湖南動物組織樣本外泌體載藥實驗咨詢問價

來源: 發(fā)布時間:2022-04-17

外泌體直接載yao方式包括皂苷處理法、孵育法、凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法等。皂苷處理法指共培養(yǎng)外泌體、藥物和皂苷溶液,然后通過透析膜、色譜柱純化得到載藥外泌體的方法。孵育法指藥物和外泌體在適宜的條件下共培養(yǎng)。凍融循環(huán)法是經(jīng)過冷凍、融化過程使外泌體包裹藥物。超聲法利用超聲波使藥物進(jìn)入外泌體中,擠出法利用擠出機(jī)實現(xiàn)外泌體載帶藥物。其中皂苷輔助藥物裝載方法是直接載yao方式中常用的一種載yao方式。上述方法也存在一些缺點:孵育法操作簡單,但載藥量低;凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法對儀器的要求高,且可能會破壞外泌體的質(zhì)膜結(jié)構(gòu)造成藥物泄露,終造成載藥量不理想??诜f送裝載紫杉醇(PAC)的外泌體作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生長明顯受到抑制。湖南動物組織樣本外泌體載藥實驗咨詢問價

選用來源于生物的天然藥物載體細(xì)胞外泌體作為DATS的遞送載體,具有多種優(yōu)勢:首先,外泌體可以來源于患者自身的細(xì)胞,在藥物傳遞過程中減少了免疫原性;其次,外泌體作為一種膜結(jié)構(gòu)載體,與脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)類似,能夠通過其表面的膜蛋白與靶細(xì)胞膜融合, 將其負(fù)載的藥物直接運(yùn)送到受體細(xì)胞中,避免了細(xì)胞吞噬-溶酶體途徑帶來的藥物降解及細(xì)胞毒性等問題;此外,不同來源的外泌體因其供體細(xì)胞的差異性而呈現(xiàn)出不同的特性。在使用外泌體裝載DATS來研究抗中流轉(zhuǎn)移作用中選用外泌體的供體細(xì)胞為肺轉(zhuǎn)移中流細(xì)胞B16BL6,研究表明,中流細(xì)胞外泌體的產(chǎn)生和釋放比正常細(xì)胞明顯升高,并帶有宿主細(xì)胞獨特的性質(zhì)。山東動物血液樣本外泌體載藥實驗參考價格許多抗ai藥物、基因藥物及抗yan藥物均可載入外泌體中。

間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體(MSC-Exo)在外泌體載藥中作為藥物遞送的載體具有獨特優(yōu)勢。目前臨床上普遍使用MSCs的原代細(xì)胞,雖然其可以產(chǎn)生大量的外泌體,但是對于大規(guī)模生產(chǎn)來說,它的增殖能力有限,產(chǎn)生的外泌體可能具有批次間的差異。Chen等人發(fā)現(xiàn),使用c-myc轉(zhuǎn)染人胚胎干細(xì)胞衍生的間充質(zhì)干細(xì)胞(hESC-MSC),能夠在不影響外泌體生產(chǎn)質(zhì)量的前提下,提高M(jìn)SCs的增殖率,縮短生產(chǎn)時間。轉(zhuǎn)染的hESC-MSC能夠供應(yīng)毫克范圍內(nèi)的外泌體,為生產(chǎn)具有生物學(xué)效益的外泌體提供了一定的可行性。此外,還可以對外泌體進(jìn)行功能化修飾,進(jìn)一步增強(qiáng)外泌體的作用優(yōu)勢。外泌體的功能化修飾能夠延長外泌體的循環(huán)時間、增強(qiáng)外泌體在細(xì)胞質(zhì)的遞送效率和促使外泌體具有更強(qiáng)的靶向性。

電穿孔法時外泌體載藥的方法的一種,因參數(shù)容易控制,多種藥物載入外泌體都可以使用該方法。Wang等人研究了胞外囊泡作為小RNA的靶向遞送系統(tǒng),利用電穿孔法將siRNA/microRNA載入核酸適配體AS1411(AS1411是一種靶向中流細(xì)胞高表達(dá)核仁素的核酸適配體)修飾的囊泡中,然后通過外泌體將siRNA/microRNA靶向遞送到乳腺ai組織。由于AS1411和核仁素的的結(jié)合達(dá)到瘤靶向(核仁素在乳腺ai細(xì)胞表面高表達(dá)),這種靶向let-7miRNA的囊泡可在體外傳遞到人乳腺aiMDA-MB-231細(xì)胞。靜脈注射載有Cy5熒光標(biāo)記的miRNAlet-7的AS1411囊泡,可以選擇性靶向荷瘤小鼠中的中流部位,并抑制中流的生長,而且修飾的囊泡耐受性良好,沒有顯示明顯的非特異性副作用或免疫應(yīng)答反應(yīng)。裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體可以被A549細(xì)胞攝取。

中流細(xì)胞的異常增殖和高遷移水平是惡性中流細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要特征。通過實驗可以用含藥外泌體DATS-Exo、空白外泌體Exo和DATS處理B16BL6細(xì)胞24h后,然后采用MTT的方法檢測細(xì)胞的增殖活性。實驗結(jié)果顯示,DATS-Exo與DATS都能夠有效抑制B16BL6細(xì)胞的增殖,且與DATS組相比,DATS-Exo的抑制作用更強(qiáng)。通過經(jīng)典的劃痕法考察含藥外泌體DATS-Exo的抑制中流細(xì)胞水平遷移能力,DATS-Exo組與DATS組相比具有更強(qiáng)的抑制效果。實驗結(jié)果表明,將大蒜素DATS制備成外泌體載藥系統(tǒng)是可以明顯提高其體外抗中流細(xì)胞轉(zhuǎn)移的能力。使用ADSC外泌體裝載姜黃素可增強(qiáng)抗肝ai的效應(yīng)。山東動物血液樣本外泌體載藥實驗參考價格

外泌體已開發(fā)作為多種藥物的載體,主要包括抗中流藥物類、kang炎藥物類、基因類及蛋白類等其他類型藥物。湖南動物組織樣本外泌體載藥實驗咨詢問價

傳統(tǒng)藥物往往存在水溶性差、易被人體快速qing除、生物相容性差、體內(nèi)分布不理想和向細(xì)胞滲透能力低等缺陷,這些問題在一定程度上限制了它們的臨床應(yīng)用。藥物投遞系統(tǒng)就是要解決上述一個或多個問題以達(dá)到增加藥物的安全性和效果的目的。在外泌體載藥中,外泌體作為藥物載體進(jìn)行藥物運(yùn)輸有獨特的優(yōu)勢,主要體現(xiàn)在:(1)當(dāng)使用自源外泌體時,外泌體引起的有害免疫反應(yīng)極低;(2)外泌體在人血液中的穩(wěn)定性好;(3)向細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)“貨物”的效率高;(4)外泌體運(yùn)載藥物時句有一定的靶向性;(5)外泌體直徑在40~100nm之間,因此可以很好地利用增強(qiáng)滲透滯留(EPR)效應(yīng),有選擇性地滲入到中流或者炎癥組織部位。湖南動物組織樣本外泌體載藥實驗咨詢問價