妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控，在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥，如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生，很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來，然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類細胞釋放的外泌體，如樹突狀細胞、淋巴細胞等，且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中，這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。不同類別的外泌體囊泡有三個征：表面具涂層的膜泡、內(nèi)含纖維的膜泡、電子致密囊泡。外泌體透射電鏡檢測
一類外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合，有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易?、熱休克蛋白家族。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白（RPS3）、信號轉(zhuǎn)導因子（黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子、細胞骨架蛋白以及泛素等。山東胸水外泌體染色在裸鼠模型中皮下注射人臍帶血間充質(zhì)干細胞來源外泌體，可增加體內(nèi)和梗死區(qū)周新生血管，保護心臟功能。
干細胞外泌體的六大內(nèi)在改善：細胞排毒：有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。細胞修復：加速細胞修復、促進微循環(huán)修復，修復痘坑痘印。增加彈性：重塑彈力纖維膠原纖維網(wǎng)狀纖維，恢復肌膚彈性，提亮皮膚。淡化皺紋、細紋：促進生成纖維細胞，增強皮膚產(chǎn)生蛋白能力，淡化皺紋、頸紋等。減緩衰老：調(diào)節(jié)機體組織間物質(zhì)及信息傳遞速度，加強修復，減緩衰老。營養(yǎng)供給：針對肌膚脆弱敏感日夜修復，面部、眼周、肌底多效保護，不斷給皮膚補充充足的營養(yǎng)，喚醒肌膚細胞，有助于后續(xù)產(chǎn)品營養(yǎng)更好的吸收。
雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢，但在臨床應用上仍有一些限制：外泌體的提取方法金標準仍然是差速離心法，但這種方法費時費力且提取效率較低，難以進行臨床推廣和應用；而商業(yè)化的試劑盒質(zhì)量參差不齊，往往導致提取物雜質(zhì)過多，且其售價較高。外泌體的定量是采用顆粒濃度定量，蛋白濃度定量，亦或是核酸濃度定量，目前仍存有爭議。由于傳統(tǒng)的內(nèi)參并不適用于外泌體，在實時熒光定量PCR檢測靶分子含量時內(nèi)參的選擇尚沒有統(tǒng)一的標準。外泌體分子標志物的研究還處于初級階段。目前外泌體研究的整個流程中成本都很**細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。
外泌體本身的惰性相當高，但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學功能，因此，外泌體是納米藥物遞送或基因治理的潛在載體。外泌體作為功能性小RNA和蛋白質(zhì)的天然載體也引起了藥物遞送領(lǐng)域的極大興趣，因為它可以利用這些囊泡治理性遞送各種核糖核酸分子、肽和合成藥物。外泌體作為疾病診斷標志物的潛在應用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破，要將其用于臨床治理，外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)還面臨很大的挑戰(zhàn)。首先，對外泌體的具體合成機制、功能了解并不是非常詳細。其次，現(xiàn)在缺乏經(jīng)濟有效的外泌體分離技術(shù)。支氣管肺泡灌洗液中外泌體冷凍保存與新鮮樣本相比, 體積變大且有一半以上種類蛋白質(zhì)的豐度發(fā)生變化。杭州外泌體iTRAQ
在免疫方面，外泌體通過傳遞多種生物分子完成抗原呈遞、免疫活化、免疫抑制及免疫耐受。外泌體透射電鏡檢測
人體內(nèi)多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結(jié)合，進而喚醒靶細胞細胞內(nèi)的信號通路。二是在細胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結(jié)合，從而喚醒細胞內(nèi)的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。外泌體透射電鏡檢測
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