利用外泌體進(jìn)行體內(nèi)藥物遞送時必須考慮以下因素：①外泌體和細(xì)胞之間相互作用的模式是否與所遞送的zhiliao劑作用機(jī)制一致，是否會對所遞送的zhiliao劑功效有所影響；②外泌體廣fan參與了機(jī)體的生物過程，大量的外源性外泌體的存在可能會破壞內(nèi)源性外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊；③一些尚不明了甚至未知的機(jī)制可能會導(dǎo)致不良副作用，如外泌體表面蛋白質(zhì)的脫靶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，還有其他如ai基因和病毒miRNA，或朊病毒顆粒以及外泌體純化過程中未能去除的可溶性顆粒因子等物質(zhì)在外泌體中一起遞送，均有可能產(chǎn)生不良副作用。提示純化方案中采用嚴(yán)格的質(zhì)控與安全性分析使這些復(fù)雜的影響因素小化，對體內(nèi)和體外研究至關(guān)重要。外泌體作為藥物載體可以載帶多種蛋白質(zhì)，實現(xiàn)靶向給藥和穩(wěn)定酶活性等目的。湖南細(xì)胞外泌體載藥咨詢問價
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——免疫親和層析法。利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法,主要用于生物大分子的分離、純化。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識別,這使得提取的外泌體純度高,但是產(chǎn)量低。分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法,從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白,結(jié)果表明,免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix、CD9、CD63),同時,ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。湖南細(xì)胞外泌體載藥咨詢問價相同劑量的PTX，PTX-M1-Exos載藥體系和游離的PTX相比，對小鼠乳腺ai4T1的抑制率更高。
天然來源的外泌體含有眾多內(nèi)源性脂質(zhì)、蛋白及核酸類物質(zhì),其自身句有一定的成藥潛力,例如間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域獲得了巨大成功。當(dāng)外泌體用作遞送載體時,一般還需人為裝載藥物。理想的載yao方法不jin要實現(xiàn)較高的載藥效率,還應(yīng)保留外泌體和藥物的功能和完整性。目前,在不破壞外泌體膜完整性的情況下將藥物有效載入到外泌體中仍是一個巨大挑戰(zhàn)?，F(xiàn)有的載yao方法可分為分泌前載藥法和分泌后載藥法。分泌前載藥法通常將親代細(xì)胞與藥物共孵育(一般需要加轉(zhuǎn)染試劑),使藥物進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中的藥物通過主動或被動的方式被分選到外泌體中,然后通過合適的提取方法即可獲得載藥的外泌體。分泌后載yao方法是目前常用的外泌體載藥策略,通常需要先分離提純外泌體,再將藥物載入其中。
通心絡(luò)膠囊是心腦血管病常用藥, 句有yi氣活xue, 通絡(luò)止痛的功效。選擇將通心絡(luò)膠囊處理過的人心肌細(xì)胞 (HCM) 與人心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HCMECs) 缺氧/復(fù)氧模型共培養(yǎng), 結(jié)果顯示HCMECs的凋亡水平明顯下降, 而加入外泌體抑制劑GW4869后該作用消失, 證明HCM來源外泌體可作為通心絡(luò)膠囊有效成分的載體。研究者還發(fā)現(xiàn)通心絡(luò)膠囊處理過的HCM能提高HCMECs中p70s6k1和GSK-3β的磷酸化水平, 說明通心絡(luò)膠囊可能通過HCM來源的外泌體激huo再灌注損傷挽救激酶通路, 進(jìn)而減少HCMECs的缺氧/復(fù)氧損傷。外泌體載藥后可以繞開Ｐ－糖蛋白，明顯降低藥物進(jìn)入細(xì)胞后的外排作用。
姜黃素／外泌體可以明顯地減少由脂多糖引起的炎癥因子IL-6（白介素-6）和TNF-a（中流壞死因子－α）的釋放。在脂多糖引起的炎癥模型中，注射姜黃素／外泌體的小鼠組幾乎未發(fā)生死亡，而注射游離姜黃素藥物的小鼠組死亡率接近60％，注射姜黃素／脂質(zhì)體的小鼠組死亡率接近80％。這說明姜黃素／外泌體對脂多糖引起的感ran性休克有較好的zhiliao效果，從而提高了C57BL/6J模型鼠的存活率。研究者認(rèn)為，將外泌體作為姜黃素的載體時，可以增加Gr-1+細(xì)胞對姜黃素的攝取，從而句有更好的kang炎作用。HEK293FT來源外泌體與脂質(zhì)體融合為雜交外泌體，可裝載并傳遞靶向RunX2的CRISPR/Cas9系統(tǒng)至間充質(zhì)干細(xì)胞中。安徽細(xì)胞樣本外泌體載藥大概費用
載帶茚地那韋的外泌體給藥系統(tǒng)用于ai滋病相關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的zhiliao。湖南細(xì)胞外泌體載藥咨詢問價
外泌體載藥系統(tǒng)的性質(zhì)評估：1對外泌體進(jìn)行一般性質(zhì)評估的方法已有多種，包括納米顆粒跟蹤分析技術(shù)(NTA)、動態(tài)光散射(DLS)、流式細(xì)胞術(shù)、原子力顯微技術(shù)(AFM)、透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM)等。2細(xì)胞實驗：將載藥外泌體添加到相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，通過培養(yǎng)觀察、檢測表達(dá)物或統(tǒng)計細(xì)胞凋亡率來驗證載藥外泌體與靶細(xì)胞的親和力、藥理作用并分析其作用機(jī)制。3動物實驗：不jin可驗證載藥外泌體的體內(nèi)藥理作用，還可研究其全部或部分藥動學(xué)參數(shù)。與細(xì)胞實驗比較，動物實驗考慮內(nèi)環(huán)境、體溫、免疫qing除等各種因素對載藥外泌體的影響，同時還考慮個體差異的影響，從而得出更句臨床意義的結(jié)論。湖南細(xì)胞外泌體載藥咨詢問價