天津細(xì)胞外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-18

疏水性的小分子藥物如紫杉醇、紫衫酚、阿霉素(DOX)、姜黃素等可以通過與分離純化的外泌體共孵育,將藥物負(fù)載到外泌體中。這種方法的載藥量往往較低,通過高效液相色譜檢測(cè)紫衫醇的載藥量一般為7.2%,DOX的載藥量一般為11.2%。為了達(dá)到高效負(fù)載藥物的目的,研究人員采用了電穿孔、擠出、輔助超聲、低滲透析等一系列載yao方式將疏水性卟啉化合物載入到外泌體中。研究結(jié)果顯示,電穿孔法、擠出、超聲、低滲透析等一系列載yao方式都可以提高卟啉化合物的載藥量。尤其是超聲和低滲透析方法可以提高卟啉化合物的載藥量到11倍。藥物載入到外泌體中的方式可分為兩種,即外源性載yao方式和內(nèi)源性載yao方式。天津細(xì)胞外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用

外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——尺寸排阻色譜法。尺寸排阻色譜法時(shí)外泌體提取的一種方法,利用分子篩理論,開始是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要很大的離心力,從而保證了外泌體的完整性。對(duì)比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白,結(jié)果顯示, 尺寸排阻色譜法得到的外泌體的蛋白豐度高于超高速離心法。這些基于過濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了可能。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來的一種方法,超濾一般被認(rèn)為是外泌體分離過程中的一個(gè)準(zhǔn)備過程,通過超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì)。不過連續(xù)的超濾可以分離出外泌體,和超高速離心相比,超濾不需要特殊的設(shè)備就可以較短時(shí)間內(nèi)分離出外泌體。但是,超濾膜對(duì)外泌體的黏附作用會(huì)降低外泌體的產(chǎn)量,并且超濾過程中施加的外力可能會(huì)使外泌體變形或者破裂。河南樣本外泌體載藥參考價(jià)過氧化氫酶載入外泌體后在炎癥大腦中的生物分布情況可以利用C57BL/6雌性小鼠來研究驗(yàn)證。

外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——超高速離心法。其中超高速離心法是常用的,該方法是被譽(yù)為分離外泌體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。因操作簡(jiǎn)單,不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,并且成本相對(duì)較低而被廣fan使用。但是該方法耗時(shí)、產(chǎn)率低,得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,其中主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,但也會(huì)有其他的囊泡、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。所以得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都不高。

補(bǔ)陽還五湯 (BYHWD) 臨床多用于中風(fēng)、冠xin病等心腦xue管疾病, 以口服用藥為主, 但有效物質(zhì)吸收性較差。有研究利用大鼠MSC來源外泌體作為BYHWD有效成分的載體, 在采用線栓法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型中進(jìn)行腹膜注射, 結(jié)果顯示負(fù)載BYHWD的外泌體組能激huo血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF), 上調(diào)miR-126表達(dá), 并抑制miR-221/222表達(dá), 促進(jìn)缺血區(qū)新生血管的形成, 減輕缺血性腦損傷。其中miR-126能通過PI3K信號(hào)通路激huoVEGF與成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子從而介導(dǎo)血管生成, 而miR-221/222句有抗血管生成的作用。說明負(fù)載BYHWD的外泌體能通過調(diào)節(jié)相應(yīng)miRNAs, 促進(jìn)缺血區(qū)腦血管生成, 改善缺血癥狀。外泌體載藥藥物載入方式多種多樣,包括被動(dòng)方式和主動(dòng)方式兩類。

電穿孔法時(shí)外泌體載藥的方法的一種,因參數(shù)容易控制,多種藥物載入外泌體都可以使用該方法。Wang等人研究了胞外囊泡作為小RNA的靶向遞送系統(tǒng),利用電穿孔法將siRNA/microRNA載入核酸適配體AS1411(AS1411是一種靶向中流細(xì)胞高表達(dá)核仁素的核酸適配體)修飾的囊泡中,然后通過外泌體將siRNA/microRNA靶向遞送到乳腺ai組織。由于AS1411和核仁素的的結(jié)合達(dá)到瘤靶向(核仁素在乳腺ai細(xì)胞表面高表達(dá)),這種靶向let-7miRNA的囊泡可在體外傳遞到人乳腺aiMDA-MB-231細(xì)胞。靜脈注射載有Cy5熒光標(biāo)記的miRNAlet-7的AS1411囊泡,可以選擇性靶向荷瘤小鼠中的中流部位,并抑制中流的生長(zhǎng),而且修飾的囊泡耐受性良好,沒有顯示明顯的非特異性副作用或免疫應(yīng)答反應(yīng)。外泌體具有對(duì)自身中流的靶向能力,作為載體傳遞藥物可以增加中流部位的藥物濃度。山東動(dòng)物細(xì)胞樣本外泌體載藥參考價(jià)

裝載連翹苷(phil)的MHS來源外泌體對(duì)A549細(xì)胞遷移能力有較為明顯的抑制作用。天津細(xì)胞外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用

?外泌體載藥在腦血管疾病zhiliao中的應(yīng)用:1缺血性腦卒中(IS)是一種常見的腦血管疾病研究顯示外泌體負(fù)載CircRNASCMH1傳遞增強(qiáng)了IS模型的神經(jīng)可塑性,抑制了膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性和外周免疫細(xì)胞的浸潤(rùn),促進(jìn)了IS后的功能恢復(fù)。2腦出血(ICH)是卒中句破壞性的亞型。研究發(fā)現(xiàn)裝載miR-21的MSCs外泌體可以為ICH的zhiliao提供一種新的方法,減輕ICH后繼發(fā)性損傷引起的神經(jīng)元死亡和腦血腫。3腦動(dòng)脈粥樣ying化是腦血管疾病的主要原因。參與動(dòng)脈粥樣ying化的大多數(shù)細(xì)胞可以產(chǎn)生外泌體。因此,外泌體介導(dǎo)的miRNA或反義miRNA傳遞可被視為zhiliao腦動(dòng)脈粥樣ying化的工句。4研究發(fā)現(xiàn)在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤(IA)的小鼠模型中靜脈應(yīng)用MSC外泌體可將IA破裂率降低39%。天津細(xì)胞外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用