細(xì)胞外囊泡(EV)在臨床診治診斷學(xué)中有多種應(yīng)用。然而，目前分離等離子EV的技術(shù)存在繁瑣的程序和有限的產(chǎn)量。在此，我們報(bào)告了一種快速高效的EV分離平臺(tái)，即EV-FISHER，它由具有可裂解脂質(zhì)探針（PO43--spacer-DNA-cholesterol，PSDC）的金屬有機(jī)框架構(gòu)成。EV-FISHER通過膽固醇從血漿中誘捕EV，并用普通離心機(jī)將它們分離。捕獲的EV可以在隨后被脫氧核糖核酸酶I切割PSDC時(shí)釋放和收集。我們得出結(jié)論，EV-FISHER在時(shí)間（-0分鐘對(duì)240分鐘）、分離效率（對(duì))，以及分離要求（12,800g對(duì)135,000g）方面具有優(yōu)勢。除了在血漿中的穩(wěn)定性外，EV-FISHER還表現(xiàn)出與下游單EV流式細(xì)胞儀的良好兼容性，能夠鑒定glypican-1(GPC-1)EVs用于早期診斷、臨床分期和療效評(píng)估。這項(xiàng)工作描繪了一種有效的策略，可以將EV從復(fù)雜的生物流體中分離出來，具有促進(jìn)基于EV的診治診斷學(xué)的潛力。 外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。山東細(xì)胞上清外泌體示蹤
外泌體的產(chǎn)生過程涉及質(zhì)膜的雙重內(nèi)陷和含有腔內(nèi)囊泡intraluminalvesicles(ILVs)的細(xì)胞內(nèi)多泡體multivesicularbodies(MVBs)的形成。ILV醉終通過質(zhì)膜的損傷和MVB胞吐作用以直徑范圍約為40-160nm的外泌體形式分泌1).質(zhì)膜的di一次內(nèi)陷形成杯狀結(jié)構(gòu)，包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白2).這導(dǎo)致了早期分選內(nèi)體early-sortingendosome(ESE)的新生形成，在某些情況下可能直接與預(yù)先存在的ESE合并[1]。ESEs可以成熟為晚期分選內(nèi)體late-sortingendosomes(LSEs)，醉終生成MVBs，也稱為多囊泡內(nèi)體。MVBs由胞內(nèi)體界膜向內(nèi)內(nèi)陷（即質(zhì)膜雙重內(nèi)陷）形成。這一過程導(dǎo)致MVB含有幾種ILV（未來的外泌體）。MVB既可以與溶酶體或自噬體融合降解，也可以與質(zhì)膜融合釋放所含的ILV作為外泌體。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫的醉新更新列表[2]，包含9769個(gè)蛋白質(zhì)、3408個(gè)mRNA、2838個(gè)miRNA和1116個(gè)脂質(zhì)。外泌體的這些內(nèi)容物可作為CA進(jìn)展的預(yù)后標(biāo)志物和（或）分級(jí)依據(jù)。同時(shí)調(diào)節(jié)tumour生長、轉(zhuǎn)移、血管生成，介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞耐藥。 江西腹膜透析液外泌體提取外泌體具有良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性，使其在藥物遞送方向大有潛力。
將蛋白質(zhì)包裝到外泌體中雖然EXOtic系統(tǒng)允許將編碼蛋白質(zhì)的mRNA包裝到外泌體中，但其他人已經(jīng)開發(fā)出一種將未結(jié)合的診療性蛋白質(zhì)加載到外泌體中的方法。CRY2是一種植物蛋白，在暴露于藍(lán)光時(shí)會(huì)改變構(gòu)象，而CIBN是CIB1的截短版本，CIB1是一種對(duì)處于激發(fā)態(tài)的CRY2具有親和力的蛋白質(zhì)。CIB1附著在外泌體標(biāo)記CD9的胞質(zhì)尾部，而CRY2附著在報(bào)告蛋白，例如mCherry和GFP。當(dāng)生產(chǎn)細(xì)胞暴露在藍(lán)光下時(shí)，這個(gè)名為EXPLOR的系統(tǒng)被證明可以通過與CIB1的可逆結(jié)合將cargo-CRY2加載到外泌體中?；谶@個(gè)模型，Osteikoetxea等人測試了CRISPR相關(guān)核酸內(nèi)切酶9(Cas9)蛋白是否可以加載到外泌體中，并將其與其他三種基于暴露于激huo刺激物后的異二聚化的類似加載系統(tǒng)進(jìn)行比較。研究證明，裝載CRY2-CIB1導(dǎo)致外泌體級(jí)分中的Cas9濃度比較高，達(dá)到每個(gè)外泌體超過20個(gè)Cas9分子。這項(xiàng)研究的一個(gè)值得注意的觀察是數(shù)據(jù)表明，用于蛋白質(zhì)貨物輸送的MysPalm工程似乎與工程化四跨膜蛋白標(biāo)記（如CD9）相比更具優(yōu)勢。這種觀察的兩個(gè)可能原因是：1)結(jié)合結(jié)構(gòu)域在與膜蛋白結(jié)合時(shí)可能無法在ER中正確折疊或2)它可能干擾CD9定位到外泌體膜中的天然位點(diǎn)。支持這一觀點(diǎn)的觀察結(jié)果表明，連在一起的Cas9活性only為WTCas9的30-50%。
脂質(zhì)體納米藥物主動(dòng)載藥、藥前設(shè)計(jì)和固定化酶等策略的啟發(fā)，團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一個(gè)新的工程化小細(xì)胞外囊泡平臺(tái)，名為“酯酶響應(yīng)型主動(dòng)載藥”(EAL)，可用于高效、穩(wěn)定的加載活性yao物分子。選擇廣泛應(yīng)用的阿魏酸酯類衍生物作為前藥，建立連續(xù)的跨膜離子梯度，實(shí)現(xiàn)阿魏酸活性分子在小細(xì)胞外囊泡中的高載藥量。結(jié)果表明，載藥量和包封率分別比被動(dòng)負(fù)載高約6倍和5倍。此外，團(tuán)隊(duì)自創(chuàng)的超速離心結(jié)合多種膜過濾方法可以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模、高質(zhì)量的小細(xì)胞外囊泡的生產(chǎn)。細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)評(píng)估實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)由EAL所制備的載阿魏酸小細(xì)胞外囊泡制劑在緩釋和低毒方面的優(yōu)越性能。綜上所述，這些發(fā)現(xiàn)將為基于小細(xì)胞外囊泡的遞藥系統(tǒng)開發(fā)提供具有指導(dǎo)意義的見解。干細(xì)胞外泌體具有抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能。
基于外泌體microRNA有效地參與靶mRNA并抑制受體細(xì)胞中基因表達(dá)的觀察結(jié)果，外泌體工程遞送特定的miRNA或小干擾RNA(siRNA)有效負(fù)荷已被開發(fā)用于CNS疾病和CA。外泌體RNA可能受到血源性核糖核酸酶的保護(hù)而不被降解，與脂質(zhì)體相比，結(jié)合優(yōu)越的全身滯留，可以使外泌體在遠(yuǎn)處發(fā)揮其功能。使用外泌體遞送miRNA或siRNA有效負(fù)荷的臨床前試驗(yàn)集中于對(duì)嚙齒類動(dòng)物的乳腺ai、膠質(zhì)瘤和胰腺ai診治，以及探索性腦靶向。使用GE11合成肽修飾的外泌體靶向EGFR+乳腺ai細(xì)胞，并將microRNAlet-7a遞送至ai細(xì)胞，限制了其在體內(nèi)的生長。MSC來源的外泌體能夠在大鼠膠質(zhì)瘤中傳遞miR-146b和靶向EGFR。臨床級(jí)的MSC來源的外泌體與KrasG12DsiRNA有效載荷(Exosomes)已被用于診治多種動(dòng)物模型中的胰腺ai。 干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理，改善神經(jīng)預(yù)后，增加血管與神經(jīng)生成。湖北CD63外泌體慢病毒包裝
外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合。山東細(xì)胞上清外泌體示蹤
自身免疫性疾病(ADs)是一組由免疫系統(tǒng)攻擊自身organ或組織，導(dǎo)致免疫復(fù)合物形成和沉積的慢性炎癥性結(jié)締組織疾病，其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確，目前認(rèn)為與遺傳易感性、環(huán)境因素和免疫失調(diào)有關(guān)。外泌體是由脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸組成的球形脂質(zhì)雙分子層囊泡，通過囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)傳遞信號(hào)分子調(diào)控靶細(xì)胞的功能和形態(tài)，從而參與細(xì)胞凋亡或增殖、細(xì)胞因子產(chǎn)生等多種生物學(xué)過程。近年來，大量研究表明外泌體主要通過調(diào)節(jié)靶細(xì)胞的功能來介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊，促進(jìn)ADs的發(fā)sheng發(fā)展。相反，得益于外泌體特殊的生物學(xué)特性，例如膜結(jié)合能力強(qiáng)，穩(wěn)定性好，避免免疫排斥反應(yīng)等，它還可以用作ADs的生物標(biāo)志物和藥物遞送載體，在ADs的診斷和診治中具有一定的應(yīng)用價(jià)值。 山東細(xì)胞上清外泌體示蹤
研載生物科技（上海）有限公司目前已成為一家集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售相結(jié)合的服務(wù)型企業(yè)。公司成立于2017-10-23，自成立以來一直秉承自我研發(fā)與技術(shù)引進(jìn)相結(jié)合的科技發(fā)展戰(zhàn)略。本公司主要從事外泌體實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞自噬實(shí)驗(yàn)， 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)，鐵死亡實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域內(nèi)的外泌體實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞自噬實(shí)驗(yàn)， 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)，鐵死亡實(shí)驗(yàn)等產(chǎn)品的研究開發(fā)。擁有一支研發(fā)能力強(qiáng)、成果豐碩的技術(shù)隊(duì)伍。公司先后與行業(yè)上游與下游企業(yè)建立了長期合作的關(guān)系。研載生物致力于開拓國內(nèi)市場，與醫(yī)藥健康行業(yè)內(nèi)企業(yè)建立長期穩(wěn)定的伙伴關(guān)系，公司以產(chǎn)品質(zhì)量及良好的售后服務(wù)，獲得客戶及業(yè)內(nèi)的一致好評(píng)。研載生物科技（上海）有限公司以先進(jìn)工藝為基礎(chǔ)、以產(chǎn)品質(zhì)量為根本、以技術(shù)創(chuàng)新為動(dòng)力，開發(fā)并推出多項(xiàng)具有競爭力的外泌體實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞自噬實(shí)驗(yàn)， 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)，鐵死亡實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品，確保了在外泌體實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞自噬實(shí)驗(yàn)， 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)，鐵死亡實(shí)驗(yàn)市場的優(yōu)勢。