選用來源于生物的天然藥物載體細(xì)胞外泌體作為DATS的遞送載體,具有多種優(yōu)勢:首先,外泌體可以來源于患者自身的細(xì)胞,在藥物傳遞過程中減少了免疫原性;其次,外泌體作為一種膜結(jié)構(gòu)載體,與脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)類似,能夠通過其表面的膜蛋白與靶細(xì)胞膜融合, 將其負(fù)載的藥物直接運送到受體細(xì)胞中,避免了細(xì)胞吞噬-溶酶體途徑帶來的藥物降解及細(xì)胞毒性等問題;此外,不同來源的外泌體因其供體細(xì)胞的差異性而呈現(xiàn)出不同的特性。在使用外泌體裝載DATS來研究抗中流轉(zhuǎn)移作用中選用外泌體的供體細(xì)胞為肺轉(zhuǎn)移中流細(xì)胞B16BL6,研究表明,中流細(xì)胞外泌體的產(chǎn)生和釋放比正常細(xì)胞明顯升高,并帶有宿主細(xì)胞獨特的性質(zhì)。使用ADSC外泌體裝載姜黃素可增強(qiáng)抗肝ai的效應(yīng)。河南整體實驗外泌體載藥實驗價格比較
外泌體的脂質(zhì)雙分子膜可以保護(hù)其在血液循環(huán)中不被降解,但是這種膜結(jié)構(gòu)以及其內(nèi)含各種豐富的物質(zhì),使得外泌體載藥變得困難。外泌體只有保證膜結(jié)構(gòu)的完整性,才能不引起免疫反應(yīng),不被MPS吞噬。目前,將藥物載入外泌體的方法主要有兩種:(1)前轉(zhuǎn)載,在分離外泌體之前,將藥物與母代細(xì)胞共培養(yǎng)和對母代細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染,可以讓母代細(xì)胞分泌含有藥物的外泌體; 主要是用轉(zhuǎn)染劑將“貨物”轉(zhuǎn)染進(jìn)入親代細(xì)胞(或者將“貨物與親代細(xì)胞孵育”),然后收集培養(yǎng)基,獲得載有“貨物”的外泌體的過程。該方法的主要問題是合適有效的轉(zhuǎn)染試劑很少,且轉(zhuǎn)染試劑無法完全去除,導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率低,無法排除轉(zhuǎn)染試劑對實驗的影響。(2)后轉(zhuǎn)載,分離出外泌體之后,將藥物載入外泌體。遼寧外泌體載藥實驗大概費用可以利用小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤模型來驗證CD—UPRT載入外泌體后在體內(nèi)的抗中流作用。
天然來源的外泌體含有眾多內(nèi)源性脂質(zhì)、蛋白及核酸類物質(zhì),其自身具有一定的成藥潛力,例如間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域獲得了巨大成功。當(dāng)外泌體用作遞送載體時,一般還需人為裝載藥物。理想的載yao方法不僅要實現(xiàn)較高的載藥效率,還應(yīng)保留外泌體和藥物的功能和完整性。目前,在不破壞外泌體膜完整性的情況下將藥物有效載入到外泌體中仍是一個巨大挑戰(zhàn)。現(xiàn)有的載yao方法可分為分泌前載藥法和分泌后載藥法。分泌前載藥法通常將親代細(xì)胞與藥物共孵育(一般需要加轉(zhuǎn)染試劑),使藥物進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中的藥物通過主動或被動的方式被分選到外泌體中,然后通過合適的提取方法即可獲得載藥的外泌體。分泌后載yao方法是目前常用的外泌體載藥策略,通常需要先分離提純外泌體,再將藥物載入其中。
采用外泌體作為藥物載體，制備一種裝載連翹酯苷A(FTA)的外泌體遞藥系統(tǒng)。細(xì)胞攝取實驗的結(jié)果表明，A549細(xì)胞可以攝取FTA-Exos，并且能維持長時間的穩(wěn)定，延長了半衰期，明顯的提高了連翹酯苷A的生物利用度，為研究連翹酯苷A體外抗中流轉(zhuǎn)移作用打下基礎(chǔ)。經(jīng)典劃痕實驗結(jié)果表明，F(xiàn)TA-Exos組對于A549細(xì)胞的遷移抑制率高達(dá)90%以上，明顯高于連翹酯苷A組遷移抑制率，證實含藥外泌體具有更好的體外抑制A549細(xì)胞遷移效果。成功建立了FTA-Exos藥物遞送系統(tǒng)，制備的FTA-Exos性質(zhì)穩(wěn)定優(yōu)越，明顯提高連翹酯苷A的生物利用度，并具有更好的抑制A549細(xì)胞遷移作用。外泌體外源性載yao方式是將外泌體從供體細(xì)胞中分離純化，后將藥物通過適宜的方法導(dǎo)入外泌體內(nèi)實現(xiàn)載藥。
外泌體載藥系統(tǒng)的優(yōu)勢：1首先，外泌體天然的生物學(xué)起源為細(xì)胞內(nèi)源性zhiliao因子的產(chǎn)生和裝載提供了特有的機(jī)會。此時，zhiliao藥物、寡核苷酸和納米粒子等可被送入細(xì)胞，隨后重新包裝成分泌的囊泡。利用細(xì)胞產(chǎn)生、裝載和分泌釋放載藥外泌體使zhiliao藥物裝載過程得到簡化，為特定位點（如內(nèi)腔和囊泡膜）的藥物裝載提供了基礎(chǔ)，并且還使不易裝載的物質(zhì)句有更高的吸收效率和傳遞效率。2其次，外泌體可穿透某些生物屏障如血腦屏障，到達(dá)zhiliao靶點進(jìn)行給藥。3體內(nèi)某些外泌體句有很強(qiáng)的穩(wěn)定性，可避免被巨噬細(xì)胞吞噬和溶酶體所降解，為體內(nèi)外泌體載藥系統(tǒng)的長時間循環(huán)和長時間暴露于炎癥等刺激環(huán)境時提供保護(hù)。MHS來源外泌體裝載連翹苷（phil）后粒徑稍微增大。河北樣本外泌體載藥參考價
載藥外泌體對中流細(xì)胞株的抑制作用有劑量依賴性。河南整體實驗外泌體載藥實驗價格比較
小分子siRNA、miRNA常作為基因zhiliao的核酸藥物，但其穩(wěn)定性差，極易被體內(nèi)的酶降解，限制了它在臨床中的運用。而外泌體的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)可以保護(hù)基因類藥物，避免其降解。其次，外泌體能通過膜融合的方式直接將包載的基因類藥物釋放到受體細(xì)胞中，實現(xiàn)更高的投遞效率。許多研究證明外泌體能成功遞送小分子siRNA、miRNA。通過體外實驗證明，來源于血漿的外泌體可以有效地傳遞siRNA到單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，使MAKP1基因沉默。利用類似的方法遞送RAD51- siRNA和RAD52－siRNA到HELA細(xì)胞和纖維素肉瘤細(xì)胞中從而誘導(dǎo)兩個基因的沉默，研究證明RAD51基因的沉默可以造成中流細(xì)胞大量的凋亡，因而通過外泌體負(fù)載siRNA用于中流疾病方面的zhiliao句有廣闊的前景。河南整體實驗外泌體載藥實驗價格比較