樣本預處理與外泌體分離、保存：外泌體存在于人類或動物的各種體液中，我們可以選擇不同的樣本來源進行相關(guān)的外泌體研究。由于外泌體是來源于細胞質(zhì)膜內(nèi)陷的含有脂質(zhì)雙分子層膜結(jié)構(gòu)的多泡小體，分布于胞外基質(zhì)。為了獲得高純度的外泌體，必須確保有效去除所有的細胞碎片及其他不需要的雜質(zhì)。不同的實驗樣本采集時需要注意的地方不一樣，如細胞培養(yǎng)上清在收集樣本前需換成無外泌體血清培養(yǎng)、血漿樣本采集時用一定不能用肝素抗凝管、尿液收集時需要加抑菌劑等。外泌體在組織修復領(lǐng)域均起著重要的作用，并且可以作為很好靶向給藥系統(tǒng)。河南胸水外泌體western blot
l 慢病毒介導CD63-GFP表達：將外泌體的特定蛋白CD63和綠色熒光蛋白GFP的表達元件構(gòu)建成質(zhì)粒再包裝到慢病毒中，隨后用此慢病毒傳播細胞，使細胞分泌的外泌體帶有綠色熒光。外泌體功能研究：將標記的外泌體加入受體細胞培養(yǎng)基中，與受體細胞進行共培養(yǎng)，觀察細胞的功能變化，如細胞增殖、遷移與侵襲、細胞凋亡等；或者將外泌體注射入動物模型中，觀察動物表型變化和檢測動物相關(guān)指標。外泌體（exosomes）是一種能被機體內(nèi)大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜，直徑大約為 30-150 nm。外泌體普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號分子，形成了一種全新的細胞-細胞間信息傳遞系統(tǒng)，影響細胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進程密切相關(guān)。江蘇細胞外泌體透射電鏡檢測外泌體作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。
雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢，但在臨床應(yīng)用上仍有一些限制：外泌體的提取方法金標準仍然是差速離心法，但這種方法費時費力且提取效率較低，難以進行臨床推廣和應(yīng)用；而商業(yè)化的試劑盒質(zhì)量參差不齊，往往導致提取物雜質(zhì)過多，且其售價較高。外泌體的定量是采用顆粒濃度定量，蛋白濃度定量，亦或是核酸濃度定量，目前仍存有爭議。由于傳統(tǒng)的內(nèi)參并不適用于外泌體，在實時熒光定量PCR檢測靶分子含量時內(nèi)參的選擇尚沒有統(tǒng)一的標準。外泌體分子標志物的研究還處于初級階段。目前外泌體研究的整個流程中成本都很高。
當外泌體在第1次被發(fā)現(xiàn)的時候，外泌體被認為是細胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、瘤侵襲等方方面面。有研究表明瘤來源的外泌體參與到瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導致大量新生血管的生成，促進了瘤的生長與侵襲。建立記錄各論文實驗條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。
泌體是細胞內(nèi)源性的小囊泡，由大多數(shù)細胞分泌。在抗原呈遞細胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后，人們對外泌體的興趣增強，并且觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。在過去幾年中，有幾個實驗室報道了各種細胞類型的外泌體分泌，并討論了其潛在的生物學功能。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質(zhì)，總結(jié)了其生物學效應(yīng)，特別是免疫系統(tǒng)，討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡（EVs）表示了細胞間通訊的一個重要模式，作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。然而，我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達，由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞。北京外泌體粒徑檢測
細胞外囊泡（EVs）表示了細胞間通訊的一個重要模式。河南胸水外泌體western blot
外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞，調(diào)控細胞生理活動。同時，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導正常細胞轉(zhuǎn)化、促進種瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫有哪些？l exoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA，包括circRNA、lncRNA和mRNA。l EVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。l ExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個物種的286個研究結(jié)果，涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。河南胸水外泌體western blot