細胞自噬整體實驗

來源: 發(fā)布時間:2022-05-06

自噬與凋亡合作方式在現(xiàn)有研究報道中較為多見。該種情況下,自噬與凋亡的調(diào)控目標都是促進細胞死亡。合作方式分為3種:(1)各自同步引發(fā)細胞死亡;(2)一種為主,另一為輔;(3)一方功能缺陷情況下,另一方替補誘導細胞死亡。許多誘導凋亡的刺激常常也會誘導自噬,比如神經(jīng)酰胺調(diào)整乳腺病和結(jié)腸病中均發(fā)現(xiàn)凋亡與自噬同時上調(diào)。在調(diào)整T淋巴細胞的臨床試驗中也發(fā)現(xiàn)二者被同時喚醒,藥物氯碘喹啉通過擾亂mTOR信號通路誘導白血病細胞和骨髓瘤細胞發(fā)生自噬性死亡和凋亡;靶向敲除自噬相關蛋白ATG7或用自噬阻止劑3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)會阻止caspase喚醒,減少細胞凋亡;許多情況下,自噬誘導細胞死亡的潛力被凋亡所阻止,但它會在凋亡功能缺陷時發(fā)揮關鍵作用。依托泊苷、毒胡蘿卜內(nèi)酯等處理的凋亡缺陷Bax/Bak?/?的小鼠胚胎成纖維細胞中發(fā)現(xiàn)細胞自噬上調(diào),特異性阻止劑阻止自噬后細胞存活率明顯上調(diào)。上述情況下,自噬和凋亡通過共同作用、互補合作,或替補機制共同引發(fā)細胞死亡。白藜蘆醇對神經(jīng)細胞、心肌細胞、內(nèi)皮細胞自噬等都有調(diào)節(jié)作用。細胞自噬整體實驗

伴隨著衰老,造血干細胞(HSC)逐漸會失去造血再生的能力,其結(jié)果是導致疾病的發(fā)生。自噬是細胞的一種生理過程,實際上與健康、長壽和保護HCS免于應激有關。如果自噬功能失去,其結(jié)果是導致線粒體堆積和代謝增強,進而加速粒細胞的分化,造成HSC表型失調(diào),降低其再生能力。實際上,在大部分正常衰老的大鼠中也會出現(xiàn)這一問題。然而,有大約1/3的衰老HSC表現(xiàn)為高自噬水平、低代謝速率和明顯的長期再生能力。這一點和年輕的HSC差不多。我們的結(jié)果顯示,自噬能夠明顯抑制HSC的代謝,能夠清理線粒體堆積,保持自我的再生能力。北京自噬Beclin1THC可通過抑制細胞自噬途徑改善Hhcy小鼠腦缺血損傷。

自噬分類:根據(jù)細胞物質(zhì)運到溶酶體內(nèi)的途徑不同,自噬分為以下幾種。①大自噬:由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體或細胞質(zhì)膜等來源的膜包繞待降解物形成自噬體,然后與溶酶體融合并降解其內(nèi)容物;②小自噬:溶酶體的膜直接包裹長壽命蛋白等,并在溶酶體內(nèi)降解;③分子伴侶介導的自噬(chaperonemediatedautophagy,CMA):胞質(zhì)內(nèi)蛋白結(jié)合到分子伴侶后被轉(zhuǎn)運到溶酶體腔中,然后被溶酶體酶消化。CMA的底物是可溶的蛋白質(zhì)分子,在清理蛋白質(zhì)時有選擇性,而前兩者無明顯的選擇性。

氯喹及其衍生物羥基氯喹zhiliao小細胞肺ai、原位導管ai、原發(fā)性腎ai、乳腺ai等目前已經(jīng)進入臨床I期或II期研究階段, 但是關于抑制自噬zhiliao中流的觀點受到很多質(zhì)疑。首先, 沒有證據(jù)判斷氯喹是通過抑制溶酶體活性還是與溶酶體無關的其他作用發(fā)揮抗中流效應的。其次, 也有觀點認為自噬可能是化療過程中促進中流細胞死亡的機制。因為敲低自噬關鍵蛋白后阻礙了化療藥物誘導的細胞死亡。此外, 眾多證據(jù)顯示, 有些活化自噬的藥物同樣具有抗中流作用。用于預防家族性乳腺ai的他莫昔芬能夠誘導自噬活化。細胞自噬過程中損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小泡包裹后,送入溶酶體或液泡中進行降解并循環(huán)利用。

對不同的細胞,自噬的作用可能不同。相同的細胞在不同的外部因素作用時,自噬的作用可能不同。在病變發(fā)生的發(fā)展的不同階段,自噬的作用可能不同。病變生長的早期階段自噬增強,是由于此時病變的血管化作用不足,病細胞的營養(yǎng)供給有限,需要通過自噬為自身提供營養(yǎng)。病變進入發(fā)展階段后基因變異積累,使包括Beclin1在內(nèi)的眾多抑病基因失活,自噬活力降低。對單個細胞和對整個病變阻滯的作用可能不同。自噬功能不全的細胞易于壞死,但是壞死組織產(chǎn)生的細胞因子(包括部分生長因子)反而會促進病變的生長。自噬可清理受損線粒體,從而避免受損線粒體產(chǎn)生大量活性氧對DNA等遺傳物質(zhì)造成損傷進而致病。吉林細胞自噬Beclin1

當自噬體與溶酶體融合后,因GFP熒光的部分淬滅而以紅色斑點的形式表現(xiàn)出來。細胞自噬整體實驗

自噬的功能(1)饑餓應答時的作用,在肝臟或在培養(yǎng)細胞中,氨基酸的匱乏會誘導細胞產(chǎn)生自體吞噬,由自體吞噬分解大分子,產(chǎn)生在分解代謝和合成代謝過程中所必須的中間代謝物。(2)在細胞正常活動中的作用,如在動物的不正常發(fā)育、老化和分化過程中,自體吞噬負責降解正常的蛋白以重新組建細胞。盡管通常人們認為自體吞噬不具有選擇性,但是在某些病理和壓力條件下,通過自體吞噬能選擇性地隔離某些細胞器,如線粒體、過氧化物酶體等。(3)在某些組織中的特定功能,如黑質(zhì)的塞梅林神經(jīng)節(jié)中,多巴胺能神經(jīng)元中的神經(jīng)黑色素的合成就需要把細胞質(zhì)中的多巴胺醌用AV包被隔離起來。細胞自噬整體實驗