phil作為連翹的主要藥效成分之一,具有廣fan藥理作用,但極性較小、滲透性差、體內(nèi)吸收較差、代謝較快,phil可促進(jìn)肺中流組織中endostatin的表達(dá),下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá),共同抑制中流xue管的生成。以磷脂和膽固醇為載體將phil制備成脂質(zhì)體納米粒,增強(qiáng)了phil的抗氧化活性,緩釋性增強(qiáng);采用聚山梨酯-80將揮發(fā)油和phil制成納米膠束,提高了phil的溶解度,增強(qiáng)了phil的透皮吸收。用外泌體作為藥物載體,制備一種負(fù)載連翹苷的外泌體遞藥系統(tǒng)(phil-exo)。制備的phil-exo被A549細(xì)胞攝取良好,對(duì)A549細(xì)胞遷移具有較高抑制作用,明顯提高phil的抗中流細(xì)胞遷移能力,這可能是由于細(xì)胞分泌所得外泌體粒徑極小易于透過(guò)細(xì)胞,有助于改善phil的難以滲透細(xì)胞膜和不穩(wěn)定性。裝載連翹苷(phil)的MHS來(lái)源外泌體具有完整茶托狀膜結(jié)構(gòu)的類圓形。北京外泌體載藥實(shí)驗(yàn)服務(wù)
研究證明了外泌體運(yùn)載siRNA進(jìn)行RNAizhiliao的潛力。在他們的研究中,首先通過(guò)化學(xué)轉(zhuǎn)染法將RAD51siRNA裝載入源于HeLa細(xì)胞和腹水的外泌體,隨后在體外成功地將siRNA運(yùn)輸至目標(biāo)細(xì)胞。結(jié)果顯示,這種外泌體負(fù)載RAD51siRNA的抑制效果與直接化學(xué)轉(zhuǎn)染目標(biāo)細(xì)胞的抑制效果相當(dāng),但由于化學(xué)轉(zhuǎn)染外泌體后不能將外泌體和轉(zhuǎn)染劑很好的分離,在應(yīng)用外泌體時(shí),無(wú)法說(shuō)明是外泌體還是轉(zhuǎn)染劑在發(fā)揮作用。于是研究者又利用電穿孔使RAD51siRNA載入到外泌體中。結(jié)果顯示,相比于外泌體與siRNA的混合物(未經(jīng)載藥處理),經(jīng)電穿孔載siRNA后的外泌體可以有效抑制RAD51。并且由于RAD51的抑制會(huì)帶來(lái)人ai細(xì)胞的大量死亡,因而通過(guò)外泌體運(yùn)載siRNA的方法在ai癥zhiliao方面有著誘人的前景。江蘇動(dòng)物細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)參考價(jià)格人臍帶血來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞作為白介素21基因傳遞載體,可用于裸鼠的上皮性卵巢aizhiliao。
通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出,負(fù)載miR-132的間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體能夠明顯增加內(nèi)皮細(xì)胞的管腔樣結(jié)構(gòu);在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,外泌體預(yù)處理的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞具有更強(qiáng)的血管生成能力。此外,在小鼠缺血心臟中植入的包載miR-132的外泌體明顯增強(qiáng)了梗塞周?chē)鷧^(qū)域新血管生成并保護(hù)了心臟功能。心肌梗死后,移植MSCs的zhiliao作用也可能是由負(fù)載miR-125b-5p的外泌體改善自噬流實(shí)現(xiàn)的。有研究利用重組腺病毒介導(dǎo)miR-486基因修飾MSCs,結(jié)果發(fā)現(xiàn),其能夠提高M(jìn)SC-Exo中miR-486的水平,而且發(fā)現(xiàn)高表達(dá)miR-486的MSC-Exo具有促進(jìn)心肌細(xì)胞增殖、遷移以及抑制心肌細(xì)胞凋亡的作用,有望成為心臟再生修復(fù)的新策略。
中流細(xì)胞通常過(guò)表達(dá)正常細(xì)胞中不存在的表面特異性受體,這些受體可能是其外泌體靶向中流細(xì)胞的基礎(chǔ)。利用中流細(xì)胞外泌體對(duì)其表面特異性受體的識(shí)別,有望將zhiliao藥物靶向傳遞到病變細(xì)胞,與普通細(xì)胞分泌的外泌體相比,可達(dá)到更高的靶向效率。臨床上常見(jiàn)的肺ai病理學(xué)類型是非小細(xì)胞肺ai,其中A549細(xì)胞呈鱗狀,含有高度不飽和脂肪酸,能夠有效維持細(xì)胞膜完整性,可較好地模擬中流生長(zhǎng),因此被廣fan用于體外研究。以A549中流細(xì)胞外泌體為載體,采用電穿孔法包載多烯紫杉醇,構(gòu)建一種句有肺ai主動(dòng)靶向性的遞藥系統(tǒng),并采用響應(yīng)面法優(yōu)化了其載藥工藝。外泌體載阿霉素在小鼠體內(nèi)的耐受量高于游離的阿霉素,增加了阿霉素對(duì)乳腺ai和卵巢ai的zhiliao指數(shù)。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——超高速離心法。其中超高速離心法是常用的,該方法是被譽(yù)為分離外泌體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。因操作簡(jiǎn)單,不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,并且成本相對(duì)較低而被廣fan使用。但是該方法耗時(shí)、產(chǎn)率低,得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,其中主要的問(wèn)題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,但也會(huì)有其他的囊泡、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。所以得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都不高。裝載紫杉醇的外泌體可有效抑制胰腺ai細(xì)胞的增殖。山東細(xì)胞樣本外泌體載藥大概費(fèi)用
在中風(fēng)大鼠中,裝載豐富miR-133b的間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體能促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞釋放外泌體。北京外泌體載藥實(shí)驗(yàn)服務(wù)
外泌體直接載yao方式包括皂苷處理法、孵育法、凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法等。皂苷處理法指共培養(yǎng)外泌體、藥物和皂苷溶液,然后通過(guò)透析膜、色譜柱純化得到載藥外泌體的方法。孵育法指藥物和外泌體在適宜的條件下共培養(yǎng)。凍融循環(huán)法是經(jīng)過(guò)冷凍、融化過(guò)程使外泌體包裹藥物。超聲法利用超聲波使藥物進(jìn)入外泌體中,擠出法利用擠出機(jī)實(shí)現(xiàn)外泌體載帶藥物。其中皂苷輔助藥物裝載方法是直接載yao方式中常用的一種載yao方式。上述方法也存在一些缺點(diǎn):孵育法操作簡(jiǎn)單,但載藥量低;凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法對(duì)儀器的要求高,且可能會(huì)破壞外泌體的質(zhì)膜結(jié)構(gòu)造成藥物泄露,終造成載藥量不理想。北京外泌體載藥實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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