普通的外泌體在體內(nèi)易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)快速qing除,難以保證載藥系統(tǒng)在到達靶部位發(fā)揮其作用前的完整性。已有相關(guān)研究證實,使用聚乙二醇衍生物對外泌體膜進行修飾,可以屏蔽網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的識別和攝取,延長其循環(huán)時間。Kooijmans等人將EGa1納米抗體連接到修飾聚乙二醇的膠束表面,利用合成膠束在不同溫度(4℃、40℃、80℃)下與外泌體孵育,使其插入到外泌體表面。研究結(jié)果表明,當孵育溫度為40℃時能較好保持外泌體膜的完整性,而且對EG-FR受體過度表達的A431細胞有較高的結(jié)合率。將同時修飾EGa1抗體和聚乙二醇的外泌體靜脈注入荷瘤小鼠體內(nèi),結(jié)果顯示,在注射60min后,血漿中仍可檢測到外泌體的存在。外泌體有良好的生物相容性、高生物滲透性、低免疫原性、低毒性,可作為藥物載體。動物血液樣本外泌體載藥實驗參考價格
miRNA的運載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運載miRNA的優(yōu)良載體,并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細胞的方法,使外泌體載有anti-miR-9。在進行間充質(zhì)細胞和多形性成角質(zhì)細胞瘤(GBM)細胞間anti-miR-9傳遞的實驗時,發(fā)現(xiàn)兩種細胞不jin可以通過縫隙連接介導(dǎo)的細胞間通訊(GJIC)也可以通過外泌體傳遞anti-miR-9。且anti-miR-9降低兩種GBM細胞(U87和T98G)對中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實現(xiàn),而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9,顯示出外泌體在運載miRNA進行基因zhiliao時的潛力。安徽外泌體載藥的方法外泌體成分復(fù)雜,未裝載藥物的外泌體可能促進供體中流細胞的增殖。
疏水性的小分子藥物如紫杉醇、紫衫酚、阿霉素(DOX)、姜黃素等可以通過與分離純化的外泌體共孵育,將藥物負載到外泌體中。這種方法的載藥量往往較低,通過高效液相色譜檢測紫衫醇的載藥量一般為7.2%,DOX的載藥量一般為11.2%。為了達到高效負載藥物的目的,研究人員采用了電穿孔、擠出、輔助超聲、低滲透析等一系列載yao方式將疏水性卟啉化合物載入到外泌體中。研究結(jié)果顯示,電穿孔法、擠出、超聲、低滲透析等一系列載yao方式都可以提高卟啉化合物的載藥量。尤其是超聲和低滲透析方法可以提高卟啉化合物的載藥量到11倍。
休眠性乳腺ai細胞會促使間充質(zhì)干細胞(MSCs)釋放含有不同miRNA(如miR-222/223)的外泌體,從而促進一部分ai細胞處于靜止期,并賦予抗藥性。有研究發(fā)現(xiàn),間充質(zhì)干細胞外泌體(MSC-Exo)能夠通過遞送miRNA-142-3p抑制劑在體外和體內(nèi)降低乳腺ai的致瘤性。在體外,MSC-Exo可有效遞送miR-142-3p抑制劑,降低miR-142-3p和miR-150水平,增加調(diào)控靶基因APC和P2X7R的轉(zhuǎn)錄。在體內(nèi),MSC-Exo能夠?qū)⒁种菩怨押塑账徇f送到中流組織中以下調(diào)miR-142-3p和miR-150的表達水平。此外,MSC-Exo遞送的miR-100能夠通過調(diào)節(jié)乳腺ai細胞中mTOR/HIF-1α/VEGF信號軸,抑制體外血管生成,從而影響乳腺ai細胞的行為。將紫杉醇載入到外泌體中可以使紫杉醇對MDCKMDR1細胞的毒性提高50倍。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——聚合物沉淀法。用于分離病毒和其他的生物大分子,已有50多年歷史,近幾年,將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前,市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器,但是價格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜,之后再低速離心。即可進行外泌體的提取,此方法實行起來較為簡單。裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體可以被A549細胞攝取。江蘇動物細胞樣本外泌體載藥
藥物載入到外泌體中的方式可分為兩種,即外源性載yao方式和內(nèi)源性載yao方式。動物血液樣本外泌體載藥實驗參考價格
mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運輸。利用多泡體(含外泌體)負載mRNA/蛋白進行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對HEK-293細胞進行轉(zhuǎn)染,使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP,其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;EGFP:增強型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經(jīng)鞘瘤處,并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神經(jīng)鞘瘤的增長被明顯抑制。這主要是由于CD和UPRT可以將5-FC轉(zhuǎn)化為5氟尿嘧啶脫氧核苷酸(5-FdUMP),而后者又是胸甘酸合成酶的抑制劑,可以抑制脫氧胸甘酸的合成,從而起到抑制DNA的合成以及促進中流細胞凋亡的效果。Saydam等的研究表明多泡體/外泌體不jin可以有效輸送mRNA/蛋白質(zhì),并且句有與其他抗ai藥物聯(lián)合zhiliao中流的潛力。動物血液樣本外泌體載藥實驗參考價格
研載生物科技(上海)有限公司坐落在放鶴路1088號,是一家專業(yè)的從事生物科技、醫(yī)藥科技、化工科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,實驗室設(shè)備、儀器儀表、玻璃制品、陶瓷制品、橡塑制品、化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品),從事貨物及技術(shù)的進出口業(yè)務(wù)。【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】公司。公司目前擁有較多的高技術(shù)人才,以不斷增強企業(yè)重點競爭力,加快企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新,實現(xiàn)穩(wěn)健生產(chǎn)經(jīng)營。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:外泌體實驗,細胞自噬實驗, 細胞功能實驗,鐵死亡實驗等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營宗旨,深受客戶好評。公司力求給客戶提供全數(shù)良好服務(wù),我們相信誠實正直、開拓進取地為公司發(fā)展做正確的事情,將為公司和個人帶來共同的利益和進步。經(jīng)過幾年的發(fā)展,已成為外泌體實驗,細胞自噬實驗, 細胞功能實驗,鐵死亡實驗行業(yè)出名企業(yè)。