miRNA的運載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運載miRNA的優(yōu)良載體,并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細胞的方法,使外泌體載有anti-miR-9。在進行間充質(zhì)細胞和多形性成角質(zhì)細胞瘤(GBM)細胞間anti-miR-9傳遞的實驗時,發(fā)現(xiàn)兩種細胞不jin可以通過縫隙連接介導(dǎo)的細胞間通訊(GJIC)也可以通過外泌體傳遞anti-miR-9。且anti-miR-9降低兩種GBM細胞(U87和T98G)對中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實現(xiàn),而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9,顯示出外泌體在運載miRNA進行基因zhiliao時的潛力。外泌體具有對自身中流的靶向能力,作為載體傳遞藥物可以增加中流部位的藥物濃度。福建動物血液樣本外泌體載藥實驗服務(wù)
有實驗將an-timiR-9載入到間充質(zhì)干細胞中,使其分泌的外泌體包載有an-timiR-9。通過體外細胞傳遞實驗發(fā)現(xiàn),間充質(zhì)干細胞可以通過外泌體遞送an-timiR-9到耐藥性多形性膠質(zhì)細胞瘤(GBM)中,致使耐藥性細胞株中的MDRI基因下調(diào),P-糖蛋白表達量減少,從而增加耐藥性細胞株對替莫唑胺的化學(xué)敏感性,有效地抑制耐藥性多形性膠質(zhì)細胞瘤的增殖。研究人員采用外泌體對GBM進行zhiliao不只停留在細胞實驗上,相關(guān)的體內(nèi)研究也已有報道。研究者將高表達miR-146b間充質(zhì)干細胞源性的外泌體用于zhiliaoGBM的移植瘤模型中,結(jié)果表明載有miR-146b的外泌體能有效地抑制中流的生長。福建動物細胞樣本外泌體載藥實驗參考價格外泌體可作為天然的藥物運載系統(tǒng),將zhiliao分子、藥物等運送至靶細胞,進而發(fā)揮zhiliao作用。
補陽還五湯 (BYHWD) 臨床多用于中風(fēng)、冠xin病等心腦xue管疾病, 以口服用藥為主, 但有效物質(zhì)吸收性較差。有研究利用大鼠MSC來源外泌體作為BYHWD有效成分的載體, 在采用線栓法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型中進行腹膜注射, 結(jié)果顯示負載BYHWD的外泌體組能激huo血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF), 上調(diào)miR-126表達, 并抑制miR-221/222表達, 促進缺血區(qū)新生血管的形成, 減輕缺血性腦損傷。其中miR-126能通過PI3K信號通路激huoVEGF與成纖維細胞生長因子從而介導(dǎo)血管生成, 而miR-221/222句有抗血管生成的作用。說明負載BYHWD的外泌體能通過調(diào)節(jié)相應(yīng)miRNAs, 促進缺血區(qū)腦血管生成, 改善缺血癥狀。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——免疫親和層析法。利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進行分離的方法,主要用于生物大分子的分離、純化。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識別,這使得提取的外泌體純度高,但是產(chǎn)量低。分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法,從血漿和細胞上清中提取外泌體蛋白,結(jié)果表明,免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標記蛋白(Alix、CD9、CD63),同時,ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。外泌體對基因類藥物的裝載方式一般采用電穿孔法和化學(xué)轉(zhuǎn)染法。
與人工合成囊泡相比,外泌體雖然具有一定的靶向性,但由于其高度的復(fù)雜性和成分的多樣性,作為載藥體的應(yīng)用仍缺乏普遍靶向性,可能產(chǎn)生脫靶效應(yīng),誘發(fā)不良反應(yīng);而且可溶性低,循環(huán)半衰期短,因此針對外泌體表面標志物的改造以獲得靶向性一直是研究熱點;此外,也有大量研究針對內(nèi)容物進行改造,近年來主要以外源性的抗中流藥物、核酸分子、轉(zhuǎn)錄因子和酶類,內(nèi)源性母乳多糖、低聚糖、多肽等為“貨物”,將它們載入外泌體后運送到標靶位置。對母乳外泌體進行載藥改造,既保留了外泌體本身的特性,同時充分利用了功能性內(nèi)外源物質(zhì),又可進一步優(yōu)化外泌體的靶向性與穩(wěn)定性,有望為zhiliao新生兒相關(guān)疾病提供新的思路和方法。MHS來源外泌體裝載連翹苷(phil)后粒徑稍微增大。福建動物細胞樣本外泌體載藥實驗參考價格
過氧化氫酶載入外泌體后在炎癥大腦中的生物分布情況可以利用C57BL/6雌性小鼠來研究驗證。福建動物血液樣本外泌體載藥實驗服務(wù)
通心絡(luò)膠囊是心腦血管病常用藥, 句有yi氣活xue, 通絡(luò)止痛的功效。選擇將通心絡(luò)膠囊處理過的人心肌細胞 (HCM) 與人心肌微血管內(nèi)皮細胞 (HCMECs) 缺氧/復(fù)氧模型共培養(yǎng), 結(jié)果顯示HCMECs的凋亡水平明顯下降, 而加入外泌體抑制劑GW4869后該作用消失, 證明HCM來源外泌體可作為通心絡(luò)膠囊有效成分的載體。研究者還發(fā)現(xiàn)通心絡(luò)膠囊處理過的HCM能提高HCMECs中p70s6k1和GSK-3β的磷酸化水平, 說明通心絡(luò)膠囊可能通過HCM來源的外泌體激huo再灌注損傷挽救激酶通路, 進而減少HCMECs的缺氧/復(fù)氧損傷。福建動物血液樣本外泌體載藥實驗服務(wù)