外泌體(exosome)是一種由活細胞分泌的,直徑約為40~160nm的具有雙層膜結構的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細胞包含的生物活性物質,如DNA、miRNAs、mRNA、長鏈非編碼RNA(LncRNA)、酶、蛋白質和細胞代謝物等。外泌體在細胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對于外泌體的研究涉及包括瘤的發(fā)生和發(fā)展、侵襲轉移機制、瘤診斷標志物以及藥物傳遞系統(tǒng)等諸多方面。外泌體是一個高度異質性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區(qū)分。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。外泌體大小不均的原因可能是由于MVB的限制膜不均勻內陷,導致流體和固體的總含量不同。上海血漿外泌體western blot
除運輸藥物進行疾病zhiliao之外,外泌體還能進行免疫zhiliao,外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao。進行免疫調節(jié)時,外泌體通常運載TGF-β1、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質。在這些研究中,分泌外泌體的母代細胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹突細胞或者中流細胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤細胞作為母代細胞,通過熱處理的方式使淋巴瘤細胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子,如主要組織相容性復合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等,與未熱處理的鼠B淋巴瘤細胞分泌的外泌體相比,熱處理后分泌的外泌體可以增強對T細胞的激huo能力,從而增強這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力。黑龍江胸水外泌體鑒定從外泌體中篩選的生物標志物,可用于疾病的診斷、預后及治理。
近年來,生物醫(yī)學領域上,干細胞在防病抗病、延緩衰老、組織再生等方面發(fā)揮著巨大的潛力,成為人們關注的熱點。隨著研究的不斷深入,新的風口再次出現(xiàn),它那就是——外泌體。外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)?,F(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。外泌體中含有豐富的蛋白質和遺傳物質DNA以及RNA等。它的存在,就像是生物界的郵差,可以在細胞間運輸和轉移生物活性分子,是細胞間通訊交流的載體。研載生物科技(上海)有限公司。
卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達譜有明顯差異,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標志物。多項研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數ai癥的多種病理條件下過度表達。尿液外泌體來源于泌尿系統(tǒng)相關的各種細胞,包括腎小球足細胞、腎小管細胞和膀胱等,因此尿液外泌體數目、形態(tài)和生化性質的改變往往反映泌尿系統(tǒng)疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進行轉錄組分析,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測ai癥患者狀態(tài)的潛力。干細胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用。
血清和血漿為常規(guī)檢測樣本,具有微創(chuàng)取樣的優(yōu)點,是診斷疾病的理想樣本。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評價提供潛在標志物。血液外泌體來源的疾病標志物主要包括蛋白質和miRNA兩類。Melo等發(fā)現(xiàn)利用胰腺ai細胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠實現(xiàn)胰腺ai早期診斷,利用該方法對血清中包含GPC1的外泌體進行檢測,能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區(qū)分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。外泌體功能取決于來源的細胞,可參與到機體的免疫應答、細胞遷移、細胞分化、中流侵襲等方面。廣州海洋生物外泌體
外泌體中含有豐富的蛋白質和遺傳物質DNA以及RNA等。上海血漿外泌體western blot
獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動態(tài)光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應用于外泌體顆粒數目和粒徑分布的測量,但兩種方法也各有不足。動態(tài)光散射法中散射光強度依賴于顆粒質量(體積),混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴重影響測量結果,因此動態(tài)光散射法更適用于單分散體系。而且動態(tài)光散射法所得的結果強烈依賴于所應用的數學算法。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進行檢測時,為了得到準確的濃度和粒徑信息,需要根據所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準,操作繁瑣。受檢測靈敏度所限,納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm~1μm的顆粒,粒徑小于50nm的外泌體無法檢測。除此之外,兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運動進行分析,難以區(qū)分合成的納米材料、大蛋白質聚合體和生物囊泡。上海血漿外泌體western blot