利用抗ai癥藥物進(jìn)行中流zhiliao是抑制中流的一個重要方法,不過目前抗ai癥藥物的運載存在著種種挑戰(zhàn),主要體現(xiàn)在以下幾點:(1)抗ai癥藥物的疏水性;(2)抗ai癥藥物的毒性以及非靶向性;(3)易被人體清chu,體內(nèi)循環(huán)的半衰期很短等。采用外泌體運輸抗ai癥藥物,可以提高藥物體系的水溶性,降低藥物對人體的毒性以及避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉從而延長其循環(huán)時間。近期,兩種抗ai癥藥物———紫杉醇(PTX)和阿霉素(DOX)已經(jīng)成功被載入外泌體中,并對其抗中流作用進(jìn)行了研究。外泌體參與炎癥過程在許多病理狀態(tài)中發(fā)揮作用,如ai癥、炎癥性腸病、Ⅱ型糖尿病、肥胖等。細(xì)胞上清外泌體miRNA芯片
在免疫系統(tǒng)中,淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞等均可以產(chǎn)生外泌體。研究表明免疫細(xì)胞來源的外泌體能夠明顯影響機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制,包括調(diào)節(jié)抗原呈遞、免疫激huo、免疫監(jiān)督等。不同免疫細(xì)胞來源的外泌體功能不同,以樹突狀細(xì)胞(該細(xì)胞具有免疫刺激能力,是目前能夠激huo初始T細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞)來源的外泌體為例,其外泌體的免疫刺激作用取決于來源細(xì)胞的成熟狀態(tài)。成熟的樹突狀細(xì)胞外泌體內(nèi)包含能夠直接激huoT細(xì)胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ,共刺激分子如CD40、CD8、CD86和熱激蛋白,這些分子使樹突狀細(xì)胞來源的外泌體具有抗原呈遞、調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的生物功能。山東外泌體iTRAQ對分離提取的外泌體進(jìn)行鑒定的經(jīng)典方案有:NTA分析、電鏡分析、蛋白標(biāo)志物鑒定等。
小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞,根除或抑制小鼠中流的生長,這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,樹突狀細(xì)胞來源的外泌體也能夠通過激huo其他免疫細(xì)胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng),從而抑制中流。B細(xì)胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物,能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細(xì)胞,從而實現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能。細(xì)菌或病原體感ran的巨噬細(xì)胞外泌體能夠刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌炎性介質(zhì),在增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。
外泌體中存在著某些特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和多糖, 基于抗原–抗體特異性識別和結(jié)合作用原理, 可將外泌體從其他組分中分離出來。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜聯(lián)蛋白、上皮細(xì)胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原, 而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板、磁珠、二氧化硅、樹脂、膜親和過濾器、纖維素濾膜、聚酰氨基胺樹狀聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法和磁珠法等。酶聯(lián)免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質(zhì), 其結(jié)果用吸光度值表示, 該方法可以快速分析已知表面生物標(biāo)志物的表達(dá), 也可以瞬時讀出外泌體的產(chǎn)量和特異性。磁珠法多使用共價包覆鏈霉親和素的磁珠, 與樣品一起孵育后可通過磁泳將被結(jié)合的外泌體從樣品組分中分離出來。鑒于微米級磁珠可賦予更大的接觸面積, 該方法不jin具有高度特異性, 還具有比超速離心更高的外泌體產(chǎn)率。外泌體工程實驗表明外泌體中的DNA和miRNA參與調(diào)節(jié)適應(yīng)免疫和先天免疫反應(yīng)。
外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200 nm,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA)是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200nt、不編碼蛋白的RNA。 近年來的研究表明lncRNA能在標(biāo)貫遺傳、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)控基因表達(dá),參與了X染色體沉默、基因組印記以及染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄jihuo、轉(zhuǎn)錄干擾、核內(nèi)運輸?shù)榷喾N重要的調(diào)控過程,與人類疾病的發(fā)生、發(fā)展和防治都有著密切聯(lián)系。 lncRNA芯片對lncRNA進(jìn)行功能研究也被更多的關(guān)注,通過設(shè)計不同的lncRNA探針,可以更加快速、高通量地篩選出疾病或特定生物學(xué)過程中差異表達(dá)的lncRNA和mRNA信息,找到lncRNA的靶基因位點深入分析調(diào)控機(jī)制。外泌體可釋放轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)ji活TGF-β信號通路,促進(jìn)中流的轉(zhuǎn)移。上海胸水外泌體
有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上。細(xì)胞上清外泌體miRNA芯片
外泌體是新型治理劑,瘤轉(zhuǎn)移是一個包括病細(xì)胞侵入、血管中存活和殖民化等多步驟的復(fù)雜過程。外泌體能夠影響這個級聯(lián)反應(yīng)的每一步,因此可作為瘤治理的靶點。瘤細(xì)胞在轉(zhuǎn)移到其他組織時需要在間質(zhì)細(xì)胞間移動并到達(dá)血管中,在這個過程中,瘤細(xì)胞外泌體通過纖維連接蛋白促進(jìn)瘤細(xì)胞的運動性,再通過蛋白酶促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的分解、血管生成,進(jìn)而促進(jìn)瘤轉(zhuǎn)移。多數(shù)瘤細(xì)胞對轉(zhuǎn)移的組織具有指向性,而外泌體表面的整合素就是決定其指向性的因子,如外泌體αvβ5整合素決定了對肝臟的指向性,而外泌體α6β4?α6β1整合素決定了對肺部的指向性。細(xì)胞上清外泌體miRNA芯片
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