接受抗逆轉(zhuǎn)錄病毒診治的HIV感ran者出現(xiàn)慢性炎癥的一個(gè)可能解釋是,由于一種稱為“訓(xùn)練有素的免役力”的現(xiàn)象,骨髓細(xì)胞反應(yīng)過(guò)度。在這里,我們證明源自醉初用含有HIV-1蛋白Nef(exNef)的細(xì)胞外囊泡處理的單核細(xì)胞的人單核細(xì)胞來(lái)源的巨噬細(xì)胞,在沒(méi)有exNef的情況下分化,在脂多糖刺激后釋放增加水平的促炎細(xì)胞因子。這種效應(yīng)與涉及炎癥和膽固醇代謝途徑的基因的染色質(zhì)變化以及脂筏的上調(diào)有關(guān),并被甲基-β-環(huán)糊精、他汀類藥物和脂筏相關(guān)受體IGF1R抑制劑阻斷。來(lái)自注射了exNef的小鼠以及移植了來(lái)自注射了exNef的動(dòng)物的骨髓的小鼠的骨髓來(lái)源的巨噬細(xì)胞在受到刺激時(shí)會(huì)產(chǎn)生升高水平的腫瘤壞死因子α(TNF-α)。這些現(xiàn)象與exNef誘導(dǎo)的訓(xùn)練有素的免役力一致。 妊娠期間,胎盤可釋放外泌體到母體循環(huán),在正常妊娠或胎盤相關(guān)妊娠并發(fā)癥中發(fā)揮重要作用。河北植物組織外泌體NTA
外泌體富含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸分子,這些分子具有來(lái)源細(xì)胞的特異性,所以通過(guò)分析中流細(xì)胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來(lái)源細(xì)胞表型及其生物學(xué)作用。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來(lái)源的蛋白類分子標(biāo)志物。例如,乳腺ai、結(jié)腸ai和胰腺ai中均可檢測(cè)到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(glypican1,GPC1)的表達(dá),且與乳腺ai和結(jié)腸ai相比,GPC1對(duì)胰腺ai的早期診斷尤具價(jià)值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達(dá)增高則提示與中流進(jìn)展相關(guān)。隨著蛋白組學(xué)技術(shù)的發(fā)展,研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來(lái)源的蛋白標(biāo)志物其診斷特異性和敏感性分別可達(dá)到95%和90%。北京海洋生物組織外泌體蛋白標(biāo)志物檢測(cè)外泌體能夠影響級(jí)聯(lián)反應(yīng)的每一步,因此可作為病灶治理的靶點(diǎn)。
除運(yùn)輸藥物進(jìn)行疾病zhiliao之外,外泌體還能進(jìn)行免疫zhiliao,外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao。進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)時(shí),外泌體通常運(yùn)載TGF-β1、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質(zhì)。在這些研究中,分泌外泌體的母代細(xì)胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹(shù)突細(xì)胞或者中流細(xì)胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤細(xì)胞作為母代細(xì)胞,通過(guò)熱處理的方式使淋巴瘤細(xì)胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子,如主要組織相容性復(fù)合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等,與未熱處理的鼠B淋巴瘤細(xì)胞分泌的外泌體相比,熱處理后分泌的外泌體可以增強(qiáng)對(duì)T細(xì)胞的激huo能力,從而增強(qiáng)這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力。
Vlassov等人發(fā)表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻(xiàn)中介紹,通過(guò)終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后,10000xg離心1h,可將直徑在30-150nm之間,且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來(lái)。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體,為了進(jìn)一步純化胎盤相關(guān)外泌體,將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后,加入非線性蔗糖密度梯度層,10000xg超速離心5h,將分層液采用PEG6000進(jìn)行2次沉淀。經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證,確定同時(shí)表達(dá)外泌體標(biāo)志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來(lái)源外泌體所在密度層。中流細(xì)胞來(lái)源的外泌體能促進(jìn)中流的轉(zhuǎn)移。
脂質(zhì)體納米藥物主動(dòng)載藥、藥前設(shè)計(jì)和固定化酶等策略的啟發(fā),團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了一個(gè)新的工程化小細(xì)胞外囊泡平臺(tái),名為“酯酶響應(yīng)型主動(dòng)載藥”(EAL),可用于高效、穩(wěn)定的加載活性yao物分子。選擇廣泛應(yīng)用的阿魏酸酯類衍生物作為前藥,建立連續(xù)的跨膜離子梯度,實(shí)現(xiàn)阿魏酸活性分子在小細(xì)胞外囊泡中的高載藥量。結(jié)果表明,載藥量和包封率分別比被動(dòng)負(fù)載高約6倍和5倍。此外,團(tuán)隊(duì)自創(chuàng)的超速離心結(jié)合多種膜過(guò)濾方法可以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模、高質(zhì)量的小細(xì)胞外囊泡的生產(chǎn)。細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)評(píng)估實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)由EAL所制備的載阿魏酸小細(xì)胞外囊泡制劑在緩釋和低毒方面的優(yōu)越性能。綜上所述,這些發(fā)現(xiàn)將為基于小細(xì)胞外囊泡的遞藥系統(tǒng)開(kāi)發(fā)提供具有指導(dǎo)意義的見(jiàn)解。外泌經(jīng)核內(nèi)體途徑產(chǎn)生,在一些類似核內(nèi)體的質(zhì)膜區(qū)域也可形成,但核內(nèi)體起源是定義外泌體的常用標(biāo)準(zhǔn)。江蘇動(dòng)物組織外泌體wb
多種細(xì)胞分泌外泌體,如MSCs、上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、中流細(xì)胞等。河北植物組織外泌體NTA
內(nèi)皮細(xì)胞損傷在缺血性急性腎損傷(AKI)中起關(guān)鍵作用,并參與AKI的進(jìn)展。靶向腎內(nèi)皮細(xì)胞診治可能會(huì)改善血管損傷并進(jìn)一步改善缺血性AKI的預(yù)后。在此,鑒定了P-選擇素作為內(nèi)皮細(xì)胞缺血性AKI的生物標(biāo)志物,并開(kāi)發(fā)了具有成像和診治功能的P-選擇素結(jié)合肽(PBP)工程化細(xì)胞外囊泡(PBP-EV)。結(jié)果表明,PBP-EV表現(xiàn)出對(duì)受損腎臟的選擇性靶向傾向,同時(shí)通過(guò)分子成像量化腎臟中P-選擇素的表達(dá),為AKI的早期診斷提供時(shí)空信息。同時(shí),PBP-EVs通過(guò)減輕炎癥浸潤(rùn)、改善修復(fù)性血管生成和改善腎實(shí)質(zhì)的適應(yīng)不良修復(fù),在促進(jìn)腎臟修復(fù)和抑制纖維化方面顯示出優(yōu)越的腎臟保護(hù)功能??傊琍BP-EVs作為本研究中設(shè)計(jì)的缺血性AKI診治診斷系統(tǒng),在AKI的早期階段提供時(shí)空診斷,以幫助指導(dǎo)個(gè)性化診治并表現(xiàn)出卓yue的腎保護(hù)作用,為設(shè)計(jì)提供概念驗(yàn)證數(shù)據(jù)基于EV的診治診斷策略可促進(jìn)腎臟恢復(fù)并進(jìn)一步改善AKI后的長(zhǎng)期結(jié)果。 河北植物組織外泌體NTA
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