在20世紀(jì)80年代，外泌體被描述為從網(wǎng)織紅細胞分泌的內(nèi)體來源的囊泡。人們對這些細胞外囊泡的興趣逐漸增加，因為它們似乎參與了很多細胞過程。外泌體攜帶蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和RNAs，介導(dǎo)體內(nèi)不同細胞類型之間的細胞間通訊，從而影響正常和病理狀態(tài)。只有近，科學(xué)家才認識到將外泌體與其他類型的細胞外囊泡分開的困難，這排除了特定功能對不同類型分泌的囊泡的明確歸因。為了闡明這個復(fù)雜但正在發(fā)展的科學(xué)領(lǐng)域，該綜述著重于外泌體和其他分泌的細胞外囊泡的定義。討論了它們的生物發(fā)生，分泌及其后續(xù)的命運，因為它們的功能依賴于這些重要過程。有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。遼寧胸水外泌體提取
結(jié)果表明，PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。應(yīng)用Tim4的外泌體強結(jié)合能力，可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。以前無法用超速離心法提取的微囊泡，也通過運用PS親和法實現(xiàn)高純度提取。本指導(dǎo)書中對該技術(shù)進行詳細說明，這項技術(shù)的有用性今后將受到世界各方評價，有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即：對各種外泌體的分類。研究人員尚未統(tǒng)一定義以何種方法提取的細胞外囊泡可以稱之為外泌體，給實驗數(shù)據(jù)的分析和重復(fù)性確認帶來困難。近年，隨著國際細胞外囊泡協(xié)會的成立、世界性研究者研討會的舉辦，提案MISEV指南作為國際標(biāo)準(zhǔn)，計劃或已經(jīng)開始進行EV研究的科學(xué)家請務(wù)必閱讀這些方針。遼寧胸水外泌體提取外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。
多年來，外泌體被認為參與無用的細胞內(nèi)含物質(zhì)的釋放。但是近年來，外泌體在活內(nèi)作為運載脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA等細胞間信息傳遞的新型媒介而倍受矚目。隨著其功能在生理及病理功能的闡明，外泌體在臨床應(yīng)用的相關(guān)研究中，特別是診斷醫(yī)治、生物標(biāo)記的開發(fā)也迅速發(fā)展起來?，F(xiàn)在，外泌體研究幾乎涉及所有的研究領(lǐng)域（免疫、神經(jīng)系統(tǒng)、癥狀、內(nèi)分泌、循環(huán)系統(tǒng)等）。例如，免疫細胞來源的外泌體含有抗原肽/MHC復(fù)合體和可能控制著免疫細胞間抗原信息的交換、免疫細胞活化/非活化等各種免疫應(yīng)答機制的各種抗原。
外泌體是由各種細胞分泌的小型膜囊泡（直徑30~100nm），存在于大多數(shù)體液（如血液、尿液、髓液等）和細胞培養(yǎng)液中。外泌體是由脂質(zhì)雙層膜包被的膜囊泡，產(chǎn)生于稱為多囊泡體的細胞外囊泡中，多囊泡體通過與細胞膜融合將外泌體釋放到細胞外。外泌體含核內(nèi)體來源的蛋白質(zhì)（如ESCRTs）、細胞內(nèi)運輸相關(guān)蛋白（如RabGTPase等）及細胞膜來源蛋白（如CD63, CD81等）等各種內(nèi)分泌細胞來源的蛋白和RNA，同時還含有分泌細胞膜來源和內(nèi)體膜來源的脂質(zhì)（如膽固醇和鞘磷脂等）。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。
外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是單獨對低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào)，進一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。外泌體并作為癥狀早期診斷技術(shù)，應(yīng)用于與癥狀進展相關(guān)的研究。遼寧胸水外泌體提取
外泌體具有相似布朗運動的蛋白質(zhì)聚集體，因此無法排除其他物質(zhì)干擾。遼寧胸水外泌體提取
外泌體的組成較為復(fù)雜，其內(nèi)含有多種生物大分子，如：核酸（雙鏈DNA和各種RNA亞型）、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。這些分子被外泌體攜帶進入血液循環(huán)，而后被靶細胞吸收，從而調(diào)節(jié)靶細胞基因表達和細胞功能。此外，外泌體相關(guān)的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子，調(diào)節(jié)致病基因或抑病基因的表達，參與細胞分化、細胞凋亡及細胞信號的傳導(dǎo)。有研究表明，外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強種瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力、介導(dǎo)種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進而促進種瘤的發(fā)發(fā)展。遼寧胸水外泌體提取