒徑檢測
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