到目前為止伴隨使用自噬晚期抑制劑，通過(guò)檢測(cè)LC3B-I/II 轉(zhuǎn)化是自噬流檢測(cè)的金指標(biāo)。當(dāng)使用自噬晚期抑制劑巴弗洛霉素 A1 (bafilomycin A1, Baf A1)刺激細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)自噬溶酶體降解被抑制，此時(shí)觀察到的 LC3B-II 的變化jindaibiao自噬小體數(shù)量的改變。當(dāng)細(xì)胞自噬流活化后，LC3B-II 的含量會(huì)在使用 Baf A1的基礎(chǔ)上進(jìn)一步增加，而當(dāng)細(xì)胞自噬流阻斷后, LC3B-II 的含量則不會(huì)在使用 Baf A1 的基礎(chǔ)上發(fā)生改變。除 Baf A1 外，其他一些能提高溶酶體 pH 值的自噬晚期抑制劑也可以用于自噬流的檢測(cè)。若待檢測(cè)藥物+Baf A1 組 LC3B-II 與jin Baf A1 處理組相比明顯增加則daibiao所檢測(cè)藥物可以增加自噬小體或自噬溶酶體的合成。相反，若處理組與對(duì)照組相比，LC3B-II 降低則daibiao處理藥物減少自噬小體的合成。雖然自體吞噬不直接破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞核，但斷裂或消化剛發(fā)生時(shí)，細(xì)胞膜和細(xì)胞核會(huì)變成溶酶體消化分解自身。江西雙熒光自噬
自噬通過(guò)分解并清理受損的蛋白質(zhì)和細(xì)胞器來(lái)達(dá)到清潔細(xì)胞的效果，該過(guò)程對(duì)于神經(jīng)元等壽命較長(zhǎng)的細(xì)胞來(lái)說(shuō)十分重要，由于神經(jīng)元不再能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂，因此特別容易積聚對(duì)自身有害的蛋白質(zhì)和受損的細(xì)胞器。在他們的新研究中，科學(xué)家表明，老鼠大腦中的神經(jīng)元不需要自噬就可以存活。此外，這些神經(jīng)元細(xì)胞通過(guò)自噬相關(guān)蛋白來(lái)調(diào)節(jié)對(duì)學(xué)習(xí)和記憶至關(guān)重要的分子微管轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程。自噬對(duì)大腦的健康至關(guān)重要，這一事實(shí)得到了近十年來(lái)科學(xué)發(fā)現(xiàn)的支持?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)自噬的新功能表明，對(duì)患者自噬活性的診治性調(diào)節(jié)不只可以促進(jìn)腦部廢物清理，還可以通過(guò)改變細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的效率來(lái)改變認(rèn)知能力。自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡,作用底物是內(nèi)源性的,即細(xì)胞內(nèi)的蛻變、破損的某些細(xì)胞器或局部細(xì)胞質(zhì)。成都藥物治療自噬正常細(xì)胞自噬增強(qiáng)，可表現(xiàn)出阻止腫細(xì)胞發(fā)生的功能。
大自噬，也就是通常說(shuō)的自噬，是真核細(xì)胞蛋白降解的途徑之一。自噬可以被描述為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的成分（細(xì)胞器、蛋白等）被雙層膜的囊泡包裹，形成自噬體，進(jìn)而傳遞到溶酶體進(jìn)行降解的過(guò)程。詳細(xì)來(lái)說(shuō)，自噬過(guò)程與內(nèi)涵體途徑密不可分。一方面，自噬體能夠與晚期內(nèi)體融合形成中間囊泡較終形成自噬溶酶體；另一方面，自噬體能夠直接與溶酶體融合形成自噬溶酶體。無(wú)論通過(guò)哪條途徑，自噬溶酶體較終通過(guò)酸性水解酶將細(xì)胞器、蛋白等消化分解。細(xì)胞本底水平的自噬發(fā)生在營(yíng)養(yǎng)充足的條件下，可保護(hù)細(xì)胞免受錯(cuò)誤折疊蛋白或受損細(xì)胞器的影響，從而防止某些疾病的發(fā)生（如神經(jīng)退行性疾病和病癥）。饑餓等也可誘導(dǎo)自噬的發(fā)生，通過(guò)降解大分子物質(zhì)和細(xì)胞器為細(xì)胞活動(dòng)提供營(yíng)養(yǎng)和能量。自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡,作用底物是內(nèi)源性的,即細(xì)胞內(nèi)的蛻變、破損的某些細(xì)胞器或局部細(xì)胞質(zhì)。
肝病中瘤免疫與自噬的關(guān)系尚未完全明確。研究表明，缺乏自噬的肝臟Kupffer細(xì)胞可以通過(guò)mtROS-NF-κB-IL-1a/b通路促進(jìn)肝硬化和肝病發(fā)展。自噬缺陷協(xié)同脂質(zhì)堆積可造成肝內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞耗竭。細(xì)胞自噬還被證實(shí)可被誘導(dǎo)增強(qiáng)TGFβ介導(dǎo)的抗瘤作用，IFNγ可通過(guò)非凋亡性細(xì)胞死亡抑制Huh7肝病細(xì)胞增殖，敲除自噬后，IFNγ抑制肝病細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)肝病細(xì)胞死亡的作用消失。研究表明自噬可通過(guò)抑制抑病基因的表達(dá)或活化原病基因促進(jìn)肝病發(fā)生。在ATG5敲除的小鼠模型中，由于自噬缺陷，抑病基因p53表達(dá)增加，小鼠只發(fā)生肝良性瘤而不惡變。這進(jìn)一步提示，自噬在肝病發(fā)生中的作用及機(jī)制非常復(fù)雜，可能受到諸多因素調(diào)控，但其重要性則毋庸置疑，仍需更多的研究探索其機(jī)制。鑒于自噬在肝病發(fā)生的發(fā)展過(guò)程和機(jī)體免疫中的重要作用，研究自噬的作用機(jī)制能為肝病免疫治理找到新的靶點(diǎn)。
LC3活化并插入吞噬泡膜：LC3（在酵母中為Atg8）是一種微管相關(guān)蛋白，平時(shí)以全長(zhǎng)形式普遍分布于細(xì)胞質(zhì)中。當(dāng)自噬信號(hào)出現(xiàn)時(shí)，LC3的C端氨基酸先被Atg4移除，然后被Atg7活化，成為L(zhǎng)C3-I。在Atg3的介導(dǎo)下，LC3-I較終在上文中提到的Atg5-Atg12-Atg16L復(fù)合物催化下，連接上一個(gè)磷脂酰乙醇胺分子，使其可以插入吞噬泡膜中，成為鉚定的的LC3-II。LC3-II在促進(jìn)吞噬泡與待降解細(xì)胞器的膜融合，以及識(shí)別待降解細(xì)胞器中扮演了重要的角色。由于LC3-II的形成是依賴活化信號(hào)的，所以熒光標(biāo)識(shí)的LC3已被普遍用作自噬小體形成的生物標(biāo)記。需要注意的是，在哺乳動(dòng)物中，LC3有三種亞型（LC3A,LC3B,LC3C），但只有LC3B-II與吞噬泡增加有關(guān)，故而宜使用anti-LC3B抗體標(biāo)記LC3。另外，從前有人認(rèn)為，LC3-II和LC3-I的比例可以作為衡量自噬活躍程度的指標(biāo)，但現(xiàn)在普遍認(rèn)為，只需測(cè)定LC3-II的表達(dá)即可反映自噬活躍程度。在細(xì)胞遭受代謝應(yīng)激、藥物調(diào)整和放射性損傷時(shí)，自噬也是維護(hù)基因完整性的重要機(jī)制。臺(tái)州透射電鏡觀察自噬
在組織細(xì)胞受到各種理化因素傷害時(shí)，自噬性溶酶體大量增加，因此對(duì)細(xì)胞的損傷起一種保護(hù)作用。江西雙熒光自噬
自噬是細(xì)胞內(nèi)的一種自食（Self-eating）的現(xiàn)象，自噬和凋亡二者共用相同的刺激因素和調(diào)節(jié)蛋白，但是誘發(fā)閾值和門(mén)檻不同，如何轉(zhuǎn)換和協(xié)調(diào)目前還不清楚。自噬是指膜（目前來(lái)源還有爭(zhēng)議，大部分表現(xiàn)為雙層膜，有時(shí)多層或單層）包裹部分胞質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)需降解的細(xì)胞器、蛋白質(zhì)等形成自噬體（autophagosome），結(jié)尾與溶酶體融合形成自噬溶酶體（autophagolysosome），降解其所包裹的內(nèi)容物，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞器的更新。線粒體自噬通過(guò)自噬降解胞內(nèi)受損或多余的線粒體，是維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵機(jī)制之一。江西雙熒光自噬