GFP-LC3B 融合蛋白不僅能夠利用其熒光標簽進行檢測，還可利用溶酶體對標簽蛋白的切割通過 Western blot進行檢測。GFP-LC3B 蛋白進入到自噬溶酶體內(nèi)后 LC3B 部分對溶酶體中的蛋白水解酶較為敏感，較容易被降解。而融合蛋白中的 GFP 部分則對于溶酶體中的蛋白水解酶敏感性較低，不容易被降解。使用GFP 抗體進行 Western blot 檢測可能會檢測到 GFP-LC3B-I、GFP-LC3B-II 和游離 GFP 標簽三個條帶，若出現(xiàn)游離 GFP 標簽條帶則daibiao細胞自噬流活化。此外, 在檢測同一細胞樣品時還可以使用 LC3B 抗體檢測內(nèi)源性 LC3B-I 向 LC3B-II 轉(zhuǎn)化。自噬是真核細胞蛋白降解的途徑之一。遼寧細胞自噬通路
雖然自噬促進劑和自噬阻止劑在臨床應用中有廣闊的前景，但許多分子存在特異性不足的問題，限制了它們的實際應用。例如，mTOR作為細胞中的一個重要的能量感受器，調(diào)控自噬只是其下游眾多信號通路中的一個，故而，旨在改變自噬水平的mTOR阻止劑/激動劑，存在許多可能不利于總體療效的副作用，這限制了雷帕霉素在調(diào)整神經(jīng)退行性疾病中的應用。又例如，氯喹或羥氯喹可以通過擾亂溶酶體功能阻止自噬，增強化療藥物的作用，但其免疫阻止作用有可能不利于總體的抗病效果。自噬并不引發(fā)細胞死亡，相反促進細胞存活。福建western blot檢測自噬流自噬的一大功能是清理細胞內(nèi)受損的細胞器或錯誤折疊的蛋白質(zhì)。
有研究表明，一種攜帶TSLC1抑病基因的溶瘤腺病毒可靶向Wnt信號通路使瘤細胞發(fā)生細胞自噬、凋亡等從而抑制瘤生長，可延長小鼠模型的生存期，該研究則從基因?qū)用嬲{(diào)控了瘤代謝。自噬在肝病的發(fā)生的發(fā)展中發(fā)揮重要作用，但其影響呈雙面性。自噬的誘導和抑制在肝病免疫治理中均取得了一定進展，但其作用機制并不完全明確，取決于很多因素，可能和肝病的分化、病程分期等有關(guān)。并且，自噬的調(diào)控機制在肝病發(fā)生的發(fā)展的不同階段可能起到不同的作用，如何調(diào)控自噬，減少肝病發(fā)生，并且促進細胞進入自噬死亡程序，已經(jīng)成為瘤預防和治理研究的新熱點。
自噬與凋亡合作方式在現(xiàn)有研究報道中較為多見。該種情況下，自噬與凋亡的調(diào)控目標都是促進細胞死亡。合作方式分為3種：(1)各自同步引發(fā)細胞死亡；(2)一種為主，另一為輔；(3)一方功能缺陷情況下，另一方替補誘導細胞死亡。許多誘導凋亡的刺激常常也會誘導自噬，比如神經(jīng)酰胺調(diào)整乳腺病和結(jié)腸病中均發(fā)現(xiàn)凋亡與自噬同時上調(diào)。在調(diào)整T淋巴細胞的臨床試驗中也發(fā)現(xiàn)二者被同時喚醒，藥物氯碘喹啉通過擾亂mTOR信號通路誘導白血病細胞和骨髓瘤細胞發(fā)生自噬性死亡和凋亡；靶向敲除自噬相關(guān)蛋白ATG7或用自噬阻止劑3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)會阻止caspase喚醒，減少細胞凋亡；許多情況下，自噬誘導細胞死亡的潛力被凋亡所阻止，但它會在凋亡功能缺陷時發(fā)揮關(guān)鍵作用。依托泊苷、毒胡蘿卜內(nèi)酯等處理的凋亡缺陷Bax/Bak?/?的小鼠胚胎成纖維細胞中發(fā)現(xiàn)細胞自噬上調(diào)，特異性阻止劑阻止自噬后細胞存活率明顯上調(diào)。上述情況下，自噬和凋亡通過共同作用、互補合作，或替補機制共同引發(fā)細胞死亡。分子伴侶介導的自噬：胞質(zhì)內(nèi)蛋白結(jié)合到分子伴侶后被轉(zhuǎn)運到溶酶體腔中，然后被溶酶體酶消化。
線粒體自噬屬于選擇性自噬，其主要作用是降解細胞中損傷以及不需要的線粒體。當線粒體損傷之后，在正常的線粒體中持續(xù)被降解的PINK蛋白（PARL促進此反應）會處于穩(wěn)定狀態(tài)，再通過E3連接酶Parkin的作用來誘導線粒體自噬。Parkin會誘導線粒體膜蛋白的聚泛素化，由此導致與LC3結(jié)合的自噬受體蛋白的SQSTM1/p62,NBR1,andAmbra1聚集。此外，在特定的細胞類型中，同樣存在LC3結(jié)合區(qū)域（LIR）的BNIP3和BNIP3L/NIX直接通過泛素依賴型反應機制也會聚集自噬反應的相關(guān)因子，進而促進自噬體的形成。到目前為止伴隨使用自噬晚期抑制劑，通過檢測LC3B-I/II 轉(zhuǎn)化是自噬流檢測的金指標。山西自噬透射電鏡
劇烈運動下的自噬會增加生長因子，從而加速肌肉修復。遼寧細胞自噬通路
對抗關(guān)系中，自噬與凋亡的目標及過程背道而馳。自噬并不引發(fā)細胞死亡，相反促進細胞存活。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激中，自噬通過消化蛋白聚集物和錯誤折疊蛋白維護內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能，限制了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應誘發(fā)的細胞凋亡。在細胞能量危機的時候，自噬還通過消化細胞器和蛋白質(zhì)等大分子為細胞提供能量和營養(yǎng)，延長細胞壽命。因而在成年小鼠的饑餓期、乳鼠出生后的喂養(yǎng)適應期以及營養(yǎng)剝奪的細胞中，均顯示出自噬為細胞存活所必需。在細胞遭受代謝應激、藥物調(diào)整和放射性損傷時，自噬也是維護基因完整性的重要機制。因此，在乳腺病、前列腺病及結(jié)腸病細胞中阻止自噬，能夠提高病變細胞對放化療的敏感性。線粒體自噬是自噬的一種，它能通過清理去極化線粒體減少活性氧簇，達到細胞保護的目的。線粒體自噬甚至可通過減少線粒體外膜通透化和減少細胞色素C和SMAC/DIABLO等線粒體促凋亡蛋白的釋放阻止凋亡發(fā)生。大自噬，也就是通常說的自噬，是真核細胞蛋白降解的途徑之一。遼寧細胞自噬通路