除了siRNA和miRNA，mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運(yùn)輸。研究表明，在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來的外泌體含有中流細(xì)胞特異性的mRNA，而被愛潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細(xì)胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而，外泌體的這種運(yùn)載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期，Saydam等率先報(bào)道了利用多泡體(含外泌體)負(fù)載mRNA/蛋白進(jìn)行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對(duì)HEK-293細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRT EGFP，其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPＲT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;EGFP:增強(qiáng)型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經(jīng)鞘瘤處，并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC)，神經(jīng)鞘瘤的增長被明顯抑制。精ye經(jīng)過長達(dá)30年的–80 °C冷凍保存, 其外泌體的形狀、物理性質(zhì)、 核酸蛋白含量和種類都無明顯變化。浙江組織外泌體透射電鏡檢測
細(xì)胞外囊泡(EV)在臨床診治診斷學(xué)中有多種應(yīng)用。然而，目前分離等離子EV的技術(shù)存在繁瑣的程序和有限的產(chǎn)量。在此，我們報(bào)告了一種快速高效的EV分離平臺(tái)，即EV-FISHER，它由具有可裂解脂質(zhì)探針（PO43--spacer-DNA-cholesterol，PSDC）的金屬有機(jī)框架構(gòu)成。EV-FISHER通過膽固醇從血漿中誘捕EV，并用普通離心機(jī)將它們分離。捕獲的EV可以在隨后被脫氧核糖核酸酶I切割PSDC時(shí)釋放和收集。我們得出結(jié)論，EV-FISHER在時(shí)間（-0分鐘對(duì)240分鐘）、分離效率（對(duì))，以及分離要求（12,800g對(duì)135,000g）方面具有優(yōu)勢。除了在血漿中的穩(wěn)定性外，EV-FISHER還表現(xiàn)出與下游單EV流式細(xì)胞儀的良好兼容性，能夠鑒定glypican-1(GPC-1)EVs用于早期診斷、臨床分期和療效評(píng)估。這項(xiàng)工作描繪了一種有效的策略，可以將EV從復(fù)雜的生物流體中分離出來，具有促進(jìn)基于EV的診治診斷學(xué)的潛力。 福建血漿外泌體small RNA測序外泌體內(nèi)的miRNA、lncRNA和cirRNA表達(dá)低，檢測難度大。
外泌體是生物來源的膜結(jié)合納米級(jí)囊泡，已知含有各種分子，例如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸，它們有助于外泌體介導(dǎo)細(xì)胞間通訊的能力。人工納米顆粒在藥物輸送中的醉新障礙，包括低細(xì)胞攝取、免疫系統(tǒng)激huo和組織障礙，已促使科學(xué)家將外泌體設(shè)計(jì)為藥物輸送載體。盡管外泌體具有穩(wěn)定性、生物相容性、低免疫原性和跨越生物屏障的能力等固有特性，但仍需要開發(fā)能夠?qū)⒃\治材料有效裝載到外泌體中的技術(shù)。在這里，我們介紹了一種簡單的肽裝備技術(shù)，可以在溫和的裝載環(huán)境中增強(qiáng)外泌體的貨物裝載潛力。具體而言，一種已知的細(xì)胞穿透肽YARA，源自人類免疫缺陷病毒-1轉(zhuǎn)錄反式激huo因子，與哺乳動(dòng)物microRNAmiR-21-5p共價(jià)結(jié)合。然后將綴合物YARA-miR-21-5p與從間充質(zhì)干細(xì)胞或ai細(xì)胞中分離出來的外泌體一起孵育，以進(jìn)行加載。YARA-miR-21-5p的外泌體加載具有時(shí)間依賴性，并且通過孵育證明miR-21-5p的外泌體加載效率提高了倍。在有效的細(xì)胞攝取后，負(fù)載的外泌體迅速將YARA-miR-21-5p遞送到哺乳動(dòng)物細(xì)胞中。相對(duì)于未加載的外泌體和游離的YARA-miR-21-5p，加載的外泌體顯著增強(qiáng)了人和小鼠成纖維細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，這是傷口愈合的重要步驟。
膀胱ai(bladdercancer,BC)是醉常見的CA之一，具有高發(fā)病率與病死率。積累的結(jié)構(gòu)與基因變異，細(xì)胞代謝和信號(hào)通路的改變都被認(rèn)為是BC發(fā)生的原因。同時(shí)，tumour逃逸免疫監(jiān)控及抗腫瘤免疫功能的耗竭同樣發(fā)揮了重要的作用。然而盡管經(jīng)過多年研究，BC的發(fā)生機(jī)制仍未被完全闡明。自然殺傷（NK）細(xì)胞(CD56+CD3?)是一種大顆粒淋巴細(xì)胞，不依賴預(yù)先免疫，可直接殺死異變的細(xì)胞和病毒感ran的細(xì)胞，并通過分泌促炎因子和趨化因子促進(jìn)獲得性免疫，在抗腫瘤免疫監(jiān)視中發(fā)揮重要作用。臨床研究表明，BC患者的NK細(xì)胞數(shù)量減少且活性受損，這表明BC細(xì)胞可通過未知機(jī)制誘導(dǎo)NK細(xì)胞功能障礙，從而逃避抗腫瘤免疫監(jiān)視。而外泌體(exosomes)和外泌體貨物如DNA、RNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，在細(xì)胞間通訊和調(diào)節(jié)靶細(xì)胞活性中的重要作用已被研究者所熟知。腫瘤細(xì)胞可分泌10倍于健康細(xì)胞的外泌體。這些tumour來源的外泌體(TEXs)在tumour的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、血管生成和耐藥等方面發(fā)揮著重要作用。在tumour微環(huán)境中，TEXs和NK細(xì)胞之間存在重要的相互作用，但BC衍生的外泌體對(duì)NK細(xì)胞的影響尚未得到充分研究。 外泌體能向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)，所以有很大潛力作為基因和藥物遞送的載體。
從體液中高精度分離小細(xì)胞外囊泡 (sEV) 對(duì)于開發(fā)下一代液體活檢和再生療法至關(guān)重要。然而，目前的 sEV 分離方法需要專門的設(shè)備和耗時(shí)的協(xié)議，并且難以產(chǎn)生高純度的 sEV 亞群。在這里，我們介紹了通過波柱激發(fā)共振 (ANSWER) 進(jìn)行的聲學(xué)納米級(jí)分離，它允許單步、快速（<10 分鐘）、高純度（>96% 小外泌體，>80% 外泌體）分離來自無需任何樣品預(yù)處理的體液樣品。粒子通過激發(fā)共振以尺寸選擇性的方式迭代偏轉(zhuǎn)。這種以前未發(fā)現(xiàn)的現(xiàn)象使用表面聲波在流體中產(chǎn)生虛擬的、可調(diào)諧的柱狀聲場模式。無需樣品預(yù)處理或復(fù)雜納米制造方法的高精度 sEV 分離已使用 ANSWER 進(jìn)行了證明，顯示出作為強(qiáng)大工具的潛力，可以對(duì) sEV 亞群的復(fù)雜性、異質(zhì)性和功能進(jìn)行更深入的研究。在細(xì)胞通訊過程中，細(xì)胞分泌的大小在40～100nm之間的外泌體具有負(fù)載“貨物”并將其傳遞給靶細(xì)胞的能力。黑龍江血清外泌體
不同肝臟疾病中，細(xì)胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。浙江組織外泌體透射電鏡檢測
在真核生物中，泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(UPS)和自噬-溶酶體途徑(ALP)對(duì)于維持細(xì)胞蛋白穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要并與CA進(jìn)展相關(guān)。我們之前的研究表明，磷酸酶和張力蛋白同系物(PTEN)是人類CA中醉常見的突變基因之一，它限制了蛋白酶體的豐度，并決定了膽管ai(CCA)中蛋白酶體抑制劑的化學(xué)敏感性。然而，PTEN是否調(diào)節(jié)溶酶體通路仍不清楚。我們在CCA細(xì)胞系中使用功能喪失和功能獲得策略測試了PTEN對(duì)溶酶體生物發(fā)生和外泌體分泌的影響。使用體外去磷酸化測定，我們探索了PTEN與溶酶體生物發(fā)生的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子轉(zhuǎn)錄因子EB(TFEB)之間的調(diào)節(jié)機(jī)制。使用遷移試驗(yàn)、侵襲試驗(yàn)和經(jīng)脾肝轉(zhuǎn)移小鼠模型，我們評(píng)估了PTEN缺陷、TFEB介導(dǎo)的溶酶體生物發(fā)生和外泌體分泌對(duì)tumour轉(zhuǎn)移的作用。此外，我們通過回顧性分析研究了PTEN表達(dá)和外泌體分泌的臨床意義。PTEN通過其蛋白磷酸酶活性使TFEB在Ser211位點(diǎn)去磷酸化，從而促進(jìn)溶酶體生物發(fā)生和酸化。值得注意的是，PTEN缺乏通過減少溶酶體介導(dǎo)的多泡體(MVB)降解來增加外泌體分泌，這進(jìn)一步促進(jìn)了CCA的增殖和侵襲。TFEB激動(dòng)劑姜黃素類似物C1抑制了小鼠模型中PTEN缺陷引起的轉(zhuǎn)移表型，我們強(qiáng)調(diào)了臨床隊(duì)列中PTEN缺陷與外泌體分泌之間的相關(guān)性。在CCA中。 浙江組織外泌體透射電鏡檢測
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