外泌體載yao方法已在多種研究中得到應(yīng)用,但各自有一定的局限性:共孵育依賴藥物跨膜運(yùn)輸而包載;超聲法和電穿孔法較為常用,但都破壞了外泌體的膜結(jié)構(gòu)而使藥物進(jìn)入外泌體,與參數(shù)有較大關(guān)系;擠壓法依賴儀器的機(jī)械力,但機(jī)械力是否對(duì)外泌體產(chǎn)生影響未知;反復(fù)凍融法載藥能力較差;對(duì)外泌體修飾可以達(dá)到提高細(xì)胞攝取或者靶向而改善藥物的療效;藥物混合物中加入皂苷會(huì)有體內(nèi)溶血的潛在風(fēng)險(xiǎn)。目前研究者應(yīng)用較多的方法是共孵育結(jié)合超聲、超聲、電穿孔、修飾外泌體。外泌體有良好的生物相容性、高生物滲透性、低免疫原性、低毒性,可作為藥物載體。細(xì)胞樣本外泌體載藥價(jià)格比較
外泌體遞送系統(tǒng)的靶向給yao方式分為被動(dòng)靶向和主動(dòng)靶向兩種。被動(dòng)靶向給藥,多采用局部給yao方式實(shí)現(xiàn),包括局部注射、鼻腔給藥、生物材料局部植入等。主動(dòng)靶向給藥的相關(guān)研究很少見(jiàn)。jin有YUAN等人利用血一腦屏障在病理和生理?xiàng)l件下的特性,實(shí)現(xiàn)載帶腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的外泌體遞送系統(tǒng)在全身給藥條件下腦部主動(dòng)靶向。因被動(dòng)靶向的靶向效率明顯低于主動(dòng)靶向,且臨床實(shí)際更需要的是可以實(shí)現(xiàn)精zhun靶向給藥、減少非靶組織和qi官傷害的主動(dòng)靶向給藥,故載帶外源性蛋白質(zhì)外泌體主動(dòng)靶向給藥將是研究的主要方向。上海動(dòng)物組織樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)服務(wù)外泌體裝載姜黃素的穩(wěn)定性和kang炎特點(diǎn),可將其運(yùn)用于腦部炎癥的zhiliao。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——尺寸排阻色譜法。尺寸排阻色譜法時(shí)外泌體提取的一種方法,利用分子篩理論,開(kāi)始是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要很大的離心力,從而保證了外泌體的完整性。對(duì)比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白,結(jié)果顯示, 尺寸排阻色譜法得到的外泌體的蛋白豐度高于超高速離心法。這些基于過(guò)濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了可能。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來(lái)的一種方法,超濾一般被認(rèn)為是外泌體分離過(guò)程中的一個(gè)準(zhǔn)備過(guò)程,通過(guò)超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì)。不過(guò)連續(xù)的超濾可以分離出外泌體,和超高速離心相比,超濾不需要特殊的設(shè)備就可以較短時(shí)間內(nèi)分離出外泌體。但是,超濾膜對(duì)外泌體的黏附作用會(huì)降低外泌體的產(chǎn)量,并且超濾過(guò)程中施加的外力可能會(huì)使外泌體變形或者破裂。
外泌體作為納米級(jí)內(nèi)源性載體囊泡,具有低免疫原性,可以利用天然獨(dú)特的來(lái)源透過(guò)細(xì)胞屏障;為球形空心結(jié)構(gòu),不需要設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)而裝載藥物;為細(xì)胞間通信介質(zhì)而用于遞送藥物;對(duì)外泌體修飾可獲得靶向性,提高藥物遞送的效率。但外泌體產(chǎn)量一直比較低,已有研究基于Fe2O3與聚乳酸?乙醇酸共聚物的生物可降解納米顆粒(NPs)提高外泌體產(chǎn)量,用LPS刺激THP-1巨噬細(xì)胞也會(huì)增加外泌體產(chǎn)量。由于外泌體的得率較低,載藥時(shí)應(yīng)考慮藥物性質(zhì)選擇合適的載yao方法,以達(dá)到外泌體的合理運(yùn)用。外泌體載阿霉素在小鼠體內(nèi)的耐受量高于游離的阿霉素,增加了阿霉素對(duì)乳腺ai和卵巢ai的zhiliao指數(shù)。
中流細(xì)胞的異常增殖和高遷移水平是惡性中流細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要特征。通過(guò)實(shí)驗(yàn)可以用含藥外泌體DATS-Exo、空白外泌體Exo和DATS處理B16BL6細(xì)胞24h后,然后采用MTT的方法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,DATS-Exo與DATS都能夠有效抑制B16BL6細(xì)胞的增殖,且與DATS組相比,DATS-Exo的抑制作用更強(qiáng)。通過(guò)經(jīng)典的劃痕法考察含藥外泌體DATS-Exo的抑制中流細(xì)胞水平遷移能力,DATS-Exo組與DATS組相比具有更強(qiáng)的抑制效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,將大蒜素DATS制備成外泌體載藥系統(tǒng)是可以明顯提高其體外抗中流細(xì)胞轉(zhuǎn)移的能力。MHS來(lái)源外泌體裝載連翹苷(phil)對(duì)外泌體的特異蛋白(CD63,Alix)的表達(dá)無(wú)影響。吉林細(xì)胞外泌體載藥大概費(fèi)用
HA修飾的牛奶外泌體載藥體系可將藥物靶向遞送至CD44高表達(dá)的中流細(xì)胞中,提高對(duì)Dox的攝取效率。細(xì)胞樣本外泌體載藥價(jià)格比較
外泌體來(lái)源于機(jī)體細(xì)胞,可作為天然的生物載體,能進(jìn)行長(zhǎng)距離的細(xì)胞間物質(zhì)輸運(yùn)和信號(hào)傳遞。這種細(xì)胞間的通訊在機(jī)體的生理和病理過(guò)程中至關(guān)重要,已被用于多種疾病和中流的zhiliao與組織損傷修復(fù)等疾病的研究。主要方法分為 2種:一是某些特殊細(xì)胞分泌的外泌體包含有zhiliao作用的有效分子,可將外泌體作為生物藥物應(yīng)用于免疫抑制和活化、血管生成以及組織損傷修復(fù)等;另一則是利用工程化改造后的外泌體作為藥物載 體將zhiliao藥物運(yùn)送至zhiliao部位。細(xì)胞樣本外泌體載藥價(jià)格比較
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