河南海洋生物組織外泌體粒徑檢測(cè)

外泌體中存在著某些特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和多糖, 基于抗原–抗體特異性識(shí)別和結(jié)合作用原理, 可將外泌體從其他組分中分離出來。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜聯(lián)蛋白、上皮細(xì)胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原, 而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板、磁珠、二氧化硅、樹脂、膜親和過濾器、纖維素濾膜、聚酰氨基胺樹狀聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法和磁珠法等。酶聯(lián)免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質(zhì), 其結(jié)果用吸光度值表示, 該方法可以快速分析已知表面生物標(biāo)志物的表達(dá), 也可以瞬時(shí)讀出外泌體的產(chǎn)量和特異性。磁珠法多使用共價(jià)包覆鏈霉親和素的磁珠, 與樣品一起孵育后可通過磁泳將被結(jié)合的外泌體從樣品組分中分離出來。鑒于微米級(jí)磁珠可賦予更大的接觸面積, 該方法不jin具有高度特異性, 還具有比超速離心更高的外泌體產(chǎn)率。通過壓制或去除這些外泌體，有希望壓制疾病發(fā)生。河南海洋生物組織外泌體粒徑檢測(cè)

除了siRNA和miRNA，mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運(yùn)輸。研究表明，在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來的外泌體含有中流細(xì)胞特異性的mRNA，而被愛潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細(xì)胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而，外泌體的這種運(yùn)載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期，Saydam等率先報(bào)道了利用多泡體(含外泌體)負(fù)載mRNA/蛋白進(jìn)行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對(duì)HEK-293細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRT EGFP，其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPＲT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;EGFP:增強(qiáng)型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經(jīng)鞘瘤處，并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC)，神經(jīng)鞘瘤的增長(zhǎng)被明顯抑制。湖北外泌體wb檢測(cè)干細(xì)胞外泌體可直接促進(jìn)血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。

外泌體攜帶的與疾病進(jìn)展緊密關(guān)聯(lián)的分子標(biāo)志物可用于疾病進(jìn)展的監(jiān)視、檢測(cè)和診斷, 是一種潛在的非侵入性生物標(biāo)志物。由于外泌體本身可以作為抗原提呈小泡, 且有較長(zhǎng)的循環(huán)半衰期, 可用于免疫學(xué)相關(guān)研究, 同時(shí), 源自ai細(xì)胞的外泌體可以被工程化, 發(fā)揮免疫刺激作用, 可作為中流疫苗應(yīng)用于ai癥的免疫zhiliao。此外, 外泌體穩(wěn)定而廣fan地分布在qi官和組織中, 具有低免疫原性、高耐受性等特點(diǎn), 且良好的膜滲透性可使其通過血腦屏障, 因此可用作組織和qi官特異藥物輸送系統(tǒng), 兼有高輸送效率和低副作用。因此, 外泌體適合用作藥物載體遞送zhiliao劑(如阿霉素或姜黃素), zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白質(zhì), 運(yùn)送至靶位點(diǎn)后實(shí)現(xiàn)靶向zhiliao。

微流控芯片是一種可兼容多種外泌體分離方法的新興檢測(cè)平臺(tái), 這些方法包括免疫親和分離、膜過濾、納米線捕獲、聲納米過濾和確定性側(cè)向位移分選等。微流控裝置是由幾十到幾百微米的不同直徑微通道網(wǎng)絡(luò)組成的緊湊單元, 能夠處理皮升到微升范圍內(nèi)的黏性介質(zhì)樣品; 且根據(jù)特定的功能, 微通道可以相互連接, 使用額外的特定裝置來微調(diào)流體運(yùn)動(dòng)。微流控技術(shù)能夠以極高的準(zhǔn)確性和特異性在微尺度上重現(xiàn)眾多實(shí)驗(yàn)室過程, 取代昂貴的設(shè)備, 基于微流控技術(shù)的電化學(xué)外泌體檢測(cè)芯片已經(jīng)受到廣fan關(guān)注。外泌經(jīng)核內(nèi)體途徑產(chǎn)生，在一些類似核內(nèi)體的質(zhì)膜區(qū)域也可形成，但核內(nèi)體起源是定義外泌體的常用標(biāo)準(zhǔn)。

在免疫系統(tǒng)中，淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞等均可以產(chǎn)生外泌體。研究表明免疫細(xì)胞來源的外泌體能夠明顯影響機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，包括調(diào)節(jié)抗原呈遞、免疫激huo、免疫監(jiān)督等。不同免疫細(xì)胞來源的外泌體功能不同，以樹突狀細(xì)胞(該細(xì)胞具有免疫刺激能力，是目前能夠激huo初始T細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞)來源的外泌體為例，其外泌體的免疫刺激作用取決于來源細(xì)胞的成熟狀態(tài)。成熟的樹突狀細(xì)胞外泌體內(nèi)包含能夠直接激huoT細(xì)胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ，共刺激分子如CD40、CD8、CD86和熱激蛋白，這些分子使樹突狀細(xì)胞來源的外泌體具有抗原呈遞、調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的生物功能。越來越多的文獻(xiàn)證實(shí)間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體具有與間充質(zhì)干細(xì)胞相似的作用(免疫調(diào)節(jié)、抗yan等)。湖南植物葉組織外泌體提取

尿液外泌體甲狀腺球蛋白是預(yù)測(cè)甲狀腺ai復(fù)發(fā)的潛在標(biāo)志物。河南海洋生物組織外泌體粒徑檢測(cè)

間充質(zhì)干細(xì)胞存在于骨髓、脂肪、臍血、牙髓、滑膜液等部位，是一種能夠自我更新的多功能干細(xì)胞。間充質(zhì)干細(xì)胞通過旁分泌的形式發(fā)揮其生理功能，而外泌體作為一種細(xì)胞間傳遞信息的介質(zhì)，在間充質(zhì)干細(xì)胞的功能行使中發(fā)揮了重要作用。研究發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體能夠修復(fù)組織損傷、抑制中流生長(zhǎng)和調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)，具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿爾茲海默癥等疾病的潛力。另外，也有研究顯示間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體會(huì)促進(jìn)某些中流生長(zhǎng)。河南海洋生物組織外泌體粒徑檢測(cè)

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