外泌體（Exosome）介導(dǎo)瘤血管的形成和轉(zhuǎn)移。外泌體（Exosome）能將自身的細(xì)胞因子IL-8和VEGF釋放到細(xì)胞外，作用于內(nèi)皮細(xì)胞膜表面受體，導(dǎo)致瘤血管快速形成并較終通過發(fā)生EMT過程促進(jìn)瘤的遷移。瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體（Exosome）中含有血管生長(zhǎng)素、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等，這些細(xì)胞因子以不同的作用方式促進(jìn)瘤血管的形成，如VEGF通過喚醒磷酸酯酶C和第二信使的形成，誘導(dǎo)纖維蛋白溶解酶原活化物的表達(dá)，使得基底膜降解，從而促進(jìn)瘤細(xì)胞的遷移。外泌體能向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)，所以有很大潛力作為基因和藥物遞送的載體。北京外泌體lncRNA芯片
通過改變外泌體的溶解性或者分散性, 可以將它們從體液或細(xì)胞培養(yǎng)液中沉淀出來(lái)。常見的方法是使用聚乙二醇或凝集素來(lái)沉淀樣品中的外泌體。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物, 不含水的聚乙二醇可以通過“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力, 從而迫使其脫離溶液, 進(jìn)而在低速離心條件下發(fā)生沉降。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結(jié)合蛋白, 可通過與外泌體質(zhì)膜糖蛋白上的糖鏈結(jié)合來(lái)改變外泌體的溶解性。此外, 還可使用魚精蛋白、醋酸鈉、有機(jī)溶劑沉淀等方法進(jìn)行沉淀分離。遼寧外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)外泌體可釋放轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）ji活TGF-β信號(hào)通路，促進(jìn)中流的轉(zhuǎn)移。
中流細(xì)胞分泌的外泌體可以通過體液進(jìn)入特定qi官，建立有利于ai細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境，包括促進(jìn)受體細(xì)胞上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、引發(fā)炎癥、促進(jìn)血管生成，為ai細(xì)胞的擴(kuò)散形成有利條件。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)中流細(xì)胞外泌體能夠引導(dǎo)ai癥轉(zhuǎn)移至特定qi官，在膜表面特異性整合素的作用下，中流細(xì)胞外泌體首先在特定的qi官累積，引起受體qi官產(chǎn)生炎癥、生成血管，形成有利于中流轉(zhuǎn)移的微環(huán)境，使得中流細(xì)胞更容易轉(zhuǎn)移至該qi官。Maji等揭示了惡性中流細(xì)胞外泌體中的AnnexinⅡ蛋白能夠促進(jìn)血管生成，為中流轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利的微環(huán)境。
外泌體中包含的mRNAs和miRNAs在進(jìn)入受體細(xì)胞后仍具有翻譯蛋白質(zhì)、促進(jìn)病毒感ran等功能。據(jù)估計(jì)，單個(gè)外泌體含有約≤100拷貝數(shù)的蛋白質(zhì)和≤10000拷貝數(shù)的核苷酸。不同細(xì)胞來(lái)源的外泌體中既包含與細(xì)胞形成、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的共有成分，也包含與來(lái)源細(xì)胞的生物功能相關(guān)的特異分子。如B淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有大量的主要組織相容性復(fù)合體蛋白質(zhì)MHCclassⅡ和MHCclassⅠ，血小板和T細(xì)胞來(lái)源的外泌體則包含諸如血管性血友病因子、穿孔素和顆粒酶等特殊蛋白質(zhì)，而ai細(xì)胞來(lái)源的外泌體表面可能含有中流特異的蛋白質(zhì)分子。這類特異分子在外泌體介導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、參與生理病理過程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。外泌體是一種由活細(xì)胞分泌的，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。
尺寸排除色譜法是使用聚合物凝膠或類似的固定相柱進(jìn)行外泌體分離的技術(shù), 樣品以重力滴落的方式收集。流體力學(xué)半徑較小的樣品組分進(jìn)入凝膠孔隙后, 需耗費(fèi)相對(duì)較長(zhǎng)的時(shí)間通過凝膠柱, 導(dǎo)致延遲洗脫, 實(shí)現(xiàn)不同粒徑大小顆粒分離。尺寸排除色譜法可以與差速離心法結(jié)合而不會(huì)明顯損失外泌體, 保證產(chǎn)量的同時(shí)可有效去除雜質(zhì)蛋白, 更適合目標(biāo)蛋白質(zhì)組學(xué)和miRNA的分析。靜水過濾透析法主要利用靜水壓力迫使樣品中不同特定大小分子先后通過透析管, 其中溶劑和小溶質(zhì)很容易通過透析管, 而較大的顆粒, 如外泌體和其他囊泡, 仍留在透析管中而被收集。中流細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體能夠增強(qiáng)中流細(xì)胞對(duì)放療的耐受、傳遞輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)。胸水外泌體示蹤
外泌體被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。北京外泌體lncRNA芯片
一類外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易濉嵝菘说鞍准易?。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白（RPS3）、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子（黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類紅細(xì)胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子、細(xì)胞骨架蛋白以及泛素等。北京外泌體lncRNA芯片
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