外泌體載藥系統(tǒng)中外泌體提取的方法有很多種,有差速超高速離心法、超濾法、試劑盒提取方法、磁珠免疫法等,但單一外泌體分離方法都有其不可解決的弊端,而聯(lián)合不同的分離方法可得到更純凈、更豐富的外泌體。在裝載連翹酯苷A(FTA)的外泌體遞藥系統(tǒng)的功效中的研究中,采用了差速離心法和超濾法提取外泌體,先使用超濾管濃縮細(xì)胞上清液,富集外泌體,再使用超高速離心提取外泌體,縮減了離心次數(shù)和時(shí)間,提高了外泌體提取效率,且整個(gè)過程簡單易操作。同時(shí)采用低溫超聲孵育的方法制備FTA-Exos遞藥系統(tǒng)。載帶茚地那韋的外泌體給藥系統(tǒng)用于ai滋病相關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的zhiliao。福建外泌體載藥紫杉醇
外泌體直接載yao方式包括皂苷處理法、孵育法、凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法等。皂苷處理法指共培養(yǎng)外泌體、藥物和皂苷溶液,然后通過透析膜、色譜柱純化得到載藥外泌體的方法。孵育法指藥物和外泌體在適宜的條件下共培養(yǎng)。凍融循環(huán)法是經(jīng)過冷凍、融化過程使外泌體包裹藥物。超聲法利用超聲波使藥物進(jìn)入外泌體中,擠出法利用擠出機(jī)實(shí)現(xiàn)外泌體載帶藥物。其中皂苷輔助藥物裝載方法是直接載yao方式中常用的一種載yao方式。上述方法也存在一些缺點(diǎn):孵育法操作簡單,但載藥量低;凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法對(duì)儀器的要求高,且可能會(huì)破壞外泌體的質(zhì)膜結(jié)構(gòu)造成藥物泄露,終造成載藥量不理想。江西細(xì)胞樣本外泌體載藥價(jià)格比較口服遞送裝載紫杉醇(PAC)的外泌體作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生長明顯受到抑制。
靜脈注射修飾RVG神經(jīng)元靶向肽的外泌體能透過血腦屏障,用于阿爾茨海默癥的zhiliao。Alaarez-Erviti等通過基因工程技術(shù)使DC細(xì)胞分泌的外泌體膜上連接一個(gè)特異性RVG神經(jīng)元靶向肽,從而使包載siRNA的外泌體順利地靶向到腦中特定的神經(jīng)細(xì)胞。研究結(jié)果顯示,負(fù)載siRNA的RVG-EXOs可以使阿爾茨海默癥相關(guān)BACE1mRNA下調(diào)61%,蛋白表達(dá)下調(diào)62%,明顯降低β-淀粉樣肽1-42水平。之后,COOper等利用相同的技術(shù)遞送α-突觸核dan白siRNA到轉(zhuǎn)基因模型鼠中,致使大鼠中腦、紋狀體、皮質(zhì)層區(qū)域mRNA水平分別下調(diào)49%、56%、50%,相應(yīng)的α-突觸核dan白水平下調(diào)32%、26%、30%,而且能有效地抑制中腦區(qū)域α-突觸核dan白的聚集,展示了外泌體用于腦部疾病zhiliao的巨大潛力。
外泌體載藥系統(tǒng)一直是眾多研究者關(guān)注的焦點(diǎn)。外泌體作為細(xì)胞-細(xì)胞間交流的“運(yùn)載工句”,外泌體在正常及疾病下都發(fā)揮著不可忽視的功能。利用抗ai癥藥物進(jìn)行中流zhiliao是抑制中流的一個(gè)重要方法,目前抗ai癥藥物的運(yùn)載存在著種種挑戰(zhàn),主要體現(xiàn)在:(1)抗ai癥藥物的疏水性;(2)抗ai癥藥物的毒性以及非靶向性;(3)易被人體qing除,體內(nèi)循環(huán)的半衰期很短等。采用外泌體運(yùn)輸抗ai癥藥物,可以提高藥物體系的水溶性,降低藥物對(duì)人體的毒性以及避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉從而延長其循環(huán)時(shí)間。外泌體裝載小分子藥物的方法有很多,主要有被動(dòng)孵育、超聲、電穿孔及供體細(xì)胞載藥等。
外泌體來源于機(jī)體細(xì)胞,可作為天然的生物載體,能進(jìn)行長距離的細(xì)胞間物質(zhì)輸運(yùn)和信號(hào)傳遞。這種細(xì)胞間的通訊在機(jī)體的生理和病理過程中至關(guān)重要,已被用于多種疾病和中流的zhiliao與組織損傷修復(fù)等疾病的研究。主要方法分為 2種:一是某些特殊細(xì)胞分泌的外泌體包含有zhiliao作用的有效分子,可將外泌體作為生物藥物應(yīng)用于免疫抑制和活化、血管生成以及組織損傷修復(fù)等;另一則是利用工程化改造后的外泌體作為藥物載 體將zhiliao藥物運(yùn)送至zhiliao部位。在小鼠模型中利用外泌體裝載姜黃素和過氧化氫酶可證明其在神經(jīng)保護(hù)方面的作用。河北整體實(shí)驗(yàn)外泌體載藥實(shí)驗(yàn)價(jià)格比較
對(duì)于水溶性的藥物可用電穿孔的方法將藥物載入外泌體中。福建外泌體載藥紫杉醇
研究證明了外泌體運(yùn)載siRNA進(jìn)行RNAizhiliao的潛力。在他們的研究中,首先通過化學(xué)轉(zhuǎn)染法將RAD51siRNA裝載入源于HeLa細(xì)胞和腹水的外泌體,隨后在體外成功地將siRNA運(yùn)輸至目標(biāo)細(xì)胞。結(jié)果顯示,這種外泌體負(fù)載RAD51siRNA的抑制效果與直接化學(xué)轉(zhuǎn)染目標(biāo)細(xì)胞的抑制效果相當(dāng),但由于化學(xué)轉(zhuǎn)染外泌體后不能將外泌體和轉(zhuǎn)染劑很好的分離,在應(yīng)用外泌體時(shí),無法說明是外泌體還是轉(zhuǎn)染劑在發(fā)揮作用。于是研究者又利用電穿孔使RAD51siRNA載入到外泌體中。結(jié)果顯示,相比于外泌體與siRNA的混合物(未經(jīng)載藥處理),經(jīng)電穿孔載siRNA后的外泌體可以有效抑制RAD51。并且由于RAD51的抑制會(huì)帶來人ai細(xì)胞的大量死亡,因而通過外泌體運(yùn)載siRNA的方法在ai癥zhiliao方面有著誘人的前景。福建外泌體載藥紫杉醇