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多年來(lái),外泌體被認(rèn)為參與無(wú)用的細(xì)胞內(nèi)含物質(zhì)的釋放。但是近年來(lái),外泌體在活內(nèi)作為運(yùn)載脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA等細(xì)胞間信息傳遞的新型媒介而倍受矚目。隨著其功能在生理及病理功能的闡明,外泌體在臨床應(yīng)用的相關(guān)研究中,特別是診斷醫(yī)治、生物標(biāo)記的開(kāi)發(fā)也迅速發(fā)展起來(lái)。現(xiàn)在,外泌體研究幾乎涉及所有的研究領(lǐng)域(免疫、神經(jīng)系統(tǒng)、癥狀、內(nèi)分泌、循環(huán)系統(tǒng)等)。例如,免疫細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有抗原肽/MHC復(fù)合體和可能控制著免疫細(xì)胞間抗原信息的交換、免疫細(xì)胞活化/非活化等各種免疫應(yīng)答機(jī)制的各種抗原。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測(cè)出,特別是血液中釋放的病細(xì)胞來(lái)源的外泌體。上海胸水外泌體
在多細(xì)胞生物體內(nèi),遠(yuǎn)處的細(xì)胞可以通過(guò)傳遞單個(gè)分子或細(xì)胞外囊泡(EVs,包括 exosomes和microvesicles等)交換信息。該綜述介紹了一些EVs引人注目的功能,以及我們目前對(duì)其生理作用認(rèn)識(shí)的局限。盡管有初步研究表明,EVs在體內(nèi)具有一些生理功能,但EVs的本質(zhì)特性仍有待進(jìn)一步澄清。這篇綜述主要關(guān)注種瘤細(xì)胞和微環(huán)境,但類似的結(jié)果和挑戰(zhàn)也適用于EVs介導(dǎo)的其他的病理/生理過(guò)程。功能神經(jīng)的能力和完整性需要感覺(jué)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元、神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞之間的交互式信息交流。上海腹水外泌體small RNA測(cè)序PS親和法提取的外泌體,其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上。
外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā)。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不只是是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止目前已經(jīng)通過(guò)286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式:一是超速離心法,這是目前外泌體提取常用的方法 。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊, 由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種 方法得到的是微泡不是外泌體 。二是過(guò)濾離心, 這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性 ,但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法, 用此種方法分離到 的外泌體純度 高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。癥狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與癥狀進(jìn)展相關(guān)的分子。
在20世紀(jì)80年代,外泌體被描述為從網(wǎng)織紅細(xì)胞分泌的內(nèi)體來(lái)源的囊泡。人們對(duì)這些細(xì)胞外囊泡的興趣逐漸增加,因?yàn)樗鼈兯坪鯀⑴c了很多細(xì)胞過(guò)程。外泌體攜帶蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和RNAs,介導(dǎo)體內(nèi)不同細(xì)胞類型之間的細(xì)胞間通訊,從而影響正常和病理狀態(tài)。只有近,科學(xué)家才認(rèn)識(shí)到將外泌體與其他類型的細(xì)胞外囊泡分開(kāi)的困難,這排除了特定功能對(duì)不同類型分泌的囊泡的明確歸因。為了闡明這個(gè)復(fù)雜但正在發(fā)展的科學(xué)領(lǐng)域,該綜述著重于外泌體和其他分泌的細(xì)胞外囊泡的定義。討論了它們的生物發(fā)生,分泌及其后續(xù)的命運(yùn),因?yàn)樗鼈兊墓δ芤蕾囉谶@些重要過(guò)程。從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。上海腹水外泌體small RNA測(cè)序
外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標(biāo)記物。上海胸水外泌體
全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠?qū)?50 nm的外泌體進(jìn)行全方面的表征,無(wú)論是粒徑尺寸、粒徑分布還是外泌體的亞型均可在一次測(cè)試中得到。并且所用來(lái)測(cè)試的樣本無(wú)需進(jìn)行純化,避免因純化帶來(lái)的樣本偏差。分析不同大小和不同尺度的外泌體亞群,在CD171過(guò)表達(dá)系統(tǒng)中,100 nm以上的外泌體只表達(dá)了CD171。通過(guò)抗體捕獲的模式,全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)能夠量化含有不同標(biāo)記物的外泌體亞群,并對(duì)不同種群的外泌體進(jìn)行特異性計(jì)數(shù)和分析。整個(gè)過(guò)程無(wú)需純化,并且線性范圍可跨越3個(gè)數(shù)量級(jí)。上海胸水外泌體